Кафедра Гистологии эмбриологии и цитологии Понятие о гемограмме

Кафедра Гистологии, эмбриологии и цитологии Понятие о гемограмме. Эритроцитарные параметры

n Кровь - своеобразная жидкая ткань, относящаяся к тканям внутренней среды, которая циркулирует в сосудах благодаря ритмическим сокращениям сердца. На долю крови приходится 6 -8% массы тела (4 -6 л у взрослого человека).

Функции крови: 1. Транспортная—наиболее универсальная, связана с обеспечением переноса разнообразных веществ. Включает ряд частных функций: - Дыхательная—перенос газов (О 2 и СО 2) как в растворённом, так и в химически связанном состоянии - Трофическая—перенос питательных веществ из участков их всасывания и накопления к тканям - Экскреторная—удаление из тканей продуктов метаболизма и их выделение из организма органами выделения - Регуляторная—перенос гормонов, факторов роста и др. биологически активных веществ к клеткам разных тканей; распределение тепла между органами и его выделение во внешнюю среду (терморегуляторная функция)

Функции крови: 2. Гомеостатическая –поддержание постоянства внутренней среды организма, в т. ч. кислотно-щелочного и осмотического равновесия, водного баланса, температуры тела, биохимического состава тканевых жидкостей

Функции крови: 3. Гемостатическая –участие в свёртывающей системе 4. Защитная—нейтрализация чужеродных АГ, обезвреживание вирусов, бактерий неспецифическими и специфическими (иммунными) механизмами 5. Иммунная—участие в иммунных реакциях

КРОВЬ:

Компоненты крови включают: Форменные элементы плазма крови (эритроциты жидкое межкле- - лейкоциты точное вещество тромбоциты) При отстаивании или центрифугировании крови в пробирке происходит разделение крови на её компоненты, что позволяет измерить их относительное содержание

ПЛАЗМА КРОВИ Является средой, в которой взвешены все форменные элементы n Содержит ряд неорганических ионов и органических веществ, обеспечивающих трофическую, регуляторную, защитную, гомеостатическую функции крови, а также обусловливающих её свёртывание, участвует в газообмене, содержит буферные системы, способствующие под держанию стабильных значений р. Н n

Состав плазмы крови: 90% воды 2. 9% органических веществ—белки более 200 видов, которые обеспечивают её вязкость, онкотическое давление, свёртываемость, перенос различных веществ, и глюкоза 3. 1% неорганических веществ—ионы калия, натрия, кальция, хлора, микроэлементы 1.

Основные белки плазмы: n n Альбумины—количественно преобладающие белки— переносят ряд метаболитов, гормонов, ионов, поддерживают онкотическое давление крови Глобулины—(α- и β-)—переносят ионы металлов и липиды в форме липопротеинов; γ-глобулины представляют собой фракцию АТ (иммуноглобулинов) Фибриноген—обеспечивает свёртывание крови, превращаясь в нерастворимый белок фибрин под воздействием тромбина Компоненты комплемента —участвуют с неспецифических защитных реакциях

n Сыворотка крови—жидкость, остающаяся после свёртывания крови. По своему составу она сходна с плазмой крови, однако в ней отсутствуют фибриноген и факторы свёртывания.

Форменные элементы эритроциты тромбоциты лейкоциты Лейкоциты являются истинными клетками. Эритроциты и тромбоциты относятся к постклеточным структурам

n Анализ крови (включающий цитологическое и биохимическое исследование) благодаря быстроте и простоте получения её проб у больного и высокой диагностической ценности результатов получил широкое распространение в клинической медицине. Ни одна ткань организма не исследуется в диагностических целях так часто, как кровь.

