Кафедра нормальной физиологии и восстановительной медицины Ферментативнокоагуляционный гемостаз

Кафедра нормальной физиологии и восстановительной медицины Ферментативнокоагуляционный гемостаз Выполнили: студенты 2 курса, лечебного факультета СГМУ Коровин Андрей и Попова Ирина

Свертывание крови • Это цепной ферментативный процесс, в котором последовательно происходит активация факторов свертывания и образования их комплексов.

Коагуляционный гемостаз • Сущность: переход растворимого белка крови фибриногена в нерастворимый фибрин, в результате образуется фибриновый тромб.

Схема свертывания крови [А. Н. Мамаев 2003]

Первая фаза • Образование активного ферментативного комплекса – протромбиназы, являющейся активатором протромбина. • Образуются тканевая протромбиназа(внешний путь) и кровяная протромбиназа(внутренний путь).

Образование тканевой протромбиназы • Начинается с активации тканевого тромбопластина, образующегося при повреждении стенок сосуда и окружающих тканей. • Вместе с VII и ионами кальция он активирует Х фактор. • Ха взаимодействует с V фактором и с фосфолипидами тканей или плазмы образуется тканевая протромбиназа.

Образование кровяной протромбиназы • Начинается с активации XII фактора при его контакте с волокнами коллагена поврежденных сосудов. • XII фактор активирует XI фактор, образуя с ним комплекс. • XIа совместно с ионами кальция активирует IX фактор, который активирует VIII фактор • Активация Х фактора, который образует комплекс с V фактором и ионами кальция кровяная протромбиназа • В этом участвует тромбоцитарный фактор 3.

Вторая фаза - образование тромбина Протромбин Тромбин IVa, Xa и ПФ-3

Третья фаза – образование фибрина Фибриноген Фибрин-полимер (нерастворимый) IIa XIIIa Фибринмономер IV Фибрин-полимер (растворимый)

Четвертая фаза – ретракция сгустка • Уплотнение и закрепление тромба в поврежденном сосуде. • Это происходит с помощью сократительного белка тромбоцитов – тромбостенина и ионов кальция.

Скрининговые тесты для оценки плазменного звена гемостаза • АПТВ (активированное парциальное тромбопластиновое время • протромбиновое время (по Квику) • тромбиновое время

Активированное парциальное(частичное) тромбопластиновое время • АПТВ используется как скрининговый тест для оценки внутреннего каскада свертывания плазмы, скрининговой диагностики волчаночного антикоагулянта и слежения за антикоагулянтным действием гепаринов. АПТВ – более значимый тест для первичного выявления патологии, чем протромбиновое время, так как выявляет относительно часто встречающуюся гемофилию А и В (дефицит факторов VIII и IX соответственно) и наличие волчаночного антикоагулянта.

Методика • Образец крови отбирается в пробирку с оксалатом или цитратом, чтобы не допустить свертывания крови путем связывания кальция. Далее из образца крови путем центрифугирования получают бедную тромбоцитами плазму крови. Для активации внутреннего пути свертывания в образец плазмы вносится активатор (напр. : диоксид кремния, целит, каолин, эллаговая кислота), и кальций (для того, чтобы избавиться от ранее созданного цитратом антикоагулянтного эффекта). Измеряется время до образования сгустка. • Слово «частичное» в названии теста АЧТВ указывает на отсутствие в используемых реагентах тканевого фактора.

Референсные значения АПТВ: 28, 6 -33, 6 с

Протромбиновое время • широко используемый скрининговый тест для оценки внешнего каскада свертывания плазмы. ПВ обычно используется для определения активности ф. VII, контроля за лечением непрямыми антикоагулянтами, при скрининге системы гемостаза, а также для количественного определения фибриногена в автоматических коагулометрах.

Референсные значения ПВ: 9, 2 -12, 2 с

Формы выражения протромбинового времени • Протромбиновое время (ПВ), сек (Время свёртывания плазмы после добавления тромбопластин-кальциевой смеси). • Протромбиновый индекс (ПТИ), %(ПВ нормальной контрольной плазмы (или среднее ПВ нормального диапазона)/ПВ плазмы пациента)х100) • Протромбиновое отношение (ПО), %(ПВ плазмы пациента/ПВ нормальной контрольной плазмы (или среднее ПВ нормального диапазона)х100)

Формы выражения протромбинового времени • Протромбин по Квику (%) (Аналогично ПТИ, но расчёт производится в зависимости от концентрации факторов протромбинового комплекса) • Протромбиновое время, выраженное через МНО международное нормализованное отношение, латинская аббревиатура INR (International Normalized Ratio) ((ПВ плазмы пациента/ПВ нормальной контрольной плазмы (или среднее ПВ нормального диапазона)^isi), где ISI (International Sensitivity Index of thromboplastin), он же МИЧ (международный индекс чувствительности) показатель чувствительности тромбопластина, стандартизующий его относительно международного стандарта.

Тромбиновое время • определение тромбинового времени является третьим по значимости базисным скрининговым тестом. Тест характеризует конечный этап процесса свертывания – превращение фибриногена в фибрин под действием тромбина, на него влияет концентрация фибриногена в плазме и наличие продуктов деградации фибрина.

Референсные значения ТВ: 18 -24 с

Определение концентрации фибриногена в плазме Референсные значения фибриногена: 2, 75 - 3, 65 г/л

СНИЖЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА: • острый ДВС-синдром; • дисфибриногенемии. ПОВЫШЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА: • инфекционные, воспалительные и аутоиммунные процессы; • подострый и хронический ДВС-синдром; • нормально протекающая беременность.

РФМК-тест • РФМК-тест предназначен для количественного определения в плазме крови растворимых фибринмономерных комплексов (РФМК) • РФМК– это частицы тромбов, которые в большом количестве появляются в крови при развитии массивных тромбозов, например, тромбоэмболии легочной артерии, тромбоза других крупных артерий и вен. Кроме того, высокие концентрации РФМК обнаруживаются в плазме больных с ДВС-синдромом (резкое нарушение всех процессов свертывания крови, которое наблюдается при многих критических состояниях: шоках, тяжелых травмах, ожогах, массивных тромбозах и т. д. ).

• Принцип метода состоит в определении времени появления в плазме, содержащей РФМК, зерен (паракоагулята) фибрина после добавления к ней раствора о-фенантролина.

Референсные значения: 0 -4 мг/дел

D-димер • D-димер - это один из продуктов расщепления тромбов. Повышение его содержания в плазме крови служит достоверным признаком массивного тромбообразования и выявляется при тромбоэмболии легочной артерии, тромбозах других сосудов (например, тромбоз коронарных артерий с развитием острого инфаркта миокарда, тромбоз глубоких вен нижних конечностей и т. д. ). В связи с этим данный тест, в первую очередь, находит применение для диагностики острых тромбозов. Кроме того, он может быть полезен для выявления состояний с повышенным риском тромбообразования. Необходимо добавить, что некоторое повышение содержания D-димера в плазме встречается при злокачественных опухолях.

Определение D-димера при помощи анализатора DXPress reader (Life. Sign, США)

Показатели Норма (мкг/мл) мужские показатели 0 -90 лет женские показатели 0 -90 лет <0, 5 беременность 1 -12 недели <0, 5 беременность 13 -24 недели беременность с 24 недели <0, 9 <0, 5 <1, 5

Спасибо за внимание