Київський національний університет ім Т Г Шевченка Сучасні

Київський національний університет ім. Т. Г. Шевченка Сучасні методи дослідження алкалоїдів фталілізохінолінового циклу: Наркотин та Нарцеїн Підготувала Студентка I курсу ОКР магістр Дячук Анна

Опій - складна суміш органічних та мінеральних речовин, до його складу входять алкалоїди, білки, вуглеводи, каучукоподібні сполуки, органічні кислоти, пептиди, глюкопротеїди та інші. Основні алкалоїди опію(%): ØМорфін - 42 ØКодеїн - 12 ØНоскапін (наркотин) - 21 ØТебаїн - 6, 5 ØПапаверин - 18 «Мінорні» алкалоїди: Øнарцеїн (0, 2%); ØНеопін; ØПротопін; ØПорфіроксин; ØКриптонін; ØПсевдоморфін; ØЛаундазин.

q. Перша згадка про опіум датується 500 р. до н. е. (Месопотамія). Археологічні знахідки говорять про те, що ще у епоху кам’яного віку використовуватись макові «коржики» для полегшення болю. q. Опіум використовувався у Древній Греції, знеболюючі властивості якого згадував ще сам Гіпократ. q. У 1773 р. почалося ввезення опіуму у Європу. Саме Ост-Індська торгова компанія оплатила роботу дослідників-селекціонерів, і в другій половині XVIII століття в Бенгалії вивели спеціальний сорт опійного маку (Papaver somniferum). q"Опіумні війни" 1839 -1842 і 1850 -1859 років. q. З 1952 р. було заборонено вільний продаж шлункових настоянок опію.

Опіум, опій - сильнодіючий наркотик, одержуваний з висушеного на сонці молочного соку, що добувається з недостиглих коробочок опійного маку (лат. Papaver somniferum). «Золотий трикутник» опію: • Північний Таїланд. • Лаос. • Бірма. • (Афганістан). Ціна: 64 $ за кг в 2009 році до 169 $ у 2010 році.

Види опію Пантопон (омнопон) Опій - сирець Екстракційний опій Медичний опій Снодійні (психоактивні) сорти маку: q. При повній відсутності наркотину зразок відносять до маку масляного. q. При наявності значної кількості наркотину (більше 15 -20% від морфіну) зразок відносять до маку опійного. q. При наявності ретикуліну зразок відносять до українського сорту масляного маку.

Крім основних алкалоїдів, у складі опію характерним компонентом виступає меконова кислота, котра у хімікотоксикологічному аналізі слугує основним критерієм виявлення причини отруєння: опієм, омнопоном, чи індивідуальним алкалоїдом. При судово-медичному аналізі, у випадку виявлення морфіну, меконової кислоти, наркотину роблять висновок про отруєння опієм. При виявленні морфіну, наркотину та інших алкалоїдів (без меконової кислоти!!!)роблять висновок про отруєння омнопоном.

Об’єкти дослідження при отруєнні опієм та омнопоном • Шлунок (включаючи промивні води). • Нирки. • Сеча. • Печінка та селезінка. • Легені (у випадку вдихання парівкуріння).

Фармакокінетичні характеристики наркотину та нарцеїну НАРКОТИН: (носкапін, нектодон, носпен, анаркотин, опіан) C 22 H 23 NO 7 §Температура кипіння: 176° С. §Нерозчинний у воді, легко розчиняється у спирті, бензолі, ефірі та хлороформі. §Є слабкою третинною основою. §Біодоступність ~30% §Період напівеведення 1. 5 -4 год (у середньому 2. 5 год)

Нарцеїн: C 23 H 27 NO 8 Вміст в опіуму складає 0, 2 % Відноситься до “мінорних” алкалоїдів, його присутність вказує на отруєння опієм чи омнопоном. Розчинний у гарячій воді та спирті, погано розчинний у холодній воді та хлороформі. Є слабкою основою. Tk=210° С

Метаболізм наркотину

Пробопідготовка У силу того, що наркотин та морфін дають схожі продукти реакції, перед ідентифікацією наркотина його відділяють від морфіну. 1. Для розділення наркотину та морфіну беруть витяжку та випарюють досуха. 2. Сухий залишок розчиняють в 1 -2 мл H 2 SO 4 розв, додають 2 -3 мл 10% р-ну Na. OH та взбовтують з двома порціями хлороформу (по 5 мл). 3. Хлофорні витяжки випарюють досуха. У сухому залишку виявляють присутність наркотину.

