Кровяные инфекции Лекция профессора М. Н. Бойченко
Боррелиозы n n Боррелиозы – группа болезней, вызываемых спирохетами рода Borrelia, передающихся человеку через укусы членистоногих. Род Borrelia включает более 30 видов спирохет. Патогенные виды рода Borrelia вызывают как антропонозные (возвратный тиф), так и зоонозные ( эндемический возвратный тиф, болезнь Лайме) инфекционные заболевания с трансмиссивным путем передачи возбудителей через клещей и вшей.
Возвратные тифы n Боррелии являются тонкими спирохетами, размером 0, 3 – 0, 6 х 20 мкм , с 3 -10 крупными завитками. Двигательный аппарат состоит из 15 -20 фибрилл. Они хорошо воспринимают анилиновые красители, по Романовскому-Гимза окрашиваются в сине-фиолетовый цвет. Боррелии могут культивироваться на сложных питательных средах, содержащих сыворотку, асцит, тканевые экстракты, при температуре 28 -35 о С в атмосфере 5 -10% СО 2 , а также в куриных эмбрионах при заражении в желточный мешок.
Возвратные тифы n n n Возвратные тифы – группа острых ифекционных заболеваний, вызываемых боррелиями, характеризующихся острым началом, приступообразной лихорадкой, общей интоксикацией. Различают эпидемический и эндемический возвратный тифы. Эпидемический возвратный тиф является антропонозной инфекцией, возбудителем которой является B. recurrentis. Единственным источником возбудителя является лихорадящий больной, в периферической крови которого находятся боррелии. Переносчиком возбудителя являются вши (лобковые, платяные, головные), реже клопы.
Возвратные тифы n Эндемический (клещевой) возвратный тиф - зоонозное природно-очаговое заболевание. Возбудители представлены более 20 видами боррелий, циркулирующих в различных природных очагах тропиков и субтропиков различных стран. Так, B. persica Азии, B. caucasica - Кавказа, Закавказья, Украины. Резервуаром в природе являются грызуны, ряд других животных а также аргасовые клещи, у которых микроб передается трансовариально. Человек заражается через укусы клещей рода Ornithodoros
Патогенез и клиника возвратных тифов n . Патогенез и клинические проявления обоих типов возвратных тифов схожи. Попавшие в организм боррелии внедряются и захватываются клетками лимфоцитарно – макрофагальной системы, размножаются в них и попадают в большом количестве в кровь, вызывая лихорадку ( повышение температуры тела до 39 -40 о. С), головную боль, озноб. Каждая такая атака заканчивается подъемом титра антител. Взаимодействуя с ними, боррелии образуют агрегаты, которые нагружаются тромбоцитами, вызывая закупорку капилляров, следствием чего
Возвратные тифы n Под влиянием антител большая часть боррелий погибает. Однако, в течение инфекции антигены боррелиий подвергаются изменениям, а так как антитела выработаны против одного типа антигенов, новые антигенные варианты боррелиий появляются снова, вызывая рецидив заболевания. Это повторяется от 3 до 20 раз. Иммунитет к возвратным тифам гуморальный, непродолжительный.
Возвратные тифы n n Лабораторная диагностика. Основной метод диагностики возвратных тифов – микроскопическое исследование крови больного в препарате толстой капли и в обычном мазке. Для дифференциации эпидемического и эндемического возвратных тифов используют биологическую пробу на морских свинках.
Возвратные тифы n n Для бактериоскопического исследования у больного берут кровь из пальца во время нападения лихорадки, изготавливают препарат толстой капли и мазок. Высушенную толстую каплю не фиксируют, Мазок фиксируют смесью Никифорова. На толстую каплю наносят краситель Романовского сначала на 5 минут для того, чтобы прошел гемолиз, потом его заменяют на свежий и выдерживают еще 40 минут. Препарат осторожно промывают водой, высушивают, микроскопируют под иммерсионным объектовом. Боррелии возвратного тифа окрашиваются в синефиолетовый цвет При заражении кровью больных морских свинок, морские свинки не чувствительны к B. recurrenti, но чувствительны к возбудителям
Болезнь Лайма n n Болезнь Лайма (син. хроническая мигрирующая эритема, клещевой иксодовый боррелиоз) является хронической инфекцией, с поражением кожи, сердечной и нервной систем, суставов. Возбудителем болезни Лайма в Северной Америке является вид B. burgdorferi, на Евро. Азиатском - B. garini, B. afzelii, которые различаются между собой по антигенной структуре. К настоящему времени выделено более 10 близких видов боррелий, циркулирующих в различных очагах на территории различных стран.
