Иммунологические тесты в нефрологии Иммунная система,

Иммунологические тесты в нефрологии

Иммунная система, объединяющая лимфоидные органы и диссеминированные клетки (лимфоциты, макрофаги и др. ), которые участвуют в выполнении иммунной защиты в основном в форме иммунного ответа. Иммунный ответ – это комплекс реакций, на внедрение чужеродных агентов (антигенов). Антиген – это чужеродная субстанция, при попадании в организм способная вызвать иммунный ответ, направленный на её удаление. Обычно это макромолекула – белок или полисахарид. Иммунная защита от биологической агрессии осуществляется с помощью реакций, которые включают в себя: • Распознавание чужеродных и измененных собственных макромолекул (антигенов); • Удаление из организма антигенов и несущих их клеток; • Запоминание контакта с конкретными антигенами, определяющее их ускоренное удаление при повторном поступлении в организм.

Органы иммунной системы

Миграция иммунокомпетентных клеток Иммуннокомпетентные клетки находятся в состоянии рециркуляции, т. е. постояно происходит переход клеток из кровяного русла в лимфоидные органы, а затем в лимфу и вновь в кровоток. • 1 фаза – качение клетки вдоль внутренней поверхности сосуда , обусловлено действием селектинов ( вначале Р, затем L и E-селектинов). • 2 фаза – прочной адгезии , осуществляется интегринами ( это гетеродимеры гликопротеинов , состоящие из комбинаций - и - цепей , которые обеспечивают адгезию клетка - клетка и клетка - матрикс (LFA-1, Mac-1), с помощью соединения с их лигандами (ICAM-1, ICAM-2) • 3 фаза – трансмиграции через эндотелий частично контролируется теми же интегринами.

Факторы защиты • Неспецифические: – фагоцитоз и опосредованное комплементом разрушение клеток. Клетки и молекулы, которые защищают организм от разных экзогенных (инфекций) и эндогенных агрессий (опухоли). • Специфические – гуморальное (клетки-эффекторы В-л) и клеточное (клетки-эффекторы Т-л) звенья иммунитета. Отличие специфических факторов защиты от неспецифических заключается в способности распознавать антиген и сохранять память о нём.

Неспецифические факторы: Специфические факторы: p Фагоцитирующие клетки крови и p Распознавание и элими- тканей: микрофаги нейтрофилы, нацию чужеродных мак- макрофаги моноциты, тканевые ромолекул осуществляют: макрофаги: альвеолярные ¶ иммунокомпетентные макрофаги, клетки Купфера в клетки (лимфоциты); печени, мезангиальные клетки · продуцируемые и почечных клубочков, остеокласты секретируемые ими костной ткани и др. ) антитела (иммуно- p Особый класс лимфоцитов, глобулины). получивших название натуральных киллеров или NK-клеток. p Система комплемента p Цитокины (интерлейкины, интерфероны разновидности цитокинов и др. ).

Моноциты/макрофаги • обеспечивают фагоцитоз , переработку и представление антигена Т-лимфоцитам; • являются источником цитокинов (в процессе представления антигена активированные макрофаги синтезируют и секретируют провоспалительные цитокины IL-1 b, IL-6 и TNF- a. ) и костимулирующих молекул , необходимых для активации Т- и В-лимфоцитов. Принимают участие в: • неспецифической защите от патогенных микроорганизмов; • запуске специфического иммунного ответа; • клеточно-опосредованном иммунном ответе.

Моноциты/макрофаги • обеспечивают фагоцитоз , переработку и представление антигена Т-лимфоцитам; • являются источником цитокинов (в процессе представления антигена активированные макрофаги синтезируют и секретируют провоспалительные цитокины IL-1 b, IL-6 и TNF-a. ) и костимулирующих молекул , необходимых для активации Т- и В-лимфоцитов. Принимают участие в: • неспецифической защите от патогенных микроорганизмов; • запуске специфического иммунного ответа; • клеточно-опосредованном иммунном ответе.

Комплемент • Комплемент – система белковых факторов, каскадно активи- руемых в условиях внедрения в организм чужеродных агентов. • Состоит из более чем 25 белков- компонентов комплемента, которые представлены в сыворотке крови, главным образом во фракции -глобулинов. • Белки вырабатываются преимущественно макрофагами и клетками печени. • В норме компоненты комплемента неактивны. Пусковые события их активации зависят от продуктов, формирующихся при иммун- ном ответе или содержащихся в микроорганизмах. • Чаще определяется гемолитическая активность комплемента. Это функциональный показатель, который снижается при недостатке хотя бы одного из компонентов комплемента. • Нормальная гемолитическая активность комплемента свидетельствует о том, что в сыворотке присутствуют все компоненты классического пути его активации (С 1 -С 9) в достаточном количестве.

Комплемент • Биологический смысл активации по альтернативному пути заключается в том , что защита от чужеродного начинается еще до появления антител. • Активацию комплемента по альтернативному пути вызывают инулин , зимозан , бактериальный липополисахарид , агрегаты Ig. G 4, Ig. A, Ig. E. • Альтернативный путь является менее мощным и продуктивным, чем классический.

Активация системы комплемента по классическому и альтернативному пути

• Генетические дефекты белков системы комплемента проявляются: – Дефекты С 1 -С 4 – аутоиммунными заболеваниями, – Дефекты любых компонентов комплемента проявляются рецидивирующими бактериальными и грибковыми инфекциями. – Дефекты С 3 компонента комплемента иногда проявляются хроническим гломерулонефритом. • Определение С 3 и С 4 компонентов комплемента позволяет установить преобладающий путь активации. – С 4 расходуется только при активации по классическому пути. – С 3 участвует как в классическом, так и в альтернативном пути активации комплемента, но при активации по классическому пути уровень С 3 снижается более значительно. Измерение уровней С 3 и С 4 в динамике позволяет судить об эффективности лечения многих аутоиммунных заболеваний, особенно СКВ (при обострении уровни С 3 и С 4 снижены). • При обострении комплемент обычно активируется по классическому пути, при хроническом течении – по альтернативному пути (хотя возможно сочетание обоих путей активации комплемента).

Формирование мембраноатакующего комплекса Анафилатоксины оказывают провоспалительные действие: повышают проницаемость сосудов, вызывают спазм гладкой мускулатуры, агрегацию тромбоцитов, отек тканей, рекрутирование и активацию фагоцитов, деструкцию тканей, а также играют важную роль в патогенезе иммунокомплексных заболеваний.