Концентрацию форменных элементов определяют при анализе крови в расчёте на 1 мкл (1 куб мм) или 1 л крови. Результаты анализа записываются в виде гемограммы

Подсчёт концентрации форменных элементов крови производится под микроскопом в специальных счётных камерах (камера Горяева). В последние годы всё более широкое распространение получают методы автоматического подсчёта форменных элементов с использованием автоматических гематологических анализаторов, которые по точности, надёжности и несопоставимо более высокой скорости превосходят традиционные «ручные» методы

Для исследования ОАК (общего анализа крови) кровь берут из пальца натощак (мочки уха или пятки у новорожденных и детей раннего возраста). Место прокола обрабатывают ватным тампоном, смоченным 70% этиловым спиртом. Прокол кожи проводят стандартным копьем-скарификатором разового пользования. Кровь должна вытекать свободно, без сдавливания фаланги пальца. n По современным стандартам диагностики используется кровь, взятая из вены. В таком случае гемограмма анализируется с помощью геманализатора (автоматического счётчика). Принцип их работы основан на различной электропроводности взвешенных частиц в жидкости. n

Морфологическую картину форменных элементов исследуют в окрашенных мазках крови под микроскопом. Существует несколько способов окраски мазков крови, основанных на химическом сродстве элементов клетки к определенным анилиновым краскам. Так, цитоплазматические включения метахроматически окрашиваются органическим красителем азуром в яркопурпурный цвет (азурофилия). В окрашенных мазках крови определяют величину эритроцитов (микроциты, макроциты и мегалоциты), их форму, окраску, например насыщенность эритроцита гемоглобином (цветной показатель), величину лейкоцитов, лимфоцитов, цвет цитоплазмы лейкоцитов, лимфоцитов.

геманализаторы С разработкой автоматических анализаторов крови отмечается развитие нового этапа в современной гематологической диагностике. Применение этой аппаратуры позволяет значительно повысить точность исследований, поднять производительность лаборатории и, кроме этого, измерять целый ряд дополнительных параметров клеток крови, обладающих высокой информативностью.

Гематологический автоанализатор является неотъемлемой частью современной клиникодиагностической лаборатории. Появление этих приборов произвело поистине революционные изменения в практике анализа клеточного состава крови. n Благодаря высокой производительности анализатора, лаборант выполняет исследование крови по 20 и более показателям всего за 1 минуту. Но самое главное - современные гематологические анализаторы обладают исключительно высокой точностью и аналитической надежностью, абсолютно недостижимыми при выполнении исследований ручными методами. При подсчете клеток крови в камере Горяева только статистическая ошибка, обусловленная случайными вариациями числа клеток, попадающих в площадь сетки Горяева, составляет около 7%. Суммарная же погрешность может превышать 10 -15% и существенно зависит от навыков лаборанта, от его n

n При выполнении исследований ручными методами велика вероятность грубых ошибок. Частые расхождения результатов анализа с клинической картиной формирует у клиницистов устойчивое недоверие к лаборатории. Современные же гематологические автоанализаторы позволяют выполнять измерения концентрации клеток крови с точностью 1 -3%. Отсутствие элементов, изменяющих свои характеристики со временем, гарантирует высокую аналитическую надежность получаемых результатов. Наличие в лаборатории гематологического анализатора кардинальным образом меняет ситуацию - не лаборатория подстраивается под клинициста, а клиницист верифицирует предполагаемый диагноз на основании полученных из КДЛ данных. Производительность современных гематологических анализаторов варьируется от 30 до 120 проб крови в час. Чем выше производительность, тем выше цена прибора

Современный гематологический анализатор является техническим устройством, которое обеспечивает выполнение аналитического процесса – определение клеточного состава крови человека в автоматическом режиме. После ввода пробы крови в анализатор внутри прибора выполняются следующие процедуры: приготовление двух разведений введенной пробы крови: первое разведение - для подсчета концентрации лейкоцитов (в нем же после лизиса эритроцитов подсчитывается концентрация гемоглобина), и второе разведение – для подсчета концентрации эритроцитов и тромбоцитов. n Первое разведение крови получается путем дозирования цельной крови (обычно 10 – 20 мкл) и изотонического разбавителя (5 – 10 мл) с последующим добавлением лизирующего раствора, который разрушает эритроциты и преобразует все формы гемоглобина к одной форме. n n

Схема аналитического процесса подсчета гематологических показателей на современном геманализаторе. Рисунок 1.