Болезнь Лайма n Типичные по морфологическим и тинкториальным свойствам боррелии, которые хорошо культивируются на питательных средах при выделении из клещей. Выделить возбудитель из материала от больного ( крови, ликвора) оставляет трудности. Обладают сложной антигенной структурой. Антигенами являются белки флагелл и цитоплазматического цилиндра, но антитела к ним не обладают защитными свойствами
Болезнь Лайма n Защитные свойства имеют антитела к интегральными белками наружной мембраны. Эти антигены вариабельны, видоспецифичны, они изменяются в процессе жизненного цикла боррелий. Липидмодифицированные белки наружной мембраны обеспечивают способность боррелий прикрепляться и проникать в клетки хозяина, а также индуцировать иммунопатологический процесс в организме человека и вызывать воспалительную реакцию.
Болезнь Лайма n Заболевание передается человеку через укусы клешей рода Ixodes и распространено в ареале обитания этих клещей. Патогенез связан с распространением возбудителя из места укуса с током крови к различным органам, особенно к сердцу, ЦНС, суставам. Заболевание сопровождается развитием аутоиммунных и иммунопатологических процессов.
Болезнь Лайма n Клиника подразделяется на 3 стадии: 1) мигрирующая эритема, 2) доброкачественные поражения сердца и ЦНС в виде миокардита и асептического менингита, появляющиеся на 4 -5 недели заболевания, 3)поражения крупных суставов, возникающие через 6 недель и более от начала заболевания. Иммунитет гуморальный, видоспецифический к антигенам клеточной стенки боррелиий
Болезнь Лайма n Лабораторная диагностика. Для диагностики используют бактериоскопию ПЦР и серологические методы исследования.
Болезнь Лайма n n Прямая бактериоскопия позволяет обнаружить возбудитель в биоптатах кожи, крови, синовиальной жидкости. При микроскопии биоптатов кожи часто используют метод импрегнации серебром. Однако концентрация боррелий в крови, ликворе, биоптатах очень маленькая, поэтому бактериоскопический метод обладает низкой диагностической ценностью. ПЦР позволяет определить наличие ДНК боррелиий в кожном биоптате, крови, моче, ликворе и суставной жидкости. Высокая чувствительность этого метода позволяет определить инфицированность пациента на 7 -14 день после присасывания клеща
Болезнь Лайма n Серологические методы являются основными методами выбора в диагностике болезни Лайме. Антитела обнаруживаются обычно на 3 -6 неделе от начала заболевания. Для серологического исследования используют непрямую РИФ и ИФА. Для более точной постановки диагноза, в качестве подтверждающего теста рекомендуется постановка иммунного блотинга, который обладает высокой чувствительностью и специфичностью, позволяя определить наличие специфических антител к определенным белкам возбудителя на конкретной стадии развития заболевания.
Риккетсиозы n Риккетсиозы – группа острых трансмиссивных болезней человека, которые вызываются бактериями рода Rickettsia, протекающие с развитием выраженной интоксикации, генерализованного панваскулита, поражения ЦНС, внутренних органов и характерных высыпаний на теле. По современной классификации род Rickettsia входит порядок Ricketsiales, сем. Ricketsiaceae
Основные свойства бактерий рода Rickettsia: n n n n Морфологически представлены грамотрицательными палочками Не культивируются на искусственных питательных средах. Абсолютные внутриклеточные паразиты. Так как не способны продуцировать достаточно энергии Делятся бинарным делением Размножаться могут, как в цитоплазме (R. prowazekii), так и в ядре клеток (R. sibirica). Не устойчивы в окружающей среде Поражают эндотелий сосудов, с развитием васкулитов, следствием чего является появление сыпи и развитие геморрагий
Факторы патогенности n n n Белки клеточной стенки обеспечивают прикрепление бактерий к эндотелиальной клетке-мишени фосфолипаза А 2, разрыхляет мембрану клетки, мирокапсула и токсические субстанции, в виде липополисахарида и фосфолипидов. Токсичность риккетсий и их пирогенное действие связано преимущественно с поражением риккетсиями эндотелиальных клеток сосудистого русла.
Риккетсиозы n Обладают термостабильным группоспецифическим антигеном, выявляемом в РСК и видоспецифическими белковыми антигенами. ЛПС некоторых риккетсий (Провачека) имеют общие антигены с протеем.
Риккетсиозы n n В составе рода выделяют две группы - клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ) и сыпного тифа (СТ)
Риккетсиозы n К группе СТ отнесены R. prowazekii - возбудитель эпидемического, передаваемого вшами, сыпного тифа и болезни Брилля и R. typhi - возбудитель эндемического (крысиного или блошиного) сыпного тифа. В группу КПЛ входят 18 видов, в том числе и возбудитель клещевого сыпного тифа.
