Культура клеточных суспензий Выращивание в жидкой среде во взвешенном состоянии отдельных клеток или их небольших агрегатов при использовании аппаратуры, обеспечивающей их аэрацию и перемешивание. Системы для культивирования ▪ Накопительное (периодическое) культивирование ▪ Непрерывное культивирование
Фазы ростового цикла в суспензионной культуре 1 - латентная фаза 2 – экспоненциальная (логарифмическая) 3 – линейная 4 – замедление роста 5 – стационарная 6 – гибель клеток
Непрерывное культивирование Схема одного из типов биореактора
Основные параметры клеточных суспензий ▪ Минимальное время удвоения клеточной суспензии ▪ Вес сырого вещества суспензии ▪ Вес сухого вещества суспензии ▪ Количество клеток в 1 мл одноклеточной суспензии ▪ Размер клеток ▪ Жизнеспособность клеток
Культура in vitro для получения биологически активных соединений Биологически активные соединения (вторичные продукты биосинтеза, вторичные метаболиты) – вещества, способные оказывать влияние на биологические процессы в организме. Известно более 100 000 вторичных метаболитов
Функция вторичных метаболитов у растений -Биозащита от вирусных, бактериальных, грибковых инфекций, травоядных животных, насекомых, от других растений (аллелопатия) Алкалоиды (содержат азот) накопление в семенах, при прорастании деградация алколоидов, простые азотистые вещества усваиваются проростками. Производные фенола - предохраняют растения от УФ-облучения.
• Сердечные гликозиды (сложные органические соединения типа эфиров, влияют на сердечно-сосудистую систему): - наперстянка (дигоксин, дигитоксин и др. ), - горицвет (адонизид, настой травы горицвета), - строфант (строфантин К), - ландыш (коргликон, настойка ландыша) • Горечи - безазотистые органические соединения с очень горьким вкусом. Выделены из многих растений (особенно богаты растения семейства сложноцветных) - Например, для возбуждения аппетита. - полынь, корни одуванчика • Сапонины (от лат. sapo - мыло) - это растительные гликозиды, при взаимодействии с водой образуют плотную пену, эмульгируют жир и обладают гемолитическим действием (разрушают эритроциты). - В пищевой промышленности (солодка - для производства пива и шипучих напитков, мочения яблок и брусники, в производстве халвы), - В текстильной промышленности (для фиксации красок). - В медицине (при сухом кашле - первоцвет, солодка, синюха).
• Стерины - полициклические спирты, близки к стероидам. (анаболики) - стимуляция синтеза протеинов в мышцах) - левзея сафлоровидная • Каротиноиды (желтый, оранжевый, красный) • Полифенолы (дубильные вещества, танины)- чай – до 30 полифенолов; виноград (косточки) - флавоноиды; антоцианы – цвет вина, (антиоксиданты) • Алколоиды - азотсодержащие вещества в форме солей органических кислот: яблочной, лимонной, щавелевой. (лекарственные препараты широкого действия, яды) Кофе (кофеин), барбарис (берберин), стручковый перец (капсаицин), женьшень (амирин) • Витамины • Хиноны - красная и желтая окраска (грецкие орехи, ревень, щавель, шпинат) • Вещества, обладающие - специфическим ароматом, - вкусом, - окраской.