n Второе разведение крови получается путем дозирования первого разведения крови (обычно 50 – 100 мкл) (до того как в него добавляется лизирующий раствор) и изотонического разбавителя (5 – 10 мл). n На втором этапе анализатор определяет концентрации клеток крови в приготовленных разведениях, анализирует индивидуальные характеристики клеток крови: объем, свойства пропускания и рассеяния света; измеряет концентрацию производной формы гемоглобина. Для этого часть первого разведения крови по магистралям анализатора поступает в специальное устройство, которое подсчитывает лейкоциты, другая часть первого разведения поступает в проточную кювету гемоглобинометра, а второе разведение крови поступает в устройство, которое подсчитывает эритроциты и тромбоциты. Для расчета концентраций клеток при их подсчете измеряется объем разведения крови, прошедшего через устройство подсчета клеток. n На третьем этапе прибор выполняет комплекс вычислений, в результате которых получаются конечные данные анализа, и выводит на дисплей и на печать эти данные.

В настоящее время большинство показателей выполняют на автоматических гематологических анализаторах, которые в состоянии одновременно определять от 5 до 40 параметров (в зависимости от модели анализатора). Из них основными являются количество лейкоцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит, количество эритроцитов, средний объём эритроцита, средняя концентрация гемоглобина в эритроците, среднее содержание гемоглобина в эритроците, полуширина распределения эритроцитов по размерам, количество тромбоцитов, средний объём тромбоцита.

n Вставить фото ОАК

WBC (white blood cells — белые кровяные тельца) — абсолютное содержание лейкоцитов (норма 4, 5— 9 * 109 кл/л) RBC (red blood cells — красные кровяные тельца) — абсолютное содержание эритроцитов (норма 4, 3— 5, 7*109 кл/л) HGB (Hb, hemoglobin) — концентрация гемоглобина в цельной крови (норма 132— 173 г/л). HCT (hematocrit) — гематокрит (норма 0, 39— 0, 49), часть (% = л/л) от общего объёма крови, приходящаяся на форменные элементы крови. Кровь на 40— 45 % состоит из форменных элементов (эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов) и на 60— 65 % из плазмы. Гематокрит это соотношение объёма форменных элементов к плазме крови. Считается, что гематокрит отражает соотношение объёма эритроцитов к объёму плазмы крови, так как в основном эритроциты составляют объём форменных элементов крови. PLT (platelets — кровяные пластинки) — абсолютное

Эритроцитарные индексы (MCV, MCHC): MCV — средний объём эритроцита в кубических микрометрах (мкм) или фемтолитрах (фл)(норма 80— 95 фл). В старых анализах указывали: микроцитоз, нормоцитоз, макроцитоз. MCH — среднее содержание гемоглобина в отдельном эритроците в абсолютных единицах (норма 27— 31 пг), пропорциональное отношению «гемоглобин/количество эритроцитов» . Цветной показатель крови в старых анализах. ЦП=MCH*0. 03 MCHC — средняя концентрация гемоглобина в эритроците (норма 320— 370 г/л), отражает степень насыщения эритроцита гемоглобином. Снижение MCHC наблюдается при заболеваниях с нарушением синтеза гемоглобина. Тем не менее, это наиболее стабильный гематологический показатель. Любая неточность, связанная с определением гемоглобина, гематокрита, MCV, приводит к увеличению MCHC, поэтому этот параметр используется как индикатор ошибки прибора или ошибки, допущенной при подготовке пробы к исследованию.

Тромбоцитарные индексы (MPV, PDW, PCT): MPV (mean platelet volume) — средний объем тромбоцитов (норма 7— 10 фл). PDW — относительная ширина распределения тромбоцитов по объёму, показатель гетерогенности тромбоцитов. PCT (platelet crit) — тромбокрит (норма 0, 108— 0, 282), доля (%) объёма цельной крови, занимаемую тромбоцитами.

