Картирование локуса устойчивости к кладоспориозу Сf-6 на генетической

Картирование локуса устойчивости к кладоспориозу Сf-6 на генетической карте томата с помощью SSR-маркеров З. Е. Грушецкая Институт генетики и цитологии Национальной академии наук Беларуси А Б Устойчивость к кладоспориозу (рис. 1) является обязательным требованием при создании современных промышленных сортов томата. В качестве возможного источника устойчивости наше внимание привлек локус Cf-6, который обеспечивает устойчивость к известным расам возбудителя кладоспориоза, однако до сих пор не картирован. Поэтому целью наших исследований являлась локализация гена Cf-6 на генетической карте томата. Материалом для исследований служили 68 образцов F 2 популяции, полученной от скрещивания линий томата CGN 15339, содержащей ген Cf-2, и CGN 15839, с локусом Cf-6. Образцы F 2 популяции, а также родительские формы, использованные для скрещивания, были оценены на устойчивость к кладоспориозу предварительно дифференцированной расой 2. 3. 4 (рис. 2). Кладоспориоз томата: верхняя (а) и нижняя (б) стороны листа Рис. 1 Из каждого образца популяции была выделена ДНК, и далее проводился поиск маркеров, обнаруживающих полиморфизм между контрастными по устойчивости формами в популяции. Рис. 2 Рис. 3 R R R Поскольку все картированные на данный момент Cf-гены располагаются на первой (Cf-4/Cf-9) и шестой (Cf-2/Cf-5) хромосомах томата (рис. 3), было сделано предположение, что исследуемый нами локус Cf-6 принадлежит к одному из этих кластеров. Поэтому для поиска сцепления использовались маркеры, локализованные на коротком плече 1 -й и 6 -й хромосом томата. Генетическая карта 1 -й и 6 -й хромосом томата R S S SSR 128 Рис. 5 Фрагменты, полученные в результате амплификации с праймером SSR 48. Стрелкой отмечен маркер, сцепленный с признаком устойчивости. Образцы R – устойчивые, S – восприимчивые. В результате анализа полученных амплификационных фрагментов было найдено 3 SSR-маркера, полиморфных между устойчивыми и восприимчивыми формами в популяции. Два из этих маркеров, а именно SSR 48 (рис. 4) и SSR 128 (рис. 5), локализованные на 6 хромосоме томата, демонстрировали сцепление с признаком устойчивости на дистанции 12, 6 и 16, 8 с. М соответственно. S S Расщепление F 2 популяции томата по признаку устойчивости к кладоспориозу S S Рис. 4 S S R R Cf-6 12, 6 c. M SSR 48 SSR 128 Локус Cf-6 картирован на 6 -й хромосоме томата. Маркер 2 -2 С 550 сцеплен с геном Cf-6 Рис. 6 R Фрагменты, полученные в результате амплификации с праймером SSR 48. Стрелкой отмечен маркер, сцепленный с признаком устойчивости. Образцы R – устойчивые, S – восприимчивые. 2 -2 С 550 Таким образом, мы можем утверждать, что исследуемый нами локус Cf-6 локализован на коротком плече хромосомы 6 томата в ранее картированном кластере Cf-2/Cf-5 (Рис. 6) S