Кафедра микробиологии вирусологии и иммунологии Каз НМУ

* Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии Каз. НМУ Электронное пособие на тему: Возбудители венерических заболеваний. Микоплазмы (СРС, СРСП) Подготовлено: Профессором Акышбаевой К. С.

*Классификация Сем. Mycoplasmataceae Класс Mollicutes ( «мягкокожие, нежнокожие» ) Род. Mycoplasma Вид. M. hominis M. genitalium U. urealyticum

*M. hominis, M. genitalium - уретриты, простатиты, пиелонефриты, эндокардиты, урогенитальный микоплазмоз беременных (привычное невынашивание беременности). *U. urealyticum- уретриты, *простатиты, хронические воспаления мочевыводящих путей.

*Наиболее выраженным потенциалом обладает (типичный паразит). патогенным M. genitalium *M. hominis является менее патогенной, но встречается значительно чаще при инфекционных процессах мочеполовой системы и чаще у женщин, чем у мужчин. *Уреаплазмы являются условно-патогенными микроорганизмами, способны вызвать ряд заболеваний, но в тоже время нередко их выявляют и у здоровых людей.

Микоплазмы- лишены КС и не способны синтезировать ее компоненты. Характеризуются: - полиморфизмом - кокковидные, ветвящиеся, крупные многоядерные формы, псевдомицелий - множественностью способов делениябинарное деление, почкование и сегментация. - минимальной репродуцирующейся единицей (ЭТ- 0. 7 - 0. 2 мкм) *Окраска по Романовскому-Гимзе *Требовательны к условиям культивирования (сыворотка, осмотические стабилизаторы, витамины, НК, углеводы и др. )

Резистентность: *Большинство микоплазм погибает при t-44 -55 ч/з 15 - минут. Чувствительны к дез. веществам, высушиванию Устойчивы ко многим лекарственным веществам

Факторы патогенности: *Адгезины- обуславливают взаимодействие с клетками хозяина (м. встраиваться в клеточные мембраны- мимикрия) *Эндотоксины, экзотоксины Гемолизины *Ферменты и продукты метаболизма (фосфолипаза А, аминопептидазы, нейраминидаза, РНК- аза, ДНК- аза, тимидинкиназы, эндопептидазы).

*МИМИКРИЯ МИКОПЛАЗМ

* Микоплазмы не инвазируются, колонизируют на поверхности клетко с помощью специфических рецепторов * Разрушают клетки хозияна с помощью токсических продуктов метаболзма * Факторы вирулентности микоплазм

Антигенная структура: Основные АГ- представлены липидами (фосфогликолипидами), полисахаридами и белками. *Наиболее иммуногенны- поверхностные АГ *Видовая и штаммовая АГ- специфичность.

*с * Микоплазмы помощью специальной структуры адсорбируются на поверхности клеток хозяина и внедряются в нее. * Могут прикрепляться к сперматозоидам, к эритроцитам, фибробластам, макрофагам, эпителию трахеи. *На мембранах микоплазм могут располагаться вирусы (герпесвирусы, вирусы папилломы человека).

КУЛЬТИВИРОВАНИЕ МИКОПЛАЗМ *Факультативные анаэробы *Метаболизм ограничен в связи с отсутствием у них тех или иных ферментов → рост и размножение зависят от ростовой среды. Среды: - триптический перевар сердца КРС - перевар Хоттингера - пептон Мартена - среда Эдварда и др.

*Характерные колонии - «яичницы-глазуньи» . (уплотненный врастающий центр и нежные края) Ферментативные свойства: *Выявлено отсутствие некоторых необходимых ферментов и аминокислот. Протеолитическими свойствами не обладают

* Инкубационный период составляет от 7 до 21 дня. * Пути передачи: - преимущественно половой и трансплацентарный (внутриутробное инфицирование плода и заражение новорожденных при прохождении через инфицированные микоплазмами родовые пути матери) - возможен непрямой путь заражения женщин, особенно девочек, через предметы домашнего обихода и медицинский инструментарий в случае несоблюдения правил его обеззараживания - микоплазмы могут попасть в верхние отделы генитального тракта (инфицирование цервикального канала, эндометрия, фаллопиевых труб) со сперматозоидами – носителями микоплазм.

*С этими видами микоплазм связаны воспалительные заболевания урогенитального тракта: - уретриты, циститы, гломеруло-, пиелонефриты, простатиты; - у женщин – вагиниты, сальпингиты, кольпиты, цервициты, эндометриты, а также невынашивание беременности. Считается, что микоплазмами инфицировано не менее 50% мужчин и женщин в возрасте от 30 до 50 лет. * M. гетеросексуальных мужчин (11%). genitalium, M. hominis, чем у У гомосексуалистов M. genitalium обнаруживается чаще (30%), U. urealyticum *Существуют бессимптомные формы заболевания в виде носительства.

* Инфекции, ассоциированные с урогенитальными микоплазмами *Значительно распространена смешанная микоплазменная инфекция при трихомонадных, гонококковых и хламидийных поражениях мочеполовых органов. *Эти возбудители могут быть причиной внутриутробных инфекций и врожденных аномалий (как правило, в сочетании с вирусами) в связи со способностью микоплазм (M. genitalium, M. hominis) воздействовать на хромосомы клеток.