МЕХАНИЗМЫ ГИПОКОМПЛЕМЕНТЕМИИ pактивация иммунными комплексами (потребление превышает продукцию) p уменьшение продукции (болезни печени) p ингибирование С 3 - и С 4 - конвертаз p генетические дефекты

Заболевания, протекающие с гипо- и нормокомплементемией Гипокомплементемия + • Антистрептококковые антитела Постстрептококковый ГН • АНФ Волчаночный нефрит • С 3 -нефритический фактор Мембрано-пролиферативный гломерулонефрит • Смешанная криоглобулинемия криоглобулинемический гломерулонефрит Нормокомплементемия + • Ig. A-фибронектиновые комплексы Ig. A-нефропатия

Легкие цепи могут быть только капа ( ) или лямбда ( ). Fab фрагмент содержит одну вариабельную и одну константную область. Специфичность антител определяется аминокислотной последовательностью вариабельных областей. Fc-фрагмент представляет собой С-концевые участки тяжелых цепей и состоит только из константных областей. При помощи Fc-фрагмента происходит соединение с различными типами клеток : МФ, тромбоцитами , тучными клетками и комплементом. В распознавании Ag Fc - фрагмент участие не принимает. 5 классов иммуноглобулинов – Ig. A, Ig. G, Ig. M, Ig. D, Ig. E. Ig различаются по типу тяжелых цепей. Ig. A(13%), Ig. G(80%), Ig. M(6%), Ig. D и Ig. E сотые и тысячные доли процента. Выделяют подклассы иммуноглобулинов: Ig. G 1, Ig. G 2, Ig. G 3, Ig. G 4, среди Ig. A – Ig. A 1, Ig. A 2.

Классы иммуноглобулинов • Ig. G – способны преодолевать плацентарный барьер и обеспечивают гуморальный иммунный ответ у новорожденных в первые месяцы жизни , активируют комплемент , доминируют при вторичном иммунном ответе , обеспечивают антибактериальную и антитоксическую защиту. • Ig. M – этот класс иммуноглобулинов появляется первым на самых ранних этапах гуморального иммунного ответа , т. е представляют собой антитела первичного иммунного ответа. • Ig. A – преобладает в секретах , нейтрализует вирусы , препятствует адгезии, адсорбции бактерий и вирусов. • Ig. E – опосредует реакции ГНТ ( анафилактические реакции ). Участвует в противопаразитарном иммунитете. Повышенное количество иммуноглобулинов этого класса встречается при глистных инвазиях. • Ig. D – находится на поверхности В- лимфоцитов , выполняя функции иммуноглобулиновых антиген-распознающих рецепторов. В процессе дифференцировки В-клеток эти рецепторы появляются первыми.

Некоторые иммунологические маркеры o С 3 - нефритический фактор – это антитела к С 3 - конвертазе (комплекс – С 3 b. Bb), однако С 3 - нефритический фактор неспецифичен. Выявляется при СКВ, криоглобулинемии , инфекционно-зависимом гломерулонефрите. o С 4 - нефритический фактор (менее известен) – С 4 b 2 a (при классическом пути активации комплемента). Наиболее часто встречается при мембрано -пролиферативном ГН, реже при гломерулонефрите с минимальными изменениями и волчаночном нефрите. o LE -клетки – это фагоцитированные ядра разрушенных клеток, которые содержатся в моноцитах и нейтрофилах. Обнаружение LE-клеток – недостаточно точный метод диагностики СКВ, так как LE -клетки встречаются и при других заболеваниях.

o Антинуклеарные антитела (АНА) – антитела к тем или иным структурам клеточного ядра (используется непрямая иммунофлюоресценция). АНФ – выявляется в 95% случаев СКВ. Появляются в течение 3 -х месяцев от начала заболевания. Однако АНФ м. б. не только при СКВ, но и у пожилых, при употреблении лекарственных средств, артритах (РА). Титр АНФ не позволяет судить об активности заболевания и эффективности лечения. Тип свечения: характер распределения флюоресцентной метки в клетках. 4 Диффузное – чаще при СКВ, лекарственном волчаночном синдроме. 4 Периферическое – преобладание в сыворотке антител к ДНК (при волчаночном нефрите). 4 Пятнистое – обусловлено антителами к экстрагируемым ядерным антигенам. Наблюдается при ССД, СЗСТ, с- ме Шегрена , лекарственном волчаночном нефрите. 4 Нуклеолярное – распределение метки в районе ядрышек. Этот тип свечения обусловлен наличием антител к рибонуклеопротеиду. Встречается при ССД.

o Антитела к нативной ДНК - относятся к АНА. Определяют с помощью реакцииции связывания комплемента, реакции агглютинации, методом иммунодиффузии , иммунофлюорес - ценции. Диагностически более специфичны для волчаночного нефрита и других тяжелых проявлений СКВ. Определение антител к ДНК в динамике позволяет не только установить диагноз, активность, но и оценить эффективность лечения заболевания. Антитела к одноцепочечной ДНК выявляются при ССД, РА, дерматомиозите, хроническом активном гепатите, лекарственном волчаночном нефрите (гидралазин, прокаинамид, изониазид). Примесь одноцепочечной ДНК можно удалить с помощью хроматографии. Антитела к ДНК обнаруживаются в почках в виде ИК и в сыворотке крови больных СКВ. Эти антитела связываются и активируют комплемент, способствуют разрушению клеток и активируют нейтрофилы и макрофаги.

Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам: r Sm – (от фамилии больного с СКВ – Смит). Высоко специфичен для СКВ. Определяется методом иммунодиффузии (30%), непрямой иммунофлюоресценции, методом ИФА (50 -60%) у больных СКВ. r Антитела к рибонуклеопротеиду – определяется у 30% больных СКВ, для СЗСТ определение этих антител является диагностическим критерием. Используется метод радиальной иммунодиффузии. r Ro/SS-A и La/SS-B – методом ИФА. Антитела к данным антигенам выявляются у 70 % больных синдромом Шегрена. Антитела к Ro/SS-A выявляются у 40 % больных СКВ, а 10 -20% при ССД, ПМ, первичном билиарном циррозе.