Риккетсиозы n Среди перечисленных риккетсиозов эпидемический сыпной тиф является чисто антропонозной инфекцией, возбудитель которой циркулирует между человеком и его специфическими экзопаразитами – вшами. Другие риккетсиозы являются зоонозными инфекциями, при которых возбудители циркулируют между домашними или дикими животными и кровососущими членистоногими, способными заражать риккетсиями человека
Риккетсиозы n n Микробиологическая диагностика Основным методом диагностики является серологический с использованием РСК, РНГА, РНИФ, ИФА и молекулярно-генетический (ПЦР), так как методы выделения и последующей идентификации риккетсий требуют соблюдения режимных требований (возбудители 2 группы патогенности). Обнаружение возбудителей в снятых с человека переносчиках проводят при помощи экспресс - методов (РИФ, ИФА, РОНГА, с иммуноглобулиновыми диагностикумами для выявления антигенов риккетсий
Эпидемический сыпной тиф n Эпидемический сыпной тиф инфекционная болезнь, антропоноз, вызываемая Rickettsia prowazekii, переносчиком которой является платяная вошь. Характеризуется лихорадкой, интоксикацией, специфической розеолезнопетехиальной сыпью, поражением сосудистой и центральной нервной систем.
Таксономия n Возбудитель Rickettsia prowazekii назван по имени американского ученого Н. Риккетса и чешского ученого С. Провачека, погибших при изучении этого заболевания
Морфологические и культуральные свойства n Типичные по морфологии риккетсии, Культивируются в в желточном мешке куриного эмбриона, на лабораторных животных ( мыши, морские свинки) в культуре клеток. Для Rickettsia prowazekii характерно накопление микроорганизмов в больших количествах в отдельных клетках. Дегенеративные изменения клеток вследствие перепроизводства возбудителя сопровождаются их разрывом и освобождением микроорганизмов с распространением инфекции на соседние клетки.
Эпидемический сыпной тиф n Антигенная структура Обладает поверхностным группоспецифическим термостабильным антигеном, общим с антигеном с возбудителем эндемическим сыпным тифом антигеном и термолабильным видоспецифическим антигеном, имется общий антиген с протеем ОХ 19.
Эпидемический сыпной тиф n n Резистентность Rickettsia prowazekii чувствительны к действию высокой температуры, дезинфектантам и антибиотикам. Rickettsia prowazekii длительно сохраняются в экскрементах переносчика (платяных вшей) при комнатной температуре (до 233 дней). Длительное сохранение Rickettsia prowazekii в фекалиях вшей имеет значение в заражении людей фекалиями переносчиков, содержащих риккетсии, при расчесах или аэрогенным путем. Яичные культуры риккетсий в лиофилизированном состоянии при температуре +4˚ С можно сохранять в течение нескольких лет, наиболее эффективно хранение при низких температурах
Эпидемический сыпной тиф n Эпидемический сыпной тиф - одна из наиболее значимых эпидемических инфекций, получавших наибольшее распространение в период войн, других социальных и природных потрясений (т. е. на фоне увеличения вшивости населения). Переносчик возбудителя – платяная вошь. Головная и лобковая вошь также могут переносить возбудителя.
Сыпной тиф n Вши заражаются при кровососании на больном. В организме вши риккетсии размножаются в эпителии кишечника и выделяются в просвет кишечника. Риккетсии в высоких концентрациях содержатся в фекалиях вшей. В слюнных железах вшей риккетсии не содержатся, поэтому, при укусе риккетсии не передаются. Укус вызывает зуд у человека, при расчесе места укуса человек втирает фекалии вши, содержащие риккетсии, таким образом происходит заражение.
Эпидемический сыпной тиф n С R. prowazekii также связана болезнь Брилля-Цинссера - рецидив эпидемического сыпного тифа, возникающий у переболевших через месяцы - десятки лет (эндогенная реактивация возбудителя). При наличии платяных вшей больной болезнью Брилля может явиться исходным звеном эпидемической цепи вспышки сыпного тифа.
Эпидемический сыпной тиф n Попадая в кровь, возбудитель проникает в клетки эндотелия сосудов, где размножается, разрушая эндотелиальные клетки и выделяя токсические субстанции. В этом процессе принимают участие микрокапсула, фосфолипаза А 2, адгезин , Поражаются преимущественно мелкие сосуды, вызывая нарушения микроциркуляции в головном мозге, миокарде , почках, что приводит к развитию менингоэнцефалита, миокардита и гломерулонефрита.