- женщины детородного возраста - лица с повышенной сексуальностью - лица с воспалительными заболеваниями гениталий - беременные - женщины с отягощенным акушерским анамнезом и бесплодием. * Группы риска

Лабораторная диагностика *Материал: слизь из влагалища, шейки матки, соскоб из уретры, моча, сперма. *Культуральная диагностика (посев на среды) *Серологический метод: РСК, РИФ, РПГА, ИФА *ПЦР

* Методы лабораторной диагностики * Лабораторная диагностика микоплазмоза включает два основных метода: культуральный метод ПЦР

*Большинство видов микоплазм растут медленно: - M. genitalium – более 3 недель - M. hominis – 48 – 72 ч - U. urealyticum – 24 ч, через 48 ч погибает приблизительно 90% клеток U. urealyticum, особенно в плохо забуференной среде. *Культуральный метод

*Рост на средах с добавлением сывороток , т. к. нуждаются в холестероле *Рост при 35 -370 C аэробно или анаэробно - Колонии в виде яичницы-глазуньи *

*FКолонии микоплазм (фазово-контрастная микроскопия)

* Культуральным методом * Исследуют: - центрифугат средней порции утренней мочи - соскобы со слизистой уретры, сводов влагалища, цервикального канала - материал, полученный при лапароскопии, амниоцентезе При простатите исследуют секрет предстательной железы, при бесплодии мужчин – сперму. * Достоинством культуральных методов является возможность получения ЧК для испытания ее чувствительности к АБ. * Недостатки методов – длительность исследования (в отношении M. genitalium), трудности выделения некоторых патогенных штаммов, наличие "некультивируемых микоплазм", не способных расти в отсутствие живых клеток.

* * КУЛЬТУРАЛЬНЫЙ МЕТОД В практике нашли широкое применение готовые тест-системы для бактериологического исследования на микоплазмы и предназначены для выявления двух наиболее распространенных урогенитальных микоплазм: U. urealiticum и M. Hominis: - набор «Уро-тест» производства «Иммунотэкс» ; - тест-системы «MYCOFAST» и «MYCOSCREEN» компании «Eli. Tech» ; «AF Mycoplasma system» производства компании «Liofilchem» - тест-системы «Mycoplasma DUO» фирмы «BIO–RAD» (США), которые позволяют провести идентификацию микоплазм (Mycoplasma hominis и/или Ureaplasma urealyticum) и установить их титр. Помимо одновременного выявления двух микроорганизмов с определением титра тест-наборы параллельно позволяют определять чувствительность к антибиотикам. Инкубация проводится в термостате при 37 °C. Результаты анализа готовы через 24 и 48 ч. *

*

* В случае отдаленности лаборатории оптимальным является забор биоматериала в специальные транспортные среды ( «Mycoplasma DUO» фирмы «BIO–RAD» , США), что увеличивает сроки хранения (при комнатной температуре) и доставки проб до 72 ч без снижения качества исследования. *ТРАНСПОРТНЫЕ СРЕДЫ

* *ПЦР При ПЦР использование мультипраймеров позволяет одномоментно выявлять ДНК наиболее значимых для диагностики урогенитальных микоплазм, что имеет большое преимущество перед другими методами. *Поскольку U. urealyticum являются УПМ, то в случае получения (+) результата качественной ПЦР целесообразно провести количественную ПЦР в режиме «Real-Time» для выработки тактики ведения пациента (особенно это касается женщин перед ЭКО). Количественную ПЦР следует применять также для оценки эффективности терапии.

*В случае выявления Mycoplasma hominis и/или Ureaplasma urealyticum методом ПЦР, этим больным повторно берут мазки из уретры и цервикального канала, тампоны помещаются во флакон со специальной транспортной средой из набора «Mycoplasma DUO» фирмы «BIO–RAD» (США).

* имеют низкую специфичность и чувствительность (около 50– 70%). * Выявление АТ к микоплазмам имеет ограниченное значение в диагностике микоплазмоза. * ИФА и реакция прямой иммунофлуоресценции (ПИФ)

Ureaplasma spp. и Mycoplasma hominis * Культуральный метод с количественным определением микоплазм или ПЦР в реальном времени (количественное определение микоплазм) * Концентрация микоплазм более 104 микробных тел в 1 * ПРИНЦИП ДИАГНОСТИКИ мл или 1 г отделяемого может иметь диагностическое значение, особенно при наличии конкретного заболевания, такого как вульвовагинит, цервицит у женщин, уретрит у мужчин, в то время как более низкие концентрации не должны учитываться, поскольку в таких количествах микоплазмы (кроме патогенных видов) могут обнаруживаться у здоровых людей. УРОГЕНИТАЛЬНОГО МИКОПЛАЗМОЗА

Mycoplasma genitalium исключительно молекулярно-биологическими методами (ПЦР, ПЦР в реальном времени). * ПРИНЦИП ДИАГНОСТИКИ УРОГЕНИТАЛЬНОГО МИКОПЛАЗМОЗА

*Весьма перспективна, в частности NASBA в реальном времени. * Недопустимо использование методов прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) для выявления генитальных микоплазм. * реакция транскрипционной амплификации

Лечение и профилактика: *Вакцинопрофилактика не разработана. Для лечения применяют антибиотики тетрациклинового ряда, макролиды, фторхинолоны. *Профилактика урогенитальных микоплазмозов аналогична методам предупреждения прочих венерических заболеваний.