КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ КАЗНМУ ИМ. С. Д. АСФЕНДИЯРОВА ЭЛЕКТРОННОЕ ПОСОБИЕ ДЛЯ СРСП И СРС НА ТЕМУ: Грамположительные кокки. Микробиологическая диагностика, принципы лечения, профилактика. Грамотрицательные кокки. Микробиологическая диагностика, принципы лечения, профилактика. Подготовила Хандиллаева Б. М.
КОККИ- шаровидной формы бактерии. В зависимости от плоскости деления различают: ДЕЛЯТСЯ НА 4 СЕМЕЙСТВА: MICROCOCCACEAE -STREPTOCOCCACEAE -NEISSERIACEAE -PEPTOCOCCACEAE САМАЯ ГЛАВНАЯ ОСОБЕННОСТЬ микрококки диплококки Стафилококки способность вызывать гнойные процессы в виде Стрептококки самостоятельных инфекционных заболеваний, а также Тетракокки осложнения при соматических, Сарцины хирургических болезнях.
широко распространены в окружающей среде - -заселяют тело человека -большинство сапрофиты , но есть патогенные и УП
В зависимости от особенностей строения их клеточной стенки при окраске по Граму Грам (+) стафилококки, стрептококки, пептострептококки Грам (-) менингококки, гонококки
история Стафилококки впервые выделил Л. Пастер в 1880 г и назвал «пиогенными вибрионами» 1884 г. Розенбах описал морфологию и назвал их стафилококками Стрептококк впервые выделен Л. Пастером в 1879 г 1881 г Огетсон выделил при гнойных инфекциях 1883 г-Фелезейн –чистую культуру
КЛАССИФИКАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВ: КЛАССИФИКАЦИЯ СТРЕПТОКОККОВ: Сем. - MICROCOCCACEAE Сем. STREPTOCOCCACEAE Род – STAPHYLOCOCCUS Род STREPTOCOCCUS Виды: S. AUREUS –(распространен повсеместно и часто входит в состав нормальной микрофлоры человека (носители), колонизирует носовые ходы, брюшную полость и подмышечные области S. EPIDERMIDIS –(колонизирует гладкую кожу и поверхность слизистых оболочек)- слабовирулентный, большинство инфекций - нозокомиальные ( у больных с пониженной резистентностью) S. SAPROPHYTICUS -(колонизирует кожные покровы гениталий и слизистую оболочку уретры)-может вызывать циститы и дизурические расстройства у женщин, ведущих активную половую жизнь; реже пиелонефриты и эндокардиты. 14 из 27 видов обнаружены на коже и слизистых оболочках человека. БИОВАРЫ: А- человек В- куры, свиньи С- коровы, овцы Д- зайцы Е- собаки, лошади, F- голуби, лисы По биохимическим свойствам Виды: Str. pyogenes, Str. pnuemoniae, Str. faecalis, Str. agalactiae, Str. anginosus, Str. bovis, Str. mutans, Str. salivarius, Str. sanguis, Str. milleri По классификации Ленсфильд (по антигенным свойствам ) ДЕЛЯТСЯ НА 20 СЕРОГРУПП ОТ А ДО V А- ( «убиквитарные» -встречающиеся везде, патогенны для человека (70 типов) - Str. pyogenes С- патогенны для человека и животных В- УП Д- непатогенны Серогруппы состоят из сероваров: М-белок, Т-белок, F-белок
МОРФЛОГИЯ стафилококков: -КОККИ (ОДИНОЧНО, ПАРАМИ ИЛИ ГРОЗДЬЯМИ) -НЕПОДВИЖНЫ -ФАКУЛЬТАТИВНЫЕ АНАЭРОБЫ -КАТАЛАЗОПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ, -СОДЕРЖАТ ЦИТОХРОМЫ, НО ОБЫЧНО ОКСИДАЗА – ОТРИЦАТЕЛЬНЫ -СПОР НЕ ОБРАЗУЕТ - S. AUREUS ОБРАЗУЕТ НЕЖНУЮ КАПСУЛУ МОРФОЛОГИЯ стрептококков: -грам(+) кокки (цепочки, попарно) -неподвижны , кроме некоторых энтерококков , имеющих 1 -4 жгутика -спор не имеют -некоторые образуют капсулу (пневмококк)
