Изучение изменчивости фенологических форм Quercus robur L. с помощью ISSR-маркеров Докладчик: Чохели В. А.
Особенности ПЦР Используют ДНК-полимеразу, которая синтезирует копии фрагментов ДНК начиная от затравок Затравки – одноцепочечные фрагменты ДНК (20 -25 нуклеотидов), которые синтезируются искусственно. Определяют точку начала копирования
Позволяет получить множество копий определенного фрагмента ДНК
Электрофорез в агарозном геле Основные принципы: 1. Молекула ДНК отрицательно заряжена. 2. Молекулы ДНК под действием постоянного электрического тока движутся от катода к аноду (от «-» к «+» ). 3. Полимеризованный агарозный гель имеет пористую структуру. 4. Разные по размеру молекулы ДНК проходят различное расстояние в агарозном геле за один промежуток времени.
Электрофорез в агарозном геле ДНК «-» 0. 5 x TBE буфер «+»
Анализ продуктов ПЦР – реакции проводят с помощью метода электрофореза фрагменты ДНК одного размера
Применение ПЦР • Использование для детекции патогена • Genetic fingerprinting • Клонирование генов • Секвенирование ДНК • Мутагенез
Использование для детекции патогена ПЦР выявляет специфическую ДНК возбудителя и прямо указывает на возбудителя инфекции
В ПЦР праймеры определяют участок, который будет копироваться участок ДНК, который необходимо копировать CAGTTACGTAGGCTTACAGCTACCAATGCTAGCAAGCTACGCATTCGAT GTCAATGCA-3’ GTCAATGCATCCGAATGCTCGATGGTTACGATCGTTCGATGCGTAAGCTA праймер 1 праймер 2 3’-TTCGAT
Genetic fingerprinting Исследуемый фрагмент ДНК CACATAGGCTTACAGCTACCAATCACAGCTAGCAAGCTACGCACACATTCGAT GTGTGTGT
Фото фореза с использованием межмикросателлитного анализа
2 формы дуба черешчатого
Фото фореза с использованием ISSR-маркеров
Дендрограмма построенная методом по парного внутригруппового не взвешенного среднего (UPGMA)
Дендрограмма построенная методом ближайшего соседа (NJ)
Скачать презентацию Изучение изменчивости фенологических форм Quercus robur L с
Seminar_16_02.pptx