L O G O Работу выполнила студентка группы Бм-1101 Пантюхина Татьяна

L/O/G/O Работу выполнила: студентка группы Бм-1101 Пантюхина Татьяна Владимировна Киров – 2017

Идентификация (от позднелат. identifico – отождествляю) – определение видовой или типовой принадлежности микроорганизма на основании изучения фенотипических и генотипических признаков. Вид – это совокупность микроорганизмов, имеющих единое происхождение и генотип, сходных по морфологическим и биологическим свойствам, обладающих наследственно закрепленной способностью вызывать в среде естественного обитания качественно определенные специфические процессы

Биохимические методы Брожение • образование газа Протеолиз • гидролиз белков Липолиз Реакции восстановления Определение индола Определение продукции каталазы • расщепление жиров • восстановление соединений • гидролиз триптофана • образование водорода и воды

Иммунохимические методы Реакция агглютинации • склеивание и выпадение в осадок микробных тел при взаимодействии их со специфическими антителами –агглютининами. РПГА Для небольших антигенов. Суть: адсорбция на носителях (эритроцитах) с последующей их агглютинацией специфическими антителами.

1 - нанесение на активированную бумагу или нитроцеллюлознцю мембрану, 2 – добавление сыворотки больного, 3 – отмывка и нанесение сыворотки меченной ферментом, 4 - добавление хромогенного субстрата

Молекулярно-генетические методы Разделение ДНК (94 -95°С) Денатурация Присоединение комплементарных праймеров к одноцепочечной ДНК Достраивание Taqполимеразой второй цепи ДНК (72°С) Элонгация Отжиг (40 -65°С)

Охлаждение Присоединение комплементарных олигонуклеотидов к одноцепочечной ДНК - лигирование (+65°С) Денатурация ДНК и отделение лигированного продукта от матрицы (+95°С ) Нагрев

- гибридизация зонда образует с участком ДНК 1. Денатурация - переход молекул ДНК (или РНК) из двуцепочечной формы в одноцепочечную вследствие нарушения водородных связей между полинуклеотидными цепями и стэкинг-взаимодействий. 2. Ренатурация - реассоциация денатурированных комплементарных цепей ДНК с образованием двухцепочечной молекулы гетеродуплекса. 3. Детекция метки

Секвенирование фрагментов генома Обозначение аллелей согласно разработанной номенклатуре Объединение номеров по нескольким локусам в аллельный профиль С помощью компьютерного обеспечения на основании анализа аллельных профилей проводится генетическая характеристика штаммов

выявление (с помощью рестрикционно анализа и последующей гибридизации со специфическими зондами) в генетическом материале уникальных по структуре повторяющихся участков ДНК, характерных для данного организма. Вариабельные тандемные повторы монотонно повторяющиеся участки ДНК. Разная локализация и разное число этих повторов, которые отличаются у особей данного вида и являются их уникальными генетическими характеристиками

биологический компонент + преобразователь Микроорганизм + биосенсорная техника измерения ИФА

- анализ воздушного пространства над образцом для определения летучих компонентов (ЛК), которые определяют специфический запах бактерий.

Заключение Классические методы определения бактерий являются трудоемкой и длительной процедурой с использованием дорогостоящего оборудования. Увеличение числа анализируемых образцов, требующих проверки и контроля, и потребность в высокой чувствительности, скорости и точности аналитических измерений стимулировали значительный интерес к созданию новых методов идентификации. Современные методы анализа и идентификации микроорганизмов направлены преимущественно на повышение чувствительности и уменьшение времени процедур и их стоимости.