КУЛЬТИВИРОВАНИЕ стафилококков: Растут на средах с 5 -10% Na. Cl -температура 30 -37 о С -р. Н 7, 2 -7, 4 -на плотных средах: мутные, круглые ровные колонии блестящие или матовые с белым , кремовым, желтым или золотистым пигментом. Цвет - наличие липохромного пигмента; его образование происходит только в присутствии кислорода, особенно на средах, содержащих кровь, углеводы, молоко. -на жидких средах- интенсивное помутнение КУЛЬТИВИРОВАНИЕ стрептококков: -факультативные анаэробы, отдельные - облигатные анаэробы -требовательны к питательным средам (КА, сахарные среды) -на поверхности твердых сред – мелкие колонии; на жидких - придонный рост
ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ СВОЙСТВА СТАФИЛОКОККОВ: Вызывают характерное разжижение желатина в виде воронки (4 -5 сут) восстанавливают нитраты, образуют H 2 S разлагают глюкозу, ксилозу, сахарозу, мальтозу, глицерин, маннит с выделением кислоты Уреазаположительны индол не образуют ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ СТРЕПТОКОККОВ: Ферментация углеводов нестабильна и не используется для дифференцировки и идентификации не образуют каталазы в отличии от стафилококка для дифференциации используют другие тесты
ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВ: ± + Коагулаза + - - Гемолизин + - - ДНК-аза + + - Фосфатаз + - + Маннит: + - + Анаэробно + - - Золотистый белый Белый желтый S. salivarius Пигмент S, pneumoniae Аэробно Чувствитительн ость к оптохину + Мет. синь+моло ко Лецитиназ а А β - - - - В - - - + + - - - С β - - + - - - Д + + + - - α - - - + + + α + - - - растворен ие - желчь рост - 40% желчь+кровь - p. H 9. 6 Оксидаза 6, 5 Na. Cl + 45°С + β, α Каталаза гемолиз S. saprophyticus 10% зеленящие S. epidermidis S. pylgon S. agalactiae S. equsimilis S. faecalis es S. aureus Рост при По Ленсфильду ВИДЫ СТАФИЛОКОККОВ виды ТЕСТЫ ДИФФЕРЕНЦИЯ СТРЕПТОКОККОВ:
АНТИГЕНЫ СТАФИЛОКОККОВ : (в клеточной стенке) ПЕПТИДОГЛИКАН ТЕЙХОЕВЫЕ КИСЛОТЫ (видоспецифический Аг): рибиттейхоевые - S. aureus ; глицеринтейхоевые - S. epidermidis ; оба типа - S. saprophyticus. -БЕЛОК А -ТИПОСПЕЦИФИЧЕСКИЕ АГГЛЮТИНОГЕНЫ -ХЛОПЬЕОБРАЗУЮЩИЙ ФАКТОР -КАПСУЛЬНЫЙ АНТИГЕНЫ СТРЕПТОКОККОВ: М-протеин Т-протеин С- протеин Р- нуклеопротеид и др. Типовые Аг- М, Т Групповой Аг- С Видовой Аг- Р Из-за перекрестнореагирующих антигенов (ПРА) , (антитела к ним реагируют с мышечными волокнами миокарда, тканью почки и др) могут вызывать иммунопатологические состояния - ревматизм, гломерулонефрит и т. д. ПО ГЕМОЛИТИЧЕСКИМ СВОЙСТВАМ: АЛЬФА-ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ стрептококки неполный гемолиз БЕТА-ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ стрептококки – полный гемолиз НЕГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ
ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВ: -МИКРОКАПСУЛА (подавление взаимодействия с фагоцитами, способствует адгезии и распространению) -КОМПОНЕНТЫ КЛЕТОЧНОЙ СТЕНКИ- пептидогликан, тейхоевые кислоты, белок А (стимулируют развитие воспалительных реакций, усиливают синтез ИЛ-1 макрофагами, активируют систему комплемента, являются мощными хемоаттрактантами для нейтрофилов). Белок А (агглютиноген А) неспецифически связывает Fc - фрагменты молекул Ig. G (что активирует компоненты комплемента во классическому и альтернативному пути) и усиливает активность естественных киллеров. -КАРАТИНОИДНЫЕ ПИГМЕНТЫ- инактивация бактерицидных форм кислорода -УСТОЙЧИВОСТЬ К Na. CL, жирным кислотам - размножение в потовых и сальных железах -ЭКЗОТОКСИНЫ : - 4 гемолизина (альфа-, бета-, гамма-, дельта - токсины): ГЕМОЛИЗИН ( -ТОКСИН) – порообразующий токсин; при введении животным –кожные некротические реакции и гибель при в/в. ГЕМОЛИЗИН (СФИНГОМИЕЛИНАЗА) – оказывает умеренное действие на эритроциты- выраженные свойства холодового гемолиза (выраженный эффект при низких температурах) -ГЕМОЛИЗИН –двухкомпонентный, с умеренной активностью на эритроциты человека. Эффект гемолиза на средах обычно не проявляется , так как один из компонентов инактивирует полимеры , содержащие серу. -ГЕМОЛИЗИН – проявляет детергентные свойства, которые обуславливают цитотоксичность широкого свойства
ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВ: 2. - лейкоцидин (ингибирует всасывание воды и активирует образование ц. АМФ - диарея и цитотокическое действие на полиморфноядерные лейкоциты) 3. - -ЭКСФОЛИАТИНЫ А и В – (отслоение эпидермиса) пузырчатка или « синдром ошпаренной кожи» у новорожденных (болезнь Риттера фон Риттерштайна) – заболевание начинается бурно; характерно формирование больших очагов эритемы на коже с образованием (ч/з 2 -3 сут) больших пузырей (как при термических ожогах) и обнажением мокнущих эрозированных участков. -ЭНТЕРОТОКСИНЫ: A, B, C, D, E, F- пищевые токсикоинфекции ( рвота , абдоминальные боли, водянистая диарея уже после 2 -6 часов после употребления инфицированной пищи - кремы, консервы, мясные и овощные салаты, молочные продукты). Через 24 часа могут исчезнуть и без лечения. (TSST) токсин синдрома токсического шока, связанный с менструациями (впервые с тампоном «Тампакс» , возможно развитие после родов, после хирургических операций (особенно на носовой полости и пазух носа). Клиника: - высок. температура, рвота, диарея, скарлатиноподобная сыпь на ладонях и подошвах, снижение АД, возможен летальный исход. С появлением тампоном с пониженными сорбирующими свойствами и без полиакриловых наполнителей частота случаев развития шока резко сократилась. В, С- синдром токсического шока, не связанный с менструациями
ФАКТОРЫ ПАТОГЕННОСТИ СТРЕПТОКОККОВ: АДГЕЗИЯ (пили, фибриллярный слой) - за счет М- и F- белков, капсульных полисахаридов -ТОКСИНЫ: эритрогенный (скарлатинозный) стрептолизины О и S О-стрептолизин (кардиотоксин) нарушает мембраны клеток S-стрептолизин ( гемолизин) продуцируется в среде, содержащей сыворотку, вызывает лизис Er, разрушает лизосомы, мембраны митохондрий клеток человека, при этом ферменты лизосом вызывают деструкцию тканей. лейкоцидин цитотоксин (нефротоксин)-прямое действие на почечные клубочки КАРДИОГЕПАТИЧЕСКИЙ ТОКСИН-поражение миокарда и образование гранулем в печени ЭРИТРОГЕННЫЕ ТОКСИНЫ (ЭРИТРОГЕНИНЫ)-продуцируются лизогенными штаммами трех групп (А, В, С)- нарушение контактов между отдельными клетками и межклеточным в-вом, действие на гипоталамус (пирогенная активность), ГЗТ и ГЗНТ иммунокомплексного типа. -КАПСУЛА
