Конфокальная микроскопия роговицы КМР новая ветвь

Конфокальная микроскопия роговицы – КМР – новая ветвь прогресса метода микроскопии.

Ранее проблема микроскопов заключалась в лишнем потоке внефокусных лучей, снижающих контрастность изображения и, тем самым, разрешающую способность аппаратуры. Особая диафрагма конфокального микроскопа пропускает лучи, исходящие только от фокальной плоскости рассматриваемого объекта, а лучи, отраженные от соседних точек и плоскостей, отсекаются. Так можно получить тонкие световые срезы на любой заданной глубине препарата.

Оптический принцип: Основным принципом КМ является то, что одна точка ткани может быть освещена с помощью точечного источника света и одновременно отображена с помощью камеры в той же плоскости, то есть, «конфокальной» ; Это создает изображение с очень высоким разрешением; Однако в поле зрения оказывается лишь мельчайшая часть ткани из-за одной точки освещения и обнаружения; Чтобы решить эту проблему, прибор мгновенно освещает и синхронизирует многие изображения, то есть, сканирует небольшой участок ткани с тысячами крошечных пятен света, объединяя результат в одно изображение с высоким разрешением и увеличением.

Плюсы: • • высокая контрастность изображения, увеличенная разрешающая способность, получение «оптических срезов» , трехмерная реконструкция, возможность цифровой обработки изображений. Минусы: • некоторая сложность настройки прибора, • существование изображения только в цифровой форме (отображается на экране монитора), • высокая стоимость оборудования и его эксплуатации

Методика проведения. КМР проводится с использованием геля, который находится между роговицей и объективом линзы, в результате чего исключается непосредственный контакт линзы и роговицы и сводится к минимуму риск повреждения эпителия. Линза с каплей геля подводится к роговице до касания, далее, степень контакта датчика и роговицы пациента варьирует от типа конфокального микроскопа. Предварительно выполняется эпибульбарная кратковременная анестезия.

• В современных приборах в качестве источников света используются лазеры. Такие приборы называют лазерными сканирующими конфокальными микроскопами (ЛСКМ). • самый современный клинический прибор для лазерной КМР – гейдельбергский ретинальный томограф – Heidelberg Retina Tomograph III Rostock Corneal Module (HRT III) (Heidelberg, Germany)

Конфокальная микроскопия роговицы здорового человека (А – эпителий роговицы, Б – суббазальное нервное сплетение, В – строма, Г – эндотелий).

• Тройничный нерв => глазничная ветвь => назоцилиарный нерв => длинные цилиарные нервы => роговичные нервы => перилимбальное нервное сплетение вокруг роговицы. • В строму нервы проникают с периферии, со стороны лимба. В ней они проходят параллельно поверхности роговицы, в радиальном направлении. Повернув на 90°, далее, нервные волокна перфорируют Боуменову мембрану и между ней и базальными клетками, ветвясь, образуют суббазальное нервное сплетение.

• Эти нервные волокна оканчиваются свободными нервными окончаниями в поверхностных эпителиальных слоях, обеспечивая иннервацию базального эпителия • Человеческая роговица содержит крупные прямые миелинизированные Aδ-волокна, которые отвечают в первую очередь на механические раздражители, • и немиелинизированные С-волокна, малого диаметра, нервы по типу цепочки, которые отвечают на тепловое и химическое раздражение.

• Тройничный нерв анатомически сходен со спинномозговыми нервами (их исследуют при ДСП), так как оба имеют и моторные, и сенсорные корни, и имеется морфологическое сходство между нервными окончаниями в роговице и окончаниями спинно-мозговых нервов в эпидермисе. • Таким образом, по информативности методы биопсии кожи с исследованием внутрикожным нервов и КМР равнозначны, однако преимущество неивазивности метода КМР является очевидным, особенно касательно больных СД.