o Антицентромерные антитела: Относятся к антинуклеарным антителам. Определяются методом непрямой иммунофлюоресценции . Выявляются при заболеваниях, сопровождающихся синдромом Рейно – ССД и СКВ, редко при полимиозите , первичном билиарном циррозе. Выявление антицентромерных антител при ССД является благоприятным признаком течения заболевания. o Антитела к гистонам: Выявляются с помощью иммуноблотинга (качест-венный метод, позволяющий выявлять Ag и At), ИФА. 4 Н 1 В и Н 2 В регистрируются у 60 % больных СКВ; 4 Н 2 А и Н 2 В, Н 3 и Н 4 при лекарственном волчаночном нефрите (прокаинамид, гидралазин и др. ). r Другие антитела: r Scl-70 выявляют у 25 -30% больных ССД (являются специфичными для этого заболевания). Появление антител к этому антигену является прогностически неблагоприятным признаком ССД. r Антитела к полимеразе и фибриллину выявляются при ССД, но диагностического значения не имеют.

o Антитела к разным типам клеток и компонентам цитоплазмы: 4 Антитела к клеткам коркового слоя надпочечников при первичной надпочечниковой недостаточности. 4 Антитела к микросомальным антигенам щитовидной железы при диффузном токсическом зобе, тиреоидите. o Антифосфолипидные антитела – определяются методом ИФА. 4 Антитела к кардиолипину и волчаночный антикоагулянт выявляют при СКВ и первичном антифосфолипидном синдроме. Волчаночный антикоагулянт: s увеличение активированного частично тромбопластинового времени (АЧТВ); s увеличение свертывания при добавлении фосфолипидов. Антифосфолипидный синдром: · Тромбозы; · Невынашиваемость беременности; · Тромбоцитопения. У больных с АФС может быть положительный тест на сифилис, так как имеются перекрестно реагирующие антигены.

o Антитела при системных васкулитах: 3 Антинейтрофильные антитела ( ANCA ) – определяются методом непрямой иммунофлюоресценции. ANCA цитоплазматические перинуклеарные c-ANCA р-ANCA 70 -80% - специфичны 80 -90% - специфичны для протеиназы-3 для миелопероксидазы. При грануломатозе Вегенера – 90% больных имеют c-ANCA, хотя небольшое количество могут иметь р-ANCA выявляются при БПГН, неспецифическом язвенном колите, узелковом полиартериите. У больных с активным гломерулонефритом в 90% определяются ANCA.

r Антиэндотелиальные антитела – определяются в сыворотке крови у большинства больных с гемолитико -уремическим синдромом и тромботической тромбоцитопенической пурпурой, однако не являются специфическими для этих заболеваний, т. к. могут определяться и при системных васкулитах , Ig. A - нефропати Антиэндотелиальные антитела могут оказывать повреждающее действие на эндотелиальные клетки. У больных с ССД (хотя антиэндотелиальные антитела мало характерны) может развиться прогрессирующая почечная недостаточность и злокачественная АГ как результат почечной тромботической микроангиопатии. r Криоглобулины - это иммуноглобулины сыворотки, которые обратно преципитируют при температуре ниже 37 С. Типы криоглобулинов: 3 моноклональные At (РФ) 3 поликлональные антитела (Ig. G) 3 смешанные (преципитаты из моноклональных + поликлональных At) Смешанная криоглобулинемия проявляется васкулитами кожи. Смешанная криоглобулинемия выявляется при: r СКВ; r Синдроме Шегрена; r Болезни Кавасаки r Узелковом полиартериите.

ТИПЫ КРИОГЛОБУЛИНЕМИЙ И АССОЦИИРОВАННЫЕ С НИМИ БОЛЕЗНИ

Определение криоглобулинов • сразу после забора кровь помещается в водяную баню при температуре 37 о. С • центрифугирование через 72 часа • количество и состав криоглобулинов определяются иммуноэлектрофорезом

Серологическая диагностика постстрептококкового гломерулонефрита Для постстрептококкового гломерулонефрита характерно: p чувствительность АСЛ-О составляет 75% (более характерно для постстрептококкового фарингита); p анти DNаsе B – 90% для гломерулонефрита, который возник после стептококковой пиодермии. Титр постстрептококковых антител не коррелирует с активностью заболевания. p 90% больных с острым постстрептококковым ГН имеют гипокомплементемию (снижены С 3, С 4, С 8, СН 50, а С 4, С 6, С 7 – в норме). Возвращение комплемента к норме через 1 -8 недель. Постоянная протеинурия , гипокомплементемия свидетельствуют о развитии мембрано -пролиферативного гломерулонефрита.

Серологическая диагностика волчаночного нефрита p АНФ – выявляется в 95% СКВ с помощью непрямой иммунофлюоресценции (скрининг 1 раз в 3 месяца). p Анти - Sm At (90% - специфичность, 25 -30% - чувствительность ), анти - ds. DNA At (90% - специфичность, 40 -75% - чувствительность). p При активном волчаночном нефрите у 75 -95% больных развивается гипокомплементемия. Снижены – С 1 q, C 2, C 3, C 4, C 8; C 5, C 6, C 7, C 9 – не снижены. Активация комплемента у больных с волчаночным нефритом м. б. измерена содержанием мембраноатакующего комплекса (МАК). Измерение МАК лучше, чем общий С, С 3, С 4, а также для оценки активности заболевания. Снижение уровней С 4 или С 3 отражает степень активности заболевания. Анти-ds DNA – лучший предиктор обострения, чем С 3 и С 4. Анти-C 1 q At у 50% больных СКВ, особенно у больных с гипокомплементемией.

Диагностика нефрита с системным васкулитом Системный некротизирующий васкулит ассоциируется с ANCA. При грануломатозе Вегенера – 90% больных имеют c-ANCA, однако они не являются специфичными , т. к. другие типы васкулитов имеют c-ANCA. Большинство больных с микроскопическим полиартериитом имеют или c-ANCA или р- ANCA. У больных с гипокомплементемией , кожным васкулитом и гломерулонефритом могут определяться анти-С 1 q At.

Серологическая диагностика нефрита с системным васкулитом Системный некротизирующий васкулит ассоции- руется с ANCA. При грануломатозе Вегенера – 90% больных имеют c-ANCA, однако они не являются специфичными , т. к. другие типы васкулитов имеют c-ANCA. Большинство больных с микроскопическим полиартериитом имеют или c-ANCA или р- ANCA. У больных с гипокомплементемией, кожным васкулитом и гломерулонефритом могут определяться анти-С 1 q At.