Лейкоцитарные индексы: LYM% (LY%) (lymphocyte) — относительное (%) содержание лимфоцитов. LYM# (LY#) (lymphocyte) — абсолютное содержание лимфоцитов MXD% — относительное (%) содержание смеси (норма 5— 10%) моноцитов, базофилов и эозинофилов. MXD# — абсолютное содержание смеси моноцитов, базофилов и эозиноилов NEUT% (NE%) (neutrophils) — относительное (%) содержание нейтрофилов. NEUT# (NE#) (neutrophils) — абсолютное содержание нейтрофилов. MON% (MO%) (monocyte) — относительное (%) содержание моноцитов MON# (MO#) (monocyte) — абсолютное содержание моноцитов EO% — относительное (%) содержание эозинофилов. EO# — абсолютное содержание эозинофилов. BA% — относительное (%) содержание базофилов. BA# — абсолютное содержание базофилов. IMM% — относительное (%) содержание незрелых гранулоцитов. IMM# — абсолютное содержание незрелых гранулоцитов. ATL% — относительное (%) содержание атипичных лимфоцитов. ATL# — абсолютное содержание атипичных лимфоцитов. GR% — относительное (%) содержание (норма 47— 72%) гранулоцитов. GR# — абсолютное содержание гранулоцитов.

1. ЭРИТРОЦИТЫ n Наиболее многочисленные форменные элементы крови. У человека они представляют собой постклеточные структуры, утратившие в процессе развития ядро и почти все органеллы. Всего крови у взрослого циркулируют 25 -30*10 в 12 эритроцитов. Эритроциты образуются в красном костном мозге, откуда поступают в кровь. В крови они функционирую в течение всего периода жизни (100 -120 сут), затем разрушаются макрофагами селезёнки и в меньшей степени печени и красного костного мозга.

Функции эритроцитов: Дыхательная функция обеспечивается благодаря тому, что эритроциты заполнены гемоглобином (составляет 33%), который определяет их цвет 2. Регуляторные и защитные функции обеспечиваются благодаря способности эритроцитов переносить на своей поверхности ряд биологически активных веществ, в т. ч. иммуноглобулины, компоненты комплемента, иммунные комплексы. 1.

Строение эритроцитов n 1. 2. 3. 4. Форма эритроцитов—двояковогнутый диск, определяет более светлую окраску их центральной части по сравнению с периферической. Благодаря такой форме обеспечиваются: Увеличение их поверхности (общая её площадь составляет у взрослого около 3800 кв. м, что в 2000 раз превосходит поверхность тела), площадь поверхности каждого эритроцита примерно в 1. 5 раза больше, чем у сферы такого же объёма Снижение диффузионного расстояния (между поверхностью и наиболее удалённой от неё части цитоплазмы)-на 30% по сравнению с такими же элементами сферической формы, благодаря чему создаются оптимальные условия для газообмена Возможность увеличения объёма эритроцита без повреждения его плазмолеммы благодаря наличию её резерва, в частности, способность набухать в гипотонической среде Способность к обратимой деформации прохождении через узкие и изогнутые капилляры.

Изменение формы эритроцитов Возникают при их старении и при патологических условиях вследствие нарушений осмотического равновесия или дефектов цитоскелета. Пойкилоцитоз—наличие в крови эритроцитов необычной формы. Является неблагоприятным признаком n Нормоциты n Эллиптоциты—овалоциты n Дакриоциты—слезовидные клетки n Акантоциты—клетки на поверхности имеют зубчатую форму n Шизоциты—фрагменты, обломки эритроцитов n Эхиноциты—сферические клетки, на поверхности 3050 спикул n Кодоциты—мишеневидные клетки n Дрепаноциты—серповидные эритроциты n Стоматоциты

эллиптоциты

дакриоциты

акантоциты

шизоциты

эхиноциты

кодоциты—мишеневидные клетки

стоматоциты

дрепаноциты

Все патологические формы

Размеры эритроцитов средний диаметр эритроцитов 7. 2— 7. 5 мкм 1. Макроциты—крупные эритроциты (диаметром свыше 9 мкм), их преобладание в крови называется макроцитозом 2. Микроциты—мелкие эритроциты(диаметр 6 мкм и менее), их повышенно содержание в мазке именуется микроцитозом 3. Анизоцитоз—резкие различия в размерах отдельных эритроцитов на мазке n

Причины: Микроцитоз: n дефицит железа (ЖДА) n отравление свинцом n анемии, связанные с хроническими заболеваниями Макроцитоз: n как физиологическое явление у новорожденных, особенно в течение первых 2 недель, исчезает к 2 мес возрасту n при нарушении синтеза ДНК (дефицит фолиевой кислоты, эритролейкоз, приём некоторых лекарственных препаратов) n патология липидов эритроцитарной мембраны (заболевание печени, гипотиреоз, злоупотребление алкоголем, после удаления селезёнки)

