КГКУЗ КРАСНОЯРСКИЙ КРАЕВОЙ ЦЕНТР КРОВИ 1 Тема

КГКУЗ «КРАСНОЯРСКИЙ КРАЕВОЙ ЦЕНТР КРОВИ № 1» Тема доклада: КРИОКОНСЕРВИРОВАНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ. ПРОШЛОЕ И НАСТОЯЩЕЕ Докладчик: Похабова Ирина Викторовна врач-трансфузиолог, заведующая отделением 1

Трансфузии компонентов крови – неотъемлемая составляющая оказания специализированной и высокотехнологичной медицинской помощи в клиниках 2

Первостепенная задача учреждений службы крови – бесперебойное обеспечение медицинских организаций гемотрансфузионными средами создание их полноценных запасов 3

Целесообразность наличия запасов компонентов крови диктуется: ростом потребностей клиник в компонентах крови периодически возникающим дефицитом эритроцитсодержащих сред тех или иных групп крови вероятностью возникновения чрезвычайных ситуаций 4

Формирование запасов эритроцитных сред возможно при долгосрочном хранении их в жизнеспособном состоянии. Перспективным в данном направлении является метод криоконсервирования при низких температурах 5

Из истории 1972 год – на КСПК внедрен метод криоконсервирования эритроцитов при ультранизких температурах (- 196°С) в условиях жидкого азота 6

Недостатки метода - открытая система - алюминиевые контейнеры многоразового использования - малый объем контейнера – 140 мл - сложности с обеспечением криоконсервирующими и отмывающими растворами - трудоемкий процесс размораживания и отмывания эритроцитов, приготовления растворов, обработки контейнеров 7

2008 год – внедрен метод криоконсервирования эритроцитов при умеренно низких температурах (- 40°С) в условиях электрохолодильников с использованием полимерных контейнеров 8

Преимущества метода - полимерные контейнеры одноразового использования - объем контейнера – 500 мл Недостатки метода - открытая система - срок хранения эритроцитов - 1 год - сложности с обеспечением криоконсервирующими и отмывающими растворами - трудоемкий процесс размораживания и отмывания эритроцитов, приготовления растворов 9

В соответствии с ФЗ «О техническом регулировании» , постановлением Правительства РФ от 26. 01. 2010 г. № 29 утвержден Технический регламент «О требованиях безопасности крови, ее продуктов, кровезамещающих растворов и технических средств, используемых в трансфузионно-инфузионной терапии »

Целевая программа «Развитие службы крови Красноярского края на 2013 -2015 г. г. » в 2014 г. внедрен метод криоконсервирования эритроцитов при низких (-80°С) температурах с применением автоматической системы обработки клеток АСР-215 (Haemonetics, США) 11

ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОЦЕДУР Глицеролизация: подготовка эритроцитов к замораживанию с применением глицерола Деглицеролизация: подготовка размороженных эритроцитов к переливанию (удаление глицерола, внеклеточных элементов, добавление раствора SAGM) Отмывание эритроцитов: удаление белков плазмы для минимизации трансфузионных реакций 12

ПОДГОТОВКА К ЗАМОРАЖИВАНИЮ (ГЛИЦЕРОЛИЗАЦИЯ) Глицерол - криопротектор Защищает клетки крови от разрушения во время замораживания и хранения при низких и сверхнизких температурах, сохраняет их в жизнеспособном состоянии Магистраль для глицеролизации (LN 225) 13

ЗАМОРАЖИВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ В МЕДИЦИНСКИХ ЭЛЕКТРОХОЛОДИЛЬНИКАХ ПРИ ТЕМПЕРАТУРЕ - 80°С 14

ПОДГОТОВКА К ПЕРЕЛИВАНИЮ (ДЕГЛИЦЕРОЛИЗАЦИЯ) Отмывание клеток крови после размораживания от глицерола Ресуспендирование отмытых эритроцитов во взвешивающим растворе SAG-M. Магистраль для деглицеролизации – (LN 235) 15

Преимущества метода: 1. Закрытая система (уменьшение риска бактериальной контаминации): - бактериостатический фильтр (0, 2 микрона) - отдельные магистрали для введения растворов - стерильное соединение магистралей 2. Одноразовые стерильные расходные материалы 3. Объем контейнера - 500 мл 4. Автоматизация процессов (уменьшено число ручных процессов и общее время процедуры, снижен риск человеческой ошибки, предусмотрен контроль процедуры, отчетность по статистике процедуры) 5. Долгосрочное (до 10 лет) хранение клеток крови 6. Быстрый доступ к замороженным эритроцитам 7. Взвешивающий раствор SAG-M (увеличено время хранения после размораживания и отмывания до 3 суток) 8. Стандартизированный качественный продукт 16

ДАННЫЙ МЕТОД ПОЗВОЛЯЕТ сохранять эритроциты в жизнеспособном и функционально полноценном состоянии подготавливать эритроциты к переливанию в течение 2, 5 -3 -х часов, что в 10 -12 раз быстрее, чем заготовка и обследование донорской крови.