Иммунологические методы Нефелометрия - определение концентрации взвешенных частиц и высокомолекулярных веществ в растворе, основанное на оценке интенсивности рассеяния света, проходящего через этот раствор. Применение: определение концентрации Ig G, A, M; C 3, C 4, фактора В, ревматоидного фактора. Методы, основанные на реакции агглютинации. Для реакции агглютинации используют эритроциты (гемагглютинация) или частицы латекса (латекс-агглютинация), покрытые известным анти- геном. В присутствии антител к этому антигену происходит агглютинация эритроцитов или частиц латекса. Применение: гемагглютинация - для определения антител к тиреоглобулину и микросомальным антигенам; латекс-агглютинация - для выявления ревматоидного фактора.

Иммунологические методы Твердофазный иммуноферментный анализ - используется для количественной оценки антигенов и антител. 1) исследуемую жидкость вносят в лунки планшета с сорбированным на них антигеном. 2) во время инкубации антитела связываются с антигеном. 3) планшет отмывают от несвязавшихся антител и добавляют вторые антитела, меченные ферментом. 4) планшет вновь отмывают, добавляют субстрат фермента и хромоген (вещество, меняющее окраску). 5) под действием продукта ферментативной реакции хромоген меняет окраску. Концентрацию антител в пробе определяют по оптической плотности окрашенного раствора. Применение: для определения противовирусных антител, антител к ВИЧ, цитокинов и иммуноглобулинов (подклассы Ig G, Ig E), антифосфолипидных антител, антител к базальной мембране клубочков.

• Иммуноблоттинг - качественный метод, позволяющий выявить антигены и антитела в исследуемой пробе (готовые наборы). • Антитела: – Смесь известных антигенов разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле и переносят на нитроцеллюлозную пленку; – мембрану инкубируют с исследуемой пробой (сывороткой), а затем - с мечеными антителами к иммуноглобулинам. • Антигены: – электрофорез белков исследуемой пробы, которые переносятся на мембрану с добавлением меченых антител к известным антигенам.

Иммунологические методы Простая радиальная иммунодиффузия - позволяет количественно определить содержание антигена в исследуемой пробе. В слое агара, содержащего антитела, вырезают лунки, в одни вносят исследуемый антиген, в другие - стандартный. Антигены диффундируют из лунок в агар , образуя радиальные зоны преципитации. Диаметр зоны преципитации пропорционален концентрации антигена. Применение: ¶ определение иммуноглобулинов, включая подклассы Ig. G; · компонентов комплемента (С 3, С 4, фактора В)

Иммунологические методы Непрямая иммунофлюоресценция - метод, с помощью которого можно выявить антитела к известным антигенам. В качестве источника антигена используют срезы тканей или культуры клеток. Субстрат, перене - сенный на предметное стекло, инкубируют в присутствии исследуемой пробы (сыворотки), а затем - в присутствии меченных флюорохромом антител к иммуноглобулинам. Связанные с субстратом антитела выявляют с помощью флюоресцентного микроскопа. Применение: для определения антинуклеарных антител, антител к вирусам, антител к разным типам клеток и компонентам цитоплазмы.

Иммунологические методы Гемолитическая активность комплемента (гемолиз 50% эритроцитов) - этот показатель снижается при недостатке даже одного компонента комплемента. К эритроцитам, покрытым антителами, добавляют исследуемую сыворотку. Происходит гемолиз эритроцитов (если содержание комплемента в сыворотке снижено, то разрушение эритроцитов менее выражено). Применение: Нормальная гемолитическая активность комплемента свидетельствует, что в сыворотке крови присутствуют все компоненты классического пути его активации в достаточном количестве. Определение С 3 и С 4: Определяют с помощью твердо- фазного иммуноферментного анализа, нефелометрии, иммунодиффузии. Применение: для оценки течения, эффективности лечения СКВ (в большей степени), РА.

Иммунологические методы Определение субпопуляций лимфоцитов: применяются методы непрямой иммунофлюоресценции , проточной цитофлюориметрии и лимфоцитотоксический тест. Проточная цитофлюориметрия осуществляется с помощью прибора цитофлюориметра , который позволяет быстро оценить состав клеточной популяции по флюоресценции и оптическим характеристикам клеток. Определяется абсолютное и относительное число клеток разных популяций и субпопуляций. Лимфоцитотоксический тест основан на способности мышиных моноклональных антител класса Ig. M и Ig. G и комплемента оказывать цитотоксическое воздействие на соответствующую субпопуляцию лимфоцитов, что выявляется с помощью красителя. Применение: для обследования ВИЧ-инфицированных; в диагностике заболеваний, обусловленных нарушени -ем иммунитета, а также за контролем иммунотерапии.

Иммунологические маркеры 1 Антинуклеарные антитела Диагностическая значимость • LE-клетки СКВ, РА, хронический актив- ный гепатит, с-м Шегрена • антинуклеарные факторы Аутоиммунные заболевания, заболевания легких, мембра- нозная нефропатия и др. 2. антитела к нативной ДНК СКВ (характерны для волча- 3. антитела к экстрагируе- ночного нефрита). мым ядерным антигенам: • антитела к Sm - антигену СКВ (высоко специфичны) • антитела к рибонуклео- СКВ, смешанное заболевание протеиду соединительной ткани • антитела к антигенам Ro/SS С-м Шегрена (70%), -A и La/SS-B СКВ, СД, ПМ и др.

Иммунологические маркеры 4. Антицентромерные антитела СКВ, ССД, ДМ, ПМ. 5. Антитела к гистонам: • at к гистонам Н 1 и Н 2 В СКВ (60%) • at к гистонам Н 2 А, Н 2 В, Н 3, Н 4 Лекарственный волчаночный синдром 6. Антитела к антигенам: • Pm-1 ССД + миозит, ДМ • Scl-70 (ДНК-топоизомеразе 1) ССД (25 -30%) • Jo-1 (гистидил - т. РНК-синтетаза), Кu CCД + миозит и рубонуклеопротеиду. 7. Антитела к антигенам ядрышек: • РНК-полимеразе-1 • фибриллину ССД

Иммунологические маркеры 8. Антитела к разным типам клеток и компонентам цитоплазмы: • антитела к нейронам СКВ с поражением ЦНС • антитела к Р-белку рибосом СКВ с поражением ЦНС и кожи 9. Антифосфолипидные антитела: • антитела к кардиолипину СКВ, Антифосфолипидный • волчаночный антикоагулянт синдром 10. Аутоантитела, выявляемые при системных васкулитах: Гранулематоз Вегенера, а) антитела к цитоплазме микроскопический нейтрофилов (АНЦА): полиартериит, идиопатический гломерулонефрит с «полулуниями» - БПГН