ФЕРМЕНТЫ ПАТОГЕННОСТИ стафилококков: плазмокоагулаза (коагулаза)(фибриноген в фибрин) -гиалуронидаза (разрушение соединительной ткани) -фибринолизин -дезкосирибонуклеаза (расщепление ДНК, разжижение гноя) ФЕРМЕНТЫ ПАТОГЕННОСТИ: стептококков: Стрептокиназа (фибринолизин)- растворение фибрина гиалуронидаза фибринолизин ДНК-аза -протеиназа РНК-аза -желатиназа АТФ- аза -каталаза (защищает микробы от О 2 -зависимых микробоцидных механизмов фагоцитоза) Нейраминидаза и др. - -лактамаза-(разрушает молекулы -лактамных А/Б) -липаза- гидролиз липидов (облегчают адгезию и проникновение в ткани)
РЕЗИСТЕНТНОСТЬ стафилококков : РЕЗИСТЕНТНОСТЬ стрептококков: -ХОРОШО ПЕРЕНОСЯТ ВЫСУШИВАНИЕ, СОХРАНЯЯ ВИРУЛЕНТНОСТЬ довольно устойчивы во внешней среде (воздухе) -ПОГИБАЮТ ПРИ ПРЯМОМ ВОЗДЕЙСТВИИ СОЛНЕЧНОГО СВЕТА В ТЕЧЕНИИ 10 -12 ЧАС. -ДОВОЛЬНО УСТОЙЧИВЫ К НАГРЕВАНИЮ (при темп 70 -80 о. С погибают ч/з 20 -30 мин, при 150 о С 10 мин; сухой жар- 2 час) -РЕЗИСТЕНТНЫ К ДЕЙСТВИЮ ЭТАНОЛА -в гною, пыли сохраняются месяцами -под действием дезинфектантов – погибают ч/з 15 -20 мин -от кипячения -моментально
ОСОБЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ: Увеличение числа заболевших Внутрибольничное распространение (роддом, детские стационары, хир. стац. ) Высокий процент носителей , в том числе среди мед. Работников Полиантибиотикорезистентность Циркуляция в стационарах высоковирулентных штаммов Значительная устойчивость стафилококков во внешней среде
ОСНОВНЫЕ ИНФЕКЦИИ ЧЕЛОВЕКА, ВЫЗЫВАЕМЫЕ ПАТОГЕННЫМИ СТАФИЛОКОККАМИ: кожные гнойничковые заболевания -раневые инфекции -эндокардиты -пневмонии -артриты -остеомиелиты -перитониты -глазные инфекции, инфекции мочевыводящих путей, -синдром «ошпаренной кожи» (пузырчатка) -синдром тоскического шока -пищевые токсикоинфекции.
ЗАБОЛЕВАНИЯ СТРЕПТОКОККОВОЙ ЭТИОЛОГИИ А- Str. pyogenes –скарлатина, ангина, рожа, ревматизм, отит, острый гломерулонефрит, фарингит, импетиго, пневмонию) В-Str. agalactiae- находятся на слизистых влагалища, но могут вызывать послеродовые осложнения: сепсис, менингит у новорожденных Д- Str. faecalis –перитонит, сепсис, эндокардит, цистит Str. pneumoniae—пневмония, бронхит, сепсис, менингит Str. viridans (зеленящие) –находятся на слизистой ротовой полости, но могут вызывать ангины, отит, эндокардит, сепсис -особая роль отводится токсинам, ферментам патогенности, которые оказывают специфическое действие -большое значение имеет высокая степень аллергизации токсинами (рецидивам и повторным инфекциям)
Алгоритм диагностики стафилококковой инфекции
Алгоритм диагностики стрептококковой инфекции
ИММУНИТЕТ Стафилококковая инфекция Отличается слабой напряженностью и непродолжительностью (выработка антител, антитоксинов, прицепитинов, опсонинов, аглютининов). Играет роль фагоцитоз, особенно в очаге воспаления. Стрептококковая инфекция малонапряженный. После скарлатины стойкий. Развивается аллергизация организма.
ПРОФИЛАКТИКА стафилококковых инфекций: санация бактерионосителей -профилактика ВБИ -выявление источников инфекции, устранение путей и факторов передачи Стрептокковых инфекций: неспецифическая.