Полицитемия (эритроцитоз)—повышение концентрации эритроцитов вследствие повышенной продукции их в костном мозге Причины: n Реакция адаптации у людей, проживающих на больших высотах (при низком содержании кислорода в воздухе) n Длительные гипоксические состояния - ХОБЛ, врождённые пороки сердца, n Опухоли почек, надпочечников n Кобальтовое отравление Полицитемия опасна из-за повышения вязкости крови, которое может приводить к нарушениям её циркуляции. Часто встречается относительный эритроцитоз, имеет преходящий характер и возникает при сгущении крови вследствие большой потери жидкости (неукротимая рвота, понос, обильное потоотделение, передозировка диуретиков)

2. ГЕМОГЛОБИН Гемоглобин — это гемопротеин, относится к числу важнейших дыхательных белков, принимающих участие в переносе кислорода от легких к тканям , с молекулярной массой около 60 тыс. , окрашивающий эритроцит в красный цвет после связывания молекулы O 2 с ионом железа (Fe++). n Эмбриональный Hb. P —в течение первых 3 мес внутриутробного развития, последние 6 мес внутриутробного развития у плода присутствует n Фетальный Hb. F , который обладает большим сродством к О 2, чем сменяющий его в течение первого года жизни n Гемоглобин взрослых Hb. A При рождении ребенка до 50— 80 % гемоглобина у него представлены гемоглобином F и 15— 40 % — типом А, а к 3 годам уровень гемоглобина F снижается до 2 %.

Снижение гемоглобина Анемия—снижение содержания гемоглобина в крови при падении его уровня в отдельном эритроците и (или) концентрации эритроцитов в крови. Причины : n Нарушение синтеза гемоглобина (вследствие недостаточности железа или образования его аномальных форм) n Кровопотеря n Чрезмерное разрушение эритроцитов n Недостаточное образование эритроцитов

Причины анемий: n n n n Острые или хронические кровотечения Инфекции Воспалительные заболевания Интоксикации солями тяжёлых металлов Глистные инвазии Опухоли различных локализаций Авитаминоз Заболевания эндокринной системы, почек, печени, желудка, поджелудочной железы

3. ЦВЕТОВОЙ ПОКАЗАТЕЛЬ n Цветовой показатель (ЦП) — степень насыщенности эритроцитов гемоглобином. Цветовой показатель отражает относительное содержание гемоглобина в эритроците. Рассчитывают его по формуле: ЦП = (гемоглобин (г/л) * 3) / первые 3 цифры количества эритроцитов в крови Например, гемоглобин 134 г/л, эритроциты 4, 26 млн/мкл, тогда цветовой показатель равен (134 * 3) / 426 = 0, 94. n В норме показатель равен 0, 85 -1, 05

Классификация анемий по цветовому показателю: 1. нормохромные (ЦП 0, 85 -1, 05) 2. гипохромные - ЦП < 0, 85. Чаще всего наблюдаются при дефиците железа, при гемолизе и при острых кровопотерях. 3. гиперхромные - ЦП >1, 05. Лежат в основе витамин- В 12 -дефицитных и фолиеводефицитных анемий.

У автоматических анализаторов нет функции расчета цветового показателя крови, но они определяют среднее содержание гемоглобина в одном эритроците (МСН), одного из эритроцитарных индексов. Определение МСН производят делением концентрации гемоглобина на число эритроцитов в одинаковом объеме крови (1 мкл). Практически среднее содержание гемоглобина в одном эритроците представляет частное отделения гемоглобина (Нb) (г/л) на число эритроцитов в миллионах. n При патологических состояниях отмечается параллельное и примерно одинаковое уменьшение как количества эритроцитов, так и гемоглобина. n

4. ГЕМАТОКРИТ n Об общем объеме эритроцитов дает представление гематокритное число - объемное соотношение форменных элементов крови и плазмы. Нормальное гематокритное число у мужчин 40 -48%, у женщин - 36 -42%. Его определяют с помощью гематокрита, представляющего собой два коротких стеклянных градуированных капилляра в специальной насадке. Гематокритное число зависит от объема эритроцитов в кровяном русле, вязкости крови, скорости кровотока и других факторов. Оно повышается при обезвоживании организма, тиреотоксикозе, сахарном диабете, кишечной непроходимости, беременности и др. Низкое гематокритное число наблюдается при кровотечениях, сердечной и почечной недостаточности, голодании, сепсисе.