Иммунологические маркеры • антитела к протеазе 3 Гранулематоз Вегенера (диффузное цитоплазматическое (90%) свечение) первичный • антитела к миелопероксидазе быстропрогрессирующий (перинуклеарное свечение) гломерулонефрит первичный б) Антитела к базальной мембране быстропрогрессирующий почечных клубочков гломерулонефрит, с-м Гудпасчера (85%). РА, СКВ, с-м Шегрена, ССД, ПМ/ДМ, СЗСТ 11. Ревматоидные факторы: Ig. A-нефропатия аутоантитела Ig. G, Ig. M, инфекции (бактериальный Ig. A классов к Fc-фрагменту Ig. G эндокардит) первичный билиарный цирроз печени

Иммунологические маркеры 12. Антитела к стрептококку группы А: • антитела к стрептолизину-О Острая ревматическая (АСЛ-О) лихорадка (у 2/3 больных), • антитела к ДНК-азе В Острый гломерулонефрит (у 50% больных) 13. Комплемент: • С 3 (С 3 а) • С 4 (С 4 а) СКВ, РА • фактора Ва 14. Криоглобулины: Клинические проявления: I, III - типов кожный васкулит, пурпура, гломерулонефрит, белок Бенс-Джонса нейропатия, феномен Рейно.

Иммунологические маркеры 15 Циркулирующие иммунные комплексы: • Ig. A - содержащие иммунные комплексы Ig. A-нефропатия Могут входить в состав ЦИК: • НВs Ag Узелковый полиартериит • ДНК СКВ

Иммунологические маркеры • Антинуклеарные антитела (АНА) - антинуклеарный фактор, антитела к ДНК, антитела к экстрагированным ядерным антигенам, антитела к гистонам – позволяют диагностировать системные заболевания соединительной ткани. • Антинуклеарный фактор (АНФ) – антитела к цельному ядру. Это гетерогенная группа аутоантител , реагирующих с различными компонентами ядра. • Метод исследования: наиболее точный метод – иммуноферментный анализ. Скрининг на наличие АНА проводят методом радиоиммунного анализа, реакции связывания комплемента, гемагглютинации , непрямой иммунофлюоресции , иммунодиффузии, противоточного иммуноэлекторофореза. • Диагностическая значимость: определение АНА с их высокой чувствительностью (95 -98%) и антител к ДНК с их высокой специфичностью является критерием диагностики системной красной волчанки. • АНФ появляется при СКВ в течение 3 -х месяцев от начала заболевания. Однако АНФ может быть не только при СКВ, но и у пожилых, а также при употреблении лекарственных средств. Тест положителен у 30 -50% больных с ревматоидным артритом, системной склеродермией, синдромом Шегрена, полимиозитом.

АНФ • У здоровых людей титр антител к нуклеарным антигенам в сыворотке крови 1: 40 - 1: 80, клинически значимый титр 1: 160 при использовании методов непрямой иммунофлюоресценции (НИФ), при использовании скрининговых методов – ниже 1: 50. • Клиническое значение определения АНА зависит от титров антител и типа иммунофлюоресценции (типа окрашивания). Тип окрашивания при разных заболеваниях неодинаков. – Диффузное окрашивание наименее специфично и встречается чаще при СКВ, лекарственном волчаночном синдроме и других аутоиммунных заболеваниях, а также у пожилых лиц. Гомогенное или периферическое окрашивание наблюдается, когда в исследуемой сыворотке преобладают антитела к двуспиральной ДНК. Этот тип чаще встречается при СКВ. – Пятнистое или крапчатое окрашивавание обусловлено антителами к экстрагируемым ядерным антигенам и наблюдается при синдроме Шегрена , лекарственном волчаночном синдроме, смешанном заболевании соединительной ткани – синдром системного поражения соединительной ткани, проявляющийся сочетанием отдельных клинических признаков системной склеродермии, полимиозита , системной красной волчанки. – Ядрышковое или нуклеолярное окрашивание обусловлено антителами к рибонуклеопротеиду. Этот тип окрашивания характерен для системной склеродермии. – Центромерное или дискретное крапчатое окрашивание обусловлено антителами к центромере и характерно для CREST – синдрома при системной склеродермии.

АНФ • При системной красной волчанке АНА появляются в сыворотке крови у большинства больных (95%) через 3 месяца от начала заболевания. • При системной красной волчанке тест на выявление АНФ обладает высокой чувствительностью (89%) и специфичностью (98%). • Между высоким показателем титра антител и активностью заболевания нет корреляции. – Однако выявление антител к антинуклеарным антигенам служит диагностическим критерием и имеет важное прогностическое значение, так как сохранение высокого уровня антител в течение длительного времени является неблагоприятным признаком.

Антитела к ДНК • Антитела к ДНК – антитела к двуспиральной ( anti - ds DNA) и односпиральной (anti-ss DNA) ДНК. • Метод исследования: твердофазный иммуноферментный метод. • Диагностическая значимость: наличие антител к двуспиральной ДНК является диагностическим критерием системной красной волчанки. Специфичность 90%, чувствительность – 40 -75%. • Существует корреляция между активностью СКВ и уровнем anti-ds DNA в сыворотке крови, то есть позволяет оценить динамику течения заболевания. Таким образом, снижение титра антител к двуспиральной ДНК свидетельствует об эффективности терапии. Повышение титра антител может служить предиктором активности заболевания, более значимым, чем компоненеты системы комплемента С 3 и С 4. • Антитела к односпиральной ДНК в сыворотке крови выявляются при системной красной волчанке и склеродермии. Чувствительность – 38%, специфичность – 98%.

Антитела к экстрагированным ядерным антигенам в сыворотке крови • Метод исследования : двойная иммунодиффузия в агарозном геле по Ouchterlony. • Диагностическая значимость: SS - A ( Ro ) антигены – полипептиды , образующие комплексы с Ro РНК. Anti - Ro / SS - A – анти обнаруживают у 70% больных с первичным синдромом Шегрена и у 40% больных с СКВ. • SS - B ( La ) антиген – нуклеоцитоплазматический фосфопротеиновый комплекс с Ro малых ядерных РНК, являющийся транскриптором РНК- полимеразы III. Anti-La/SS-B обнаруживают у 50% больных с первичным синдромом Шегрена и у 10% больных с СКВ. • Anti - RNP -антитела обнаруживают у большинства больных системными заболеваниями соединительной ткани и у 35% больных СКВ. • Sm -антиген состоит из 5 малых ядерных РНК, ассоциированных с полипептидами. Антитела к Sm -антигену являются специфичными для СКВ и присутствуют в 30 -40% у больных с данным заболеванием и являются одним из критериев диагностики СКВ. Специфичность – 90%, чувствительность – 25 -30%. Антитела к RNP / Sm редко обнаруживают при СКВ.

