Культивирование вирусов В настоящее время существуют следующие

Культивирование вирусов

В настоящее время существуют следующие методы культивирования вирусов: ■ на восприимчивых домашних и лабораторных животных (телята, мыши, белые крысы, кролики, морские свинки, хомяки, цыплята); ■ на развивающихся куриных эмбрионах, деэмбрионированных яйцах и эмбрионах других видов птиц; ■ в культурах ткани и клеток.

Восприимчивость лабораторных животных к вирусам

Восприимчивость лабораторных животных к вирусам

На чувствительность животных к вирусам влияют следующие факторы. 1. Возраст. Наиболее восприимчивы молодые животные (мышата, крольчата и др. ), так как у них нет совершенной системы защиты организма. Однако эмбрионы некоторых животных, находясь в утробе матери, начинают вырабатывать специфические антитела. 2. 2. Наличие неспецифических ингибиторов, которые выполняют защитную функцию организма. В организме молодых животных низкое содержание ингибиторов, но с возрастом их концентрация увеличивается и соответственно повышается сопротивляемость организма к вирусам. 3. Пол животных. Наиболее чувствительны особи женского пола — самки (болезнь Марека), менее — мужского пола (самцы).

1. 2. 3. 4. На чувствительность животных к вирусам влияют следующие факторы. Возраст. Наиболее восприимчивы молодые животные (мышата, крольчата и др. ), так как у них нет совершенной системы защиты организма. Однако эмбрионы некоторых животных, находясь в утробе матери, начинают вырабатывать специфические антитела. 2. Наличие неспецифических ингибиторов, которые выполняют защитную функцию организма. В организме молодых животных низкое содержание ингибиторов, но с возрастом их концентрация увеличивается и соответственно повышается сопротивляемость организма к вирусам. Пол животных. Наиболее чувствительны особи женского пола — самки (болезнь Марека), менее — мужского пола (самцы). Генетические линии. Одни животные более чувствительны, другие — резистентны.

По генетическим качествам лабораторных животных делят на четыре группы: 1) животные смешанного происхождения, полученные от разных животноводов, такие животные гетерогенны; 2)животные, полученные непосредственно из одного источника, однако генетически такие животные вариабельны; 3) инбредные линии животных 4) однородные гибриды F 1

Важнейшие вирусные заболевания лабораторных мышей

Важнейшие вирусные заболевания лабораторных мышей

Для некоторых вирусологических работ, например при выделении вируса с невыясненными болезнетворными свойствами, необходимо использовать гнотобиотов. Термин «гнотобиоты» объединяет две категории животных: безмикробных (стерильных), не содержащих никаких жизнеспособных микробов, и гнотофор — носителей одного (моногнотофоры), двух (дигнотофоры) или более (полигнотофоры) микроорганизмов.

В настоящее время безмикробные животные по динамике роста делятся на три группы: I — обезьяны, поросята, цыплята растут лучше обычных животных или наравне с ними; II — крысы, мыши, собаки, кошки растут наравне с обычными животными; III — морские свинки, кролики, козлята, ягнята растут хуже обычных животных.

СПФ-животные -это животные, свободные только от патогенных микроорганизмов. В их организме имеются все необходимые для нормальной жизнедеятельности бактерии и вирусы, которые в совокупности создают группу так называемой резидентной (полезной) микрофлоры. В настоящее время получены лабораторные СПФ-животные — крысы, морские свинки, кролики, поросята, птицы

Внутримозговое заражение

Способы заражения лабораторных мышей. Заражение через желудочно-кишечный тракт

Внутрибрюшинное заражение

Внутривенное заражение в хвостовую вену

Схема внутривенного заражения

Подкожное заражение

Заражение в яремную вену

Условия, влияющие на размножение вирусов в куриных эмбрионах. 1. Температура от 35 до 37 °С является оптимальной для размножения вирусов гриппа. 2. Возраст эмбриона. В зависимости от вида вируса, способа заражения и задач исследования используют эмбрионы в возрасте 8— 12 дней. 3. Концентрация введенного вируса существенно влияет на размножение вируса. Наиболее активное накопление вируса гриппа А 2 отмечается при введении 10000— 100000 инфекционных доз. Введение неразведенного вируса вызывает менее обильное накопление инфекционного вируса. 4. Метод заражения. При заражении в амнион и желточный мешок вирус осповакцины накапливается медленно и в низких титрах, а эмбрионы погибают через 48 ч, поражения на оболочках появляются в меньшем количестве.

Культивирование вирусов на куриных эмбрионах

Недостатки метода культивирования вирусов в куриных эмбрионах: ■ куриные эмбрионы могут быть носителями микроорганизмов (сальмонеллы, туберкулезная палочка), в том числе вирусов (лейкоз птиц, бронхит кур и др. ) и противовирусных антител; ■ не все вирусы культивируются в куриных эмбрионах.

Флаконы, чашки и планшеты для клеточных культур

Сформировавшиеся бляшки вируса желтой лихорадки на культуре клеток

Бляшки вируса животных на клеточной культуре

Работа с культурами клеток в стерильной комнате

Культура тканей — сборное понятие, обозначающее систему, в которой клетки, ткани или органы сохраняют жизнеспособность или способность размножаться in vitro более 24 ч. В зависимости от вида биологического объекта различают: культуру клеток— термин, который обозначает рост клеток in vitro и включает в себя также рост единичных клеток (клетки в культуре не образуют ткань); культуру тканей или органов — термин, который обозначает поддержание роста тканей, зачатков органов или их частей in vitro при сохранении их дифференцировки, структуры и (или) функции.

1. Культуры переживающих тканей в жидкой среде и на агаре, которые или вообще не размножаются in vitro, или дают очень слабый рост, т. е. в них отсутствует процесс размножения клеток. 2. Культуры растущих клеток – клетки активно делятся и размножаются

Недостатки культур тканей • Загрязнение бактериями, дрожжами и грибами. • Загрязнение вирусами

Наиболее вероятные эндогенные вирусные контаминанты первичных культур клеток домашних животных (по Сергееву В. А. и авт. , 2007)