3. РЕТИКУЛОЦИТЫ Молодые формы эритроцитов, недавно поступившие в кровоток из костного мозга. В них сохраняются митохондрии, небольшое число рибосом, центриоль и остатки комплекса Гольджи. Суправитальная окраска крезиловым синим вызывает образование агрегатов указанных органелл, которые выявляются в виде базофильной сеточки (ретикулум)

Ретикулоциты Увеличение содержания ретикулоцитов может происходить вследствие их усиленного выброса костным мозгом при возникновении потребности в быстром повышении числа эритроцитов, например, после массивной кровопотери, внутрисосудистого разрушения или при подъёме на высоту.

n Количество ретикулоцитов подсчитывают в мазках крови или в камере Горяева. У взрослых их содержание составляет 2 -10 ‰.

Рис. : Форменные элементы крови человека в мазке. : 1 – эритроцит, 2 – сегментоядерный нейтрофильный гранулоцит, 3 – палочкоядерный нейтрофильный гранулоцит, 4 – юный нейтрофильный гранулоцит, 5 – эозинофильный гранулоцит, 6 – базофильный гранулоцит, 7 – большой лимфоцит, 8 – средний лимфоцит, 9 – малый лимфоцит, 10 – моноцит, 11 – тромбоциты (кровяные пластинки).

4. СОЭ Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) определяется методом Панченкова, основанным на свойстве эритроцитов оседать при помещении несвернувшейся крови в вертикально расположенную пипетку. СОЭ зависит от многих факторов и в среднем выше у женщин, чем у мужчин. СОЭ зависит от количества эритроцитов, их величины, объема и способности к образованию конгломератов, от температуры окружающей среды, количества белков плазмы крови и соотношения их фракций. неспецифический n индикатор патологического состояния организма.

СОЭ Повышенная СОЭ может быть n при инфекционных, иммунопатологических, воспалительных, некротических и опухолевых процессах. Наибольшее увеличение СОЭ наблюдается при синтезе патологического белка, что характерно для миеломной болезни, макроглобулинемии Вальденстрема, болезни легких и тяжелых цепей, а также при гиперфибриногенемии. n Значительно реже отмечается замедленная СОЭ, например при эритремии, вторичных эритроцитозах, повышении концентрации желчных кислот и желчных пигментов в крови, гемолизе, кровотечениях и др. n Оно может увеличиваться и при таких физиологических состояниях, как прием пищи (до 25 мм/ч), беременности (до 45 мм/ч).

n Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) определяется методом Панченкова, основанным на свойстве эритроцитов оседать при помещении несвернувшейся крови в вертикально расположенную пипетку. СОЭ зависит от количества эритроцитов, их величины. Объема и способности к образованию агломератов, от температуры окружающей среды, количества белков плазмы крови и соотношения их фракций. Повышенная СОЭ может быть при инфекционных, иммунопатологических, воспалительных, некротических и опухолевых процессах. Наибольшее увеличение СОЭ наблюдается при синтезе патологического белка, что характерно для миеломной болезни, макроглобулинемии Вальденстрема, болезни легких и тяжелых цепей, а также при гиперфибриногенемии. Следует иметь в виду, что снижение содержания фибриногена в крови может компенсировать изменение соотношения альбуминов и глобулинов, вследствие чего СОЭ остается нормальной или замедляется. При острых инфекционных болезнях (например, при гриппе, ангине) наиболее высокая СОЭ возможна в период снижения температуры тела, при обратном развитии процесса. Значительно реже отмечается замедленная СОЭ, например при эритремии, вторичных эритроцитозах, повышении концентрации желчных кислот и желчных пигментов в крови, гемолизе, кровотечениях и др.

ВСЕГО НАИЛУЧШЕГО!