Иммунологические маркеры • Антитела к гистонам : гистоны – компоненты ядра, состоящие из 3 -х субединиц. • Метод исследования: иммуноблотинг, радиоиммунный анализ, твердофазный иммуноферментный анализ. • Диагностическая значимость: антитела к гистонам являются ранними маркерами СКВ и выявляются у 65 -70% больных. • Антитела к стрептококковым антигенам – антистрептолизин -О (антитела против стрептококкового гемолизина -О – АСЛ-О), антидезоксирибонуклеаза В (Анти-ДНКаза В). • Метод исследования: готовые наборы для экспресс-диагностики. • АСЛ-О – маркер острой стрептококковой инфекции. Уровень АСЛ-О повышается к 7 -14 дню заболевания и снижается в период реконвалесценции. • Диагностическая значимость: увеличение уровня АСЛ-О наблюдается при остром постстрептококкового гломерулонефрите после перенесенной инфекции. Острый гломерулонефрит развивается в период от 1 до 4 недели после перенесенного заболевания. АСЛ-О определяется примерно в 25% случаев. На фоне антибиотикотерапии подъем уровня АСЛО может быть незначительным.

Иммунологические маркеры • Анти - ДНКаза В образуется в ответ на инфицирование стрептококком группы А верхних дыхательных путей и кожи. • Диагностическая значимость: повышение титра анти-ДНКазы В выявляют в 60% случаев острого постстрептококкового гломерулонефрита. Повышение титра анти - ДНКазы В начинается вскоре после инфицирования и достигает максимума через 6 -8 недель. Через несколько недель титр постепенно снижается, но значительно медленнее, чем титр АСЛ-О. Следует отметить, что титр постстрептококковых антител не коррелирует с активностью заболевания. • Таким образом, для острого гломерулонефрита характерно повышение титра антистрептококковых антител в сочетании со снижением компонентов комплемента (снижены С 3, С 4, С 8, СН 50). Восстановление системы компонентов комплемента происходит в течение 1 -8 недель. Сохраняющаяся протеинурия , гипокомплементемия свидетельствуют о наличии хронического гломерулонефрита (наиболее вероятен мембрано пролиферативный гломерулонефрит).

С-реактивный белок (СРБ) – белок острой фазы воспаления – состоит из 5 идентичных, нековалентно связанных кольцевых субъединиц. • Метод исследования: турбидиметрия. • Диагностическая значимость: повышение СРБ начинается в течение первых 4 часов от момента тканевого повреждения, достигает максимума через 24 -72 часов и снижается в период реконвалесценции. • Повышение уровня СРБ характерно для ревматических заболеваний (СКВ, ревматоидный артрит, васкулиты ), острых бактериальных, грибковых, паразитарных и вирусных инфекций, туберкулеза, злокачественных образований, множественной миеломы.

Антифосфолипидные антитела – антикардиолипиновые антитела, волчаночный антикоагулянт. • Антитела к фосфолипидам – гетерогенная популяция, реагирующая с отрицательно заряженными ( кардиолипин , фосфатидилсерин фосфатидилинозитол и фосфатидные кислоты) фосфолипидами , реже с нейтральными фосфолипидами и фосфолипидсвязывающими сывороточными белками ( -2 -гликопротеин 1, аннексин V , протромбин ). Причины образования аутоантител точно не установлены. • Антифосфолипидные антитела выявляются у больных с антифосфолипидным синдромом, который относится к группе ревматических заболеваний. Вторичный антифосфолипидный синдром встречается при СКВ, ревматоидном артрите, гемолитико -уремическом синдроме, HELLP-синдроме, ДВС-синдроме. • Антитела к фосфолипидам являются серологическим маркером симптомокомплекса , включающего венозные и артериальные тромбозы, акушерскую патологию (привычное невынашивание беременности), тромбоцитопению , сетчатое ливедо , гемолитическую анемию, поражение клапанов сердца, неврологические расстройства. Взаимодействие антител с фосфолипидами клеточных мембран приводит к конформационным и метаболическим изменениям в мембранах, нарушению функции клеток. Антифосфолипидные антитела могут оказывать влияние как на сосудистые, так и на клеточные и гуморальные компоненты коагуляционного каскада, приводя к нарушению нормального баланса между протромботическими и антитромботическими процессами в сторону тромбообразования.

Антифосфолипидные антитела Метод исследования: радиоиммунный анализ, иммуноферментный анализ. • Антикардиолипиновые антитела – антитела к кардиолипину ( Ig. G , Ig А , Ig. M) – основная фракция антител к фосфолипидам клеточных мембран. Диагностическая значимость: повышение уровня антикардиолипиновых антител в двух и более исследованиях, полученных с интервалом не менее 6 - ти недель является диагностическим критерием антифосфолипидного синдрома. Антикардиолипиновые антитела определяются при следующих заболеваниях: СКВ, ревматоидном артрите; васкулитах (узелковом полиартериите ), инфекциях, сердечно-сосудистой патологии (инфаркт миокарда, инсульт и т. д. ). • Волчаночный антикоагулянт – антитела ( Ig. G ) к отрицательно заряженным фосфолипидам мембран. Диагностическая значимость: повышение уровня волчаночного антикоагулянта является диагностическим критерием антифосфолпидного синдрома. Волчаночный антикоагулянт рассматривается как фактор риска у больных с тромбозами и часто обнаруживается при СКВ (34 -44% больных), у 70% больных с антифосфолипидным синдромом.

Антинейтрофильные антитела (ANCA) – гетеpогенная группа антител к цитоплазме нейтрофилов – антитела к протеиназе -3 (с- ANCA/PR 3), антитела к миелопероксидазе (p-АNCA/MPO). Метод исследования: непрямая иммунофлюоресценция, энзим- связанные иммуносоpбентные методы. Диагностическая значимость: • с-ANCA – высокоспецифичны для гранулематоза Вегенера (90%). • р-ANCA – более характерны для микроскопического полиангиита , могут обнаруживаться при аутоиммунных заболеваниях (СКВ, ревматоидный артрит, геморрагический васкулит , синдром Фелти , рецидивирующий полихондрит ), хронических воспалительных заболеваниях кишечника (язвенный колит, болезнь Крона), инфекционных болезнях (ВИЧ, эндокардит, пневмония, гепатиты, амебиаз ), онкологических заболеваниях (гипернефрома, неходжкинская лимфома, миелодисплазия). • Иногда ANCA находят у здоровых родственников больных. • Образование ANCA могут инициировать лекарственные препараты – пропилтиоурацил , гидралазин , пеницилламин , аллопуринол , сульфасалазин антибиотики, антиконвульсанты, а также – наркотики. • p-ANCA обнаруживаются при pauci-иммунном гломерулонефрите (80%).