Эпидемический сыпной тиф n Инкубационный период - 10 – 14 дней. Заболевание характеризуется длительной лихорадкой, появлением в разгар заболевания розеолезной, далее розеолезно-петехиальной или розеолезно-папулезной сыпи, резкими изменениями нервной и сердечно-сосудистой систем, тифозным статусом, наличием осложнений. В организме больного риккетсии могут длительно персистировать и после выздоровления, что приводит к появлению рецидива сыпного тифа- болезни Брилля, которая возникает у ранее переболевших лиц как рецидив эндогенной инфекции.
Эпидемический сыпной тиф n n Клиническая картина при болезни Брилля аналогична таковой при острой форме, но клинические проявления менее выражены. Иммунитет Стойкий, длительный, антибактериальный и антитоксический, нестерильный.
Эпидемический сыпной тиф n Диагностика сыпного тифа осуществляется комплексом серологических реакций, который включает постановку реакции агглютинации риккетсий (РАР), РНГА, РСК и ИФА.
Эпидемический сыпной тиф n Использование комплекса серологических реакций позволяет провести ретроспективную диагностику, следить за динамикой инфекционного процесса, а также отдифференцировать сыпной тиф от других риккетсиозов и болезни Брилля
Эпидемический сыпной тиф n n n РАР Сыворотку больного разводят от 1: 25 до 1: 800. Диагностический титр 1: 100 Агглютинины появляются на 3 -5 день заболевания, максимального титра достигают к 20 дню болезни. У реконвалесцентов сохраняются в течение 3 месяцев. РАР позволяет проследить за динамикой инфекционного процесса. Для дифференциации риккетсиозов не применяется
Эпидемический сыпной тиф n n n РНГА Сыворотку больного разводят от 1: 10 до 1: 1280 Диагностический титр реакции 1: 160 РНГА позволяет выявить не только суммарный титр антител, но и их принадлежность к классам Ig. При сыпном тифе с 5 -7 -ого дня заболевания выявляются Ig. M в диагностическом титре. Максимального титра антитела достигают к 15 -20 дню заболевания (1: 1280 и более). С 3–ей недели заболевания начинают преобладать Ig. G. В период реконвалесценции титр антител снижается и через 6 месяцев не обнаруживается.
Эпидемический сыпной тиф n РНГА используется для дифференциации эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля и для оценки динамики инфекционного процесса. Для дифференциации риккетсиозов не применяется
Эпидемический сыпной тиф n n n РСК Сыворотка больного разводится от 1: 20 до 1: 2560 Диагностический титр реакции 1: 80 Комплементсвязывающие антитела появляются на 6 -8 -ой день заболевания. Максимальных титров достигают к 15 дню заболевания, сохраняясь в диагностических титрах на протяжении 2 лет. Низкий титр РСК, не достигающий диагностического, и не имеющий тенденции к нарастанию рассматривается как анамнестический.
Эпидемический сыпной тиф n n РСК используется для дифференциации эпидемического и эндемического сыпных тифов. Болезни Брилля и ретроспективной диагностики. Для дифференциации эпидемического и эндемического сыпных тифов РСК ставят в двух рядах пробирок, параллельно с антигенами R. prowazekii и R. t yphi.
Эпидемический сыпной тиф n У больных болезнью Брилля с первых дней болезни и в более высоких титрах выявляются антитела, принадлежащие к классу Ig. G. Дифференцирование Ig. G и Ig. M антител основано на их различной чувствительности к действию редуцирующих веществ, содержащих свободные сульфгидрильные группы (2 меркаптоэтанол). Эти вещества вызывают разрыв дисульфидных связей в молекуле Ig. M и их распад на субъединицы, лишенные активности антител, Ig. G при этом не изменяются. РСК и РНГА в данном случае ставят в двух параллельных рядах: в одном ряду с нативной сывороткой, В другом ряду с сывороткой, обработанной 2 -меркаптоэтанолом
Эпидемический сыпной тиф n n В случае первичного (эпидемического сыпного тифа, для которого характерно преобладание Ig. M-антител, наблюдается снижение титра антител в обработанной сыворотке не менее чем в 4 раза по сравнению с необработанной исходной сывороткой. В случае болезни Брилля или при повторном сыпном тифе, где преобладают Ig. G, титр антител в обеих сыворотках должен быть одинаковым (допускается снижение титра не более, чем в два раза).
Эпидемический сыпной тиф n n ВОЗ рекомендует использовать непрямую реакцию иммунофлюоресценции , которая позволяет дифференцировать антитела, появляющиеся при возникновении заболевания (Ig. M ) от циркулирующих после перенесенного сыпного тифа (Ig. G) Кожно-аллергическая проба с антигеном риккетсий Провачека – чувствительный тест для выявления сенсибилизации организма человека после перенесенного заболевания. Может использоваться для определения структуры населения в отношении переболевших сыпным тифом
Скачать презентацию Кровяные инфекции Лекция профессора М Н Бойченко
Кровяные инфекции.ppt