лечение Этиотропное - антибиотикотерапия
Классификация менингококков Классификация гонококков Сем. Neisseriaceae Род Neisseria Вид – N. meningitidis Вид N. gonorrhoeae Менингит – воспаление мягких мозговых оболочек. Гонорея – инфекционное заболевание, передающееся половым путем, характеризующееся воспалением слизистых оболочек мочеполовых путей. Морфология Грамотрицательные, диплококки, бобовидная форма, имеют нежную капсулу, спор и жгутиков нет. Gone – семя, rhoia – истечение (Гален)
Культивирование менингококков Требовательны к питательным средам. (в среды вводят аминокислоты, сыворотку крови или кровь). Колонии – нежные, непрозрачные, бесцветные, вязкие, с блестящей поверхностью. Колонии непатогенных нейссерий мельче, иногда имеют желтоватый пигмент. гонококков Требователен к питательным средам – нуждается в белках. Требует присутствия углекислоты в воздухе. Асцитный агар Мелкие, бесцветные, прозрачные колонии. Непатогенные нейссерии растут на простом агаре
АНТИГЕНЫ МЕНИНГОКОККОВ 1. Капсульный полисахарид. Делит менингококки на 9 сероваров. - А – дает эпидемические вспышки с интервалом в 20 -30 лет - В, С – спорадические случаи. 2. Белковые АГ КС. Обозначаются цифрами. ГОНОКОККОВ Антигенная структура гонококков гетерогенная и изменчивая. Она представлена белковой и полисахаридными комплексами. Описано 16 сероваров, но определение их в лабораториях не проводится.
патогенез Менингококкова инфекция Источник инфекции – больной или носитель. Путь передачи воздушно-капельный (тесный контакт). Различают три клинические формы –назофарингит, менингококкемия. Возбудитель локализуется на слизистых носоглотки. Выделяет ферменты гиалуронидазу и нейраминидазу - назофарингит кровь и лимфа мозговые оболочки -- менингит - бактриемия Гибель микробов – бактериальный или эндотоксический шок (поражение сосудов, нарушение свертывания крови, гипоксия, ацидоз). Гонококковая инфекция Болеют только люди. Источник – больной или носитель. Путь передачи – половой. Гонококк паразитирует на слизистых, покрытых цилиндрическим эпителием. (уретра, цервикальный канал, нижний отдел прямой кишки, конъюнктива). После заражения гонококк прикрепляется к клеткам слизистой, через 3 -4 дня – соединительная ткань – воспаление.
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МЕНИНГОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ ГОНОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ Исследуемый материал спинномозговая жидкость, слизь из носоглотки, кровь. Отделяемое слизистой уретры, прямой кишки, выделения из шейки матки, влагалища. Методы диагностики 1. Бактериоскопический метод – мазок, окраска по Граму и метиленовым синим. - В мазках – грамотрицательные диплококки, бобовидной формы, незавершенный фагоцитоз. (Острая гонорея) - РИФ 2. Бактериологический метод. 3. Серологический метод – реакция Борде-Жангу (РСК) (Хр. гонорея) Т. к. менингококк может быстро погибнуть, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее двух часов с момента взятия. Методы исследования 1. Бактериоскопический Из осадка спинномозговой жидкости делают мазок, красят по Граму – диплококки, грамотрицательные и лейкоциты. 2. Бактериологический –исследуемый материал засевают на плотные среды - КА, сывороточный агар, агар с ристомицином.
Алгоритм диагностики менингококковой инфекции
Алгоритм диагностики гонококковой инфекции
ПРОФИЛАКТИКА Специфическая профилактика Менингококковая химическая вакцина Неспецифическая профилактика – выявление и лечение носителей. Лечение Пенициллин, ампициллин и ЛЕЧЕНИЕ Специфической профилактики нет (гонококковая вакцина для провокации) Лечение - антибиотикотерапия
Скачать презентацию КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ КАЗНМУ ИМ С
ОМ СРСП Гр+, ГР-.ppt