Антинейтрофильные антитела • Протеиназа -3 нейтрофилов – нейтральная сериновая протеиназа , локализованная в азурофильных гранулах. Антитела к протеиназе-3 нейтрофилов определяются у больных гранулематозом Вегенера. Чувствительность – 30 -99%, специфичность – 98%. • Антитела к миелопероксидазе нейтрофилов обнаруживаются при васкулитах , микроскопическом полиангиите (60 -65% случаев), синдроме Чарга - Стросс (17 -20%), ревматоидном артрите, СКВ, синдроме Гудпасчера.

Антитела к базальной мембране клубочков (анти-ГБМ) Антитела к базальной мембране клубочков (анти-ГБМ) • Метод исследования : иммуноферментный анализ, непрямая иммунофлюоресценция, радиоиммунный анализ. • Диагностическая значимость: Антитела к ГБМ встречаются при синдроме Гудпасчера. Чувствительность и специфичность 90%. При иммунофлюоресценции антитела к базальной мембране дают линейное свечение иммуноглобулинов вдоль базальной мембраны клубочка. Преобладают антитела класса Ig. G , но иногда обнаруживаются Ig А - и Ig М - антитела. Эти же антитела обнаруживаются в циркуляции. Антиген является эпитопом из коллагена IV типа, обнаруженного в базальной мембране клубочков и альвеол. Антигеном для образования анти-ГБМ служит С-концевой участок 3 –цепи коллагена IV типа (антиген Гудпасчера).

Антитела к базальной мембране клубочков (анти-ГБМ) • Анти -ГБМ гломерулонефрит может быть как самостоятельным заболеванием (болезнь Гудпасчера ), так и компонентом пульмо - ренального синдрома (синдром Гудпасчера ). Клинически синдром Гудпасчера в большинстве случаев протекает как быстропрогрессирующий гломерулонефрит (БПГН). Чаще болеют мужчины. Уровень антител к ГБМ повышен более, чем в 90% случаев. Титр антител коррелирует с активностью болезни и используется для мониторинга эффективности лечения. • В 40% случаев у пациентов с БПГН ( гранулематоз Вегенера , микроскопический полиангиит ) в крови одновременно определяются анти -ГБМ антитела и ANCA. Поэтому у больных с нефритом и легочными кровотечениями следуют определять антитела к ГБМ и антинейтрофильные антитела. • Повышение уровня антител к ГБМ обнаруживается в 90 -95% случаев у больных с болезнью Гудпасчера (уровень антител выше 100 Ед. ). После лечения уровень антител к ГБМ снижается, и они могут исчезать через 3 -6 месяцев.

Иммуноглобулины • Иммунохимическое исследование не может дифференцировать различить моноклональный , олигоклональный или поликлональный характер иммуноглобулинов. Для этих целей применяют электрофорез сыворотки с иммунофиксацией или иммуноэлектрофорез. • Иммуноглобулин А – основной иммуноглобулин, присущий секреторным жидкостям. Метод исследования: радиальная иммунодиффузия, нефелометрия. Диагностическая значимость: моноклональные иммуноглобулины выявляются при миеломной болезни (Ig. A-тип), реже при лимфомах. • Миеломная болезнь в 10 -15% случаев относится к Ig. A типу. Повышение Ig. A отмечается в 50% случаев при Ig. A - нефропатии однако это неспецифический маркер заболевания.

Иммуноглобулины Иммуноглобулин G – основной иммуноглобулин крови (75%). Ig. G представлены четырьмя подклассами с преобладанием Ig. G 1. • Метод исследования: нефелометрия, турбидиметрия. • Диагностическая значимость: повышение уровня Ig. G отмечается при следующих заболеваниях: • Поликлональные Ig. G – при аутоиммунных заболеваниях (СКВ, ревматоидный артрит, синдром Шегрена), саркоидозе, хронических заболеваниях печени. • Олигоклональные Ig. G – при злокачественных новообразованиях (лимфоидные и нелимфоидные), дисгаммаглобулинемиях. • Моноклональные Ig. G – при миеломной болезни и лимфоме. Иммуноглобулин М • Метод исследования: нефелометрия. • Диагностическая значимость: поликлональные Ig М повышены при ревматоидном артрите, гипер-Ig. М-дисгаммаглобулинемии. • Моноклональные Ig М повышены при макроглобулинемии Вальденстрема , злокачественной лимфоме.

Легкие цепи иммуноглобулинов (L-цепи) – 2 типа: каппа и лямбда – образуются при катаболизме иммуноглобулинов и выводятся с мочой. Метод исследования: радиальная иммунодиффузия, нефелометрия, иммунофиксация , электрофорез. Определение проводят в крови и моче. Диагностическая значимость: присутствие моноклональных L- цепей свидетельствует о злокачественном процессе (множественная миелома , макроглобулинемия Вальденстрема ). Легкие цепи обнаруживаются при первичном амилоидозе (AL-амилоидоз). При AL - амилоидозе , в отличие от миеломной болезни, гиперпродукция каппа-цепей встречается в 2 раза реже, чем лямбда-цепей. • Легкие цепи иммуноглобулинов редко определяются при подостром бактериальном эндокардите. В этом случае белок исчезает после разрешения первичного процесса. • Повышение легких цепей иммуноглобулинов в крови и моче имеет место при нарушении функции почечных канальцев.

2 -Микроглобулин ( 2 -МГ) – низкомолекулярный белок поверхностных антигенов клеточных ядер, синтезируется всеми типами ядерных клеток, имеет гомологичную последовательность с легкой цепью трансплантационных антигенов. Это интегральная часть главного комплекса гистосовместимости антигенов I класса, присутствует во всех жидкостях организма. 2 -МГ свободно проходит через гломерулярный фильтр, 99, 8% его реабсорбируется в проксимальном канальце. Метод исследования: иммуноферментное исследование, иммунорадиометрическое исследование, радиоиммунологический анализ. Диагностическая значимость: снижение клубочковой фильтрации сопровождается с одной стороны повышением уровня 2 -МГ в крови, с другой стороны избыточной экскрецией с мочой. • Определение 2 -МГ в крови и моче используется для мониторинга лечения гемобластозов, миеломной болезни. Концентрация 2 -МГ в крови повышается при почечной недостаточности у пациентов с ХПН, в том числе находящихся на программном гемодиализе , миеломной болезни, вирусных инфекциях (СПИД, цитомегаловирус и т. п. ), аутоиммунных заболеваниях, острых лейкозах, лимфомах с поражением ЦНС, амилоидозе. Концентрация 2 -МГ в моче также повышается при диабетической нефропатии , интоксикации тяжелыми металлами (кадмий).