ДОЛГОСРОЧНОЕ ХРАНЕНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ 1. Стратегический запас на случай чрезвычайной ситуации 2. Создание неснижаемого запаса эритроцитов для устойчивого и прогнозируемого обеспечения клиник 3. Обеспечение доступности групп крови с редкими фенотипами: cc. DEE, CCDEe, Cc. DEE, cc. Dee. 4. Проведение карантинизации (инфекционная безопасность) 5. Управление запасами крови 18

ИТОГИ РАБОТЫ ЗА ПЕРИОД 2014 - 6 МЕС. 2016 Г. Г. заморожено 1857 доз эритроцитов, 669 доз – разморожено, 479 доз – выдано в учреждения здравоохранения На 01. 07. 2016 г. в Банке крови находится 1151 доза эритроцитов 19

КАРАНТИНИЗАЦИЯ Документа, регламентирующего проведение карантинизации эритроцитов в настоящее время нет. На практике применяется приказ МЗ РФ от 07. 05. 2003 г. № 193 «О внедрении в практику работы службы крови в РФ метода карантинизации свежезамороженной плазмы» с изменениями от 2005 г. и 2010 г. 20

Хранение более 6 месяцев прошли 1389 доз (75% от общего количества замороженных доз), из них 50, 3% (698 доз) составили карантинизированные эритроциты после повторного обследования доноров на инфекции. 21

СПИСАНИЕ ЭРИТРОЦИТОВ В ПРОЦЕССЕ КАРАНТИНИЗАЦИИ ПО МАРКЕРАМ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ HCV антитела ИТОГО ДОЗ HВs Ag 4 3 ДНК-НВV Антитела к к ВИЧ 1, 2 возбудителю сифилиса 1 1 4 Списано 13 доз эритроцитов по маркерам гемотрансмиссивных инфекций: 1 – ДНК НBV; 3 – HВs. Ag; 4 – HCV-антитела; 1 – антитела к ВИЧ 1, 2; 4 – суммарные антитела к возбудителю сифилиса.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Криоконсервированные эритроциты после размораживания и отмывания подвергаются контролю качества согласно «Техническому регламенту о требованиях безопасности крови, ее продуктов… За период 2014 - 6 мес. 2016 г. г. было исследовано 185 доз эритроцитов. На этапе внедрения методики 9% из них не соответствовало требованиям по показателю: степень гемолиза на 3 сутки хранения. 23

РЕЗУЛЬТАТЫ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА Кол-во Соответс Не Объем, Гематокр Гемоглоб Степень Кол-во Осмолярнос доз твует соответс мл ит, % ин, г/дозе гемолиза, лейкоцит ть, мл. Осм/д качеству твует г/дозе ов качеству Нормы Не менее 185 65 -75 Не менее 36 Менее 0, 2 Не более 0, 1 x 10^9 Не менее 340 2014 г. 115 98 17 290315 50 -55 41 -53 0, 02 -0, 09 0, 2(до 0, 3)* 0, 8 x 10^6 2015 г. 58 58 - 290320 53 -56 45 -53 0, 02 -0, 09 0, 30, 9 x 10^6 349 -372 6 мес. 2016 г. 12 12 - 305310 55 -57 50 0, 06 -0, 12 - 350 -372 * - БРАК ПО СТЕПЕНИ ГЕМОЛИЗА НА 3 СУТКИ ХРАНЕНИЯ (БОЛЕЕ 0, 2 Г/ДОЗЕ) -

ПРОЕКТ ПОСТАНОВЛЕНИЯ ПРАВИТЕЛЬСТВА РФ «ОБ УТВЕРЖДЕНИИ ПРАВИЛ ЗАГОТОВКИ, ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВКИ И КЛИНИЧЕСКОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ДОНОРСКОЙ КРОВИ И ЕЕ КОМПОНЕНТОВ» 25

АКТУАЛЬНЫЕ ЗАДАЧИ 1. 2. 3. Карантинизация эритроцитов Отмывание эритроцитов в условиях закрытой стерильной системы с применением автоматического процессора АСP-215 Обеспечение реципиентов безопасными эритроцитсодержащими средами 26

КГКУЗ «КРАСНОЯРСКИЙ КРАЕВОЙ ЦЕНТР КРОВИ № 1» СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ! 27