У сучасному хіміко-токсикологічному аналізі екстракція являється одним із основних методів виділення алкалоїдів із витяжок, біологічних рідин (сеча та кров), промивних вод шлунку. Залежність ступеня екстракції алкалоїдів від р. Н середовища та природи органічного розчинника Алкалоїд Кокаїн Наркотин Органічний розчинник р. Н початку екстракції р. Н обл. максимуму екстракції Максимальна к-сть екстрагуючог о алкалоїда Хлороформ Диетиловий ефір Бензол Хлороформ Дихлоретан Диетиловий ефір 3, 0 4, 0 7, 0 -8, 5 80 -83 57 -62 4, 0 1, 0 2, 4 7, 0 -8, 5 4, 0 -7, 0 5, 0 -7, 0 68 -70 91 -93 76 -78 83 -85

Зразок сечі (10 мл) Гідроліз Екстракція Попереднє дослідження Інтерпритація отриманих результатів Підтверджувальне дослідження

Хроматографія у тонкому шарі сорбенту Безпосереднє проведення аналізу Для проявлення плям на пластинці використовують (послідовно): q. Освітлення УФ-світлом при довжині хвилі 254 нм реєструють плями за відсутності флуорисценсії. q. Обробка підкисленим розчином йодплатината Калія плями Наркотину темніє, а плями морфіну переходять у синьофіолетовий колір.

Результати реакцій опіатів із спеціальними реактивами Визначувана речовина Забарвлення, що виникає при додаванні реактива Героїн Манделіна Фіолетове Марки Червоне→ фіолетове Морфін Фіолетове Кодеїн Зелене→Синє Етилморфін Зелене Наркотин Червоне→ Буре→ фіолетове Синьофіолетове Червонофіолетове Синьофіолетове→ зелене Синє→Синьофіолетове Фіолетове→ Зелено-жовте Папаверин рожеве→фіолет ове Фреде Ердмана фіолетове→тем нозелене→рожеве фіолетове червоне→жовте зелене→синє - синє→вишнево- червоне→фіоле червоне тове зелене червоне

ІЧ-спектроскопія Характеристичні хвильові числа в ІК-спектрах опіатів Речовина Морфін Папаверин Смуги поглинання, см-1 805, 1243, 1448, 945, 1086, 833 1052, 1268, 1500, 1111, 793, 934 1245, 1764, 1178, 1215, 911, 1736 1507, 1068, 1273 Наркотин 1745, 1276, 1038 Кодеїн Героїн

Визначення носкапіну ВЕРХ Умови ВЕРХ: q УФ-детектор (Модель 440 )з фіксованою довжиною хвилі 254 нм. q Колонка: 30 см х 3, 9 мм q РФ: 45% ацетонітрилу та 55% калію q дигідрофосфат (до р. Н 3 H 3 PO 4). Об’єкт дослідження – сироватка крові Таблиця 2 Рис. 1. Хроматограма (А) розчинника та носкапіну (В) 50 нг/л t. R = 5, 9 хв

Рис. 2. Хроматограма (А) зразку; (В) контрольної серії з носкапіном (25 нг/мл); (С) контрольної серії з носкапіном (100 нг/мл); Рис. 3. Хроматограми з безпосереднім введенням носкапіну 100 мг: (А) до введення дози; (В) 45 хв після прийняття дози; (С) 2 год після введення дози.

Відносні часи утримування Рис. 4. Концентраційний профіль носкапіну (100 мг) у сироватці крові

Аналіз опіатів і метаболітів у сечі щурів після інгаляції опію за допомогою Рідинної хроматографії з мас-спектрометричним детектором Умови хроматографування: q. N 2 газ-носій q швидкість потоку 13 млхв q. Температура випарика 450 С m/z Визначуван а сполука 286 300 312 195 340 414 Морфін Кодеїн Тебаїн Меконін Папаверин Носкапін

Рис. 5. Хроматограми стандартних р-нів опіатів Схема для випаровування Опію та інгаляцій

Порівняння співвідношення кількості препарату в опіуму, парі та сечі

Хроматографічний аналіз нарктину

Спесктрофотометричне визначення Носкапіну Екстр агент МО БКЗ ТМ Хлороф орм б. б Інтенсив но жовий Слабко жовтий Толуол б. б Слабко жовтий б. б МЕК Слабко жовтий Дихлор метан б. б інтенсив но но жовий інтенсив но жовий Табл. 4. Забарвлення екстракту в різних розчинниках

Табл. 5. Аналітичні характеристики для утворених комплексів Найкращі умови для проведення екстракції наступні: • МО, екстракційний розчинник - дихлорметан та р. Н 3. • ТС толуол як екстракційний розчинник та р. Н 4. • БКЗ розчинник - хлорофом та дихлорметан, р. Н 3.

World Drug Report 2012

Вартість

Дякую за увагу!!