Амилоида А белок, сывороточный (САА) Амилоида А белок, сывороточный (САА) – белок крови, связанный с фибриллярным тканевым белком, белком амилоида. Метод исследования: радиоиммунный анализ, радиальная иммунодиффузия. Диагностическая значимость: при воспалении уровень белка повышается на три порядка. Увеличение отмечается через несколько часов после инсульта, при вторичном амилоидозе (АА-амилоидоз). Вторичный амилоидоз возникает при длительном течении ряда заболеваний: ревматоидный артрит, туберкулез, анкилозирующий спондилоартрит (болезнь Бехтерева), моногаммапатиях и т. д.

Криоглобулины (КГ) – моноклональные иммуноглобулины или иммунные комплексы, преципитирующие при температуре сыворотки ниже 37 С, а затем растворяющиеся в сыворотке при нагревании ее до 37 С. Типы криоглобулинов представлены в таблице 2. Метод исследования: иммуноэлектрофорез, иммунофиксация, иммуноблоттинг. Диагностическая значимость: криоглобулины I типа относятся к простым, которые состоят из моноклонального иммуноглобулина или легкой цепи иммуноглобулина, известного как белок Бенс-Джонса. КГ I типа встречаются при таких лимфопролиферативных заболеваниях, как миеломная болезнь, лимфома, макроглобулинемия Вальденстрема, хронический лимфолейкоз. В редких случаях криоглобулинемия может проявляться артериальни тромбозам и с дистальным некрозом кистей и стоп. Криоглобулины II и III типов часто называют смешанными. Они представляют собой иммунные комплексы, где в качестве антитела и антигена выступают иммуноглобулины. II тип криоглобулинов представляет собой поликлональный иммуноглобулин, соединенный с моноклональным. К криоглобулинам III типа относятся иммунные комплексы, образованные поликлональными иммуноглобулинами.

Криоглобулины (КГ) • Основной причиной смешанной криоглобулинемии являются хронические вирусные инфекции (вирус гепатита В, С), ревматические заболевания (СКВ, синдром Шегрена , склеродермия, РА, узелковый полиартериит , болезнь Кавасаки), саркоидоз , миеломная болезнь. При смешанной эссенциальной криоглобулинемии развивается васкулит сосудов малого и среднего калибра. • Клинически это проявляется поражением кожи в виде пурпуры, преимущественно локализующейся на нижних конечностях.

Комплемент – система белковых факторов, каскадно активирующихся в условиях внедрения в организм чужеродных агентов. Он состоит из более чем 25 белков - компонентов комплемента, которые представлены в сыворотке крови, главным образом во фракции -глобулинов. Они синтезируются преимущественно клетками печени и макрофагами. В норме компоненты комплемента неактивны. Метод исследования: гемолитическая емкость комплемента – СН 50 (гемолиз 50% эритроцитов). К эритроцитам, покрытым антителами, добавляют исследуемую сыворотку. Происходит гемолиз эритроцитов (если содержание комплемента в сыворотке снижено, то разрушение эритроцитов будет менее выражено. Диагностическая значимость: нормальная гемолитическая емкость комплемента – функциональный показатель, который свидетельствует о наличии в достаточном количестве всех компонентов классического пути активации – С 1 -С 9. Гемолитическая емкость комплемента снижается при недостатке хотя бы одного из компонентов. Генетические дефекты белков системы комплемента клинически проявляются аутоиммунными заболеваниями, рецидивирующими бактериальными и грибковыми инфекциями. Снижение комплемента имеет место при остром гломерулонефрите, мембрано -пролиферативном гломерулонефрите , СКВ, смешанной криоглобулинемии.

Комплемент При иммунокомплексных заболеваниях классический путь активации компонентов комплемента приводит к повреждению собственных клеток и тканей организма. С 1 q – компонент комплемента Метод исследования: радиальная иммунодиффузия, твердофазный иммуноферментный анализ. Диагностическая значимость: С 1 q образуется в эпителиальных клетках преимущественно в тонкой кишке, а также в легких и других тканях. С 1 q в кровотоке циркулирует около 40 часов. 50 - 75% С 1 q находится во внутрисосудистом русле. Снижение С 1 q отмечается у больных с гипогаммаглобулинемией в результате избыточного потребления С 1 q. Среди других причин следует отметить потребление комплемента вследствие образования иммунных комплексов, криоглобулинемию и другие аутоиммунные процессы, синдром гипокомплементарного уртикарного васкулита.

Комплемент С 3 – компонент комплемента Метод исследования: радиальная иммунодиффузия, нефелометрия, твердофазный иммуноферментный анализ. Диагностическая значимость: снижение С 3 выявляют у пациентов с СКВ, ревматоидными артритом, мембрано-пролиферативном гломерулонефрите. С 4 - компонент комплемента Метод исследования: радиоиммунный анализ, ракетный электрофорез, ELISA. Диагностическая значимость: частичный или полный дефицит С 4 ассоциируется с системной красной волчанкой, аутоиммунным тиреоидитом , ювенильным дерматомиозитом. Повышенное потребление комплемента происходит при криоглобулинемии, сепсисе, гломерулонефрите. Начало СКВ у пациентов с дефицитом С 4 часто раннее (в подростковом возрасте) и имеет тенденцию к менее тяжелому течению, чем у пациентов с нормальным комплементом. С 4 А является более эффективным опсонином для иммунных комплексов, что объясняет дефицит С 4 А при СКВ. С 4 d компонент комплемента маркер активации комплемента по классическому пути. Определяется при СКВ, ревматоидном артрите. Измерение уровней С 3 и С 4 в динамике позволяет судить об эффективности лечения многих аутоиммунных заболеваний, особенно СКВ. В частности, при СКВ с поражением почек, ЦНС и гемолитической анемией уровень С 3 и С 4, как правило, снижен. Использование для оценки системы комплемента продуктов его расщепления позволяет более просто и точно следить за течением болезни и является предиктором его обострения.