ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ М. Р. Карпова

ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ М. Р. Карпова

Принципы работы иммунобиологических препаратов n Всякий возбудитель инфекционного заболевания – комплекс АГ; n на возбудитель организм реагирует специфическими иммунными реакциями; n вакцины (АГ) → активный иммунный ответ → профилактика; n иммуноглобулины и лечебные сыворотки (АТ) → пассивный иммунный ответ → лечение и экстренная профилактика; n диагностические препараты (АГ или АТ) → диагностика.

Вакцины – препараты, вызывающие активный искусственный иммунитет n В качестве действующего начала в вакцинах используют: живые аттенуированные (ослабленные) состав возбудители (живые вакцины); инактивированные цельные возбудители (убитые вакцины); отдельные АГ (протективные) выделенные из возбудителей (субъединичные или химические вакцины) или полученные генно-инженерным способом (рекомбинантные вакцины); обезвреженные токсины, продуцируемые АГ микробной клеткой – анатоксины;

Получение живых вакцин n культивирование вакцинного штамма в производственных условиях (бактерийные штаммы культивируют на питательных средах, вирусные — на куриных эмбрионах или в культурах клеток); n очистка вакцинного штамма от балластных веществ (питательной среды, культуры клеток и т. д. ; n стандартизация (определение активности, доведение до рабочей концентрации, расфасовка в ампулы); n лиофилизация со стабилизатором (альбумин, сахароза с желатиной); n контроль: концентрации живых бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.

Убитые вакцины n В результате инактивации возбудители полностью теряют жизнеспособность, но сохраняют антигенные и иммуногенные свойства. Для инактивации возбудителя используют: физические (нагревание, ультрафиолетовое облучение, ионизирующая радиация); химические (формалин, спирт, фенол) методы.

Получение убитых вакцин: n культивирование вакцинного штамма; n инактивация (чаще 0, 4 % формальдегидом при 37— 40 ОС в течение 4 нед); n очистка от балластных компонентов; n добавление адъюванта; n стандартизация; n лиофилизация; n контроль: остаточной вирулентности, содержание бактерий или вирусов вакцинного штамма, остаточной влажности, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.

Адъюванты n Адъюванты (adjuvant — помощник) – вещества, повышающие иммуногенность. n Механизмы действия адъювантов: создание «депо» АГ в месте введения вакцин; воспалительная реакция, активирующая иммунокомпетентные клетки; активация процесса захвата АГ и его переработки фагоцитами. n Al(OH)3.

Анатоксины n Анатоксины – обезвреженные формалином токсины (утрачивается токсичность, но сохраняются антигенность и иммуногенность). n Получение анатоксина: культивирование токсигенного штамма (микроорганизм выделяет в среду экзотоксин); фильтрование через бактериальные фильтры; обезвреживание 0, 4 % формалином при 37— 40 ОС в течение 4 нед. ; очистка и стандартизация; добавление адъюванта. контроль: остаточной токсичности, концентрации, стерильности, безвредности, аллергенности, иммуногенности и др.

Рекомбинантные вакцины n Принцип создания: ген или гены, кодирующие протективные АГ возбудителя «встраиваются» в геном вирусов, бактерий или эукариотов. При этом, наряду с АГ хозяина нарабатывается и необходимый для получения вакцины протективный АГ. Вакцина против гепатита В состоит из HBs- АГ, полученного генно-инженерным путем (в геном дрожжевой клетки был встроен ген HBs -АГ и клетка получила способность его продуцировать).

Принцип получения вакцины против гепатита В n Культивирование рекомбинантного штамма дрожжей (со встроенным геном HBs-АГ); n выделение HBs-АГ; n очистка; n добавление адъюванта; n стандартизация; n контроль.

Классификация вакцин Группа вакцин Бактериальные вакцины Вирусные вакцины Живые БЦЖ, чумная, сибиреязвенная, Коревая, оспенная, (аттенуи- туляремийная, бруцеллезная, паротитная, полиомие- рованные) ЖКСВ-Е – сыпнотифозная, против литная (Сэбина), желтой лихорадки Ку лихорадки, гриппозная, краснухи, ветряной оспы Инактиви- Лептоспирозная, коклюшная, Гриппозная, клещевого рованные гонококковая, бруцеллезная, энцефалита, полиомие- холерная, брюшно-тифозная литная (Солка), антирабическая Анатоксины Стафилококковый, дифтерийный (АД), столбнячный (АС), АДС, АКДС Химические Сыпно-тифозная, холерная, ме- Гриппозная (субъединичные) нингококковая, против гемофиль- ной палочки, брюшнотифозная Рекомбинантные Против гепатита В

Ассоциированные вакцины n АКДС; n Вакцина против полиомиелита n вакцина против кори, паротита и краснухи.

Схема применения вакцин n Живые вакцины, как правило, применяют однократно, убитые — многократно. n При первичной вакцинации создаются граунд- иммунитет, в результате чего при повторном введении вакцины организм более активно и быстро отвечает на АГ. n Ревакцинации обеспечивают длительное поддержание иммунитета на защитном уровне. n Обязательная вакцинация – календарь прививок. n Прививки по эпидемическим показаниям проводятся группы риска.

Календарь профилактической вакцинации в России Наименование вакцины Сроки вакцинации Рекомбинантная вакцина против Новорожденные в первые 12 ч жизни; гепатита В 1 мес жизни; 6 мес. Параэнтеральная туберкулезная 4 -7 день жизни; в 7 и 14 лет при вакцина (БЦЖ) «отрицательной» реакции Манту АКДС 3 мес; 4, 5 мес; 6 мес; 18 мес; 7 лет – АДС-М; 14 лет – АДС-М; каждые 10 лет – АДС-М или АД-М. Оральная живая полиомиелитная 3 мес; 4, 5 мес; 6 мес; 18 мес; 20 мес; вакцина 14 лет. Живая коревая вакцина 12 -15 мес; 6 лет. Живая паротитная вакцина 12 -15 мес; 6 лет. Живая вакцина против краснухи 12 -15 мес; 6 лет.

Цели применения вакцин n Профилактика: чаще – плановая, но может быть и экстренная (бешенство, столбняк). n Лечение: бруцеллез, стафилококковые инфекции, гонорея, герпес, инфекции, вызванные УПМ. Аутовакцины. n Диагностика: гонорея (провокация).

Иммуноглобулины и антитоксические сыворотки состав n Действующее начало — специфические АТ. n Их можно использовать для экстренной профилактики и лечения инфекций, при которых ведущим фактором невосприимчивости является гуморальный n иммунитет. Иммунные сыворотки и иммуноглобулины АТ создают пассивный специфический иммунитет, который сохраняется при введении гомологичных сывороток до 1— 1, 5 мес и гетерологичных — до 10— 20 сут.

Сывороточные препараты Сывороточные препараты Иммунные Иммуно- сыворотки глобулины Гетеро- Гомологичные логические

Антитоксические сыворотки n Гетерологичные: гипериммунизация крупных животных (лошадей, волов, быков, коров, мулов). n Принцип получения: лошадей гипериммунизируют большими дозами АГ; на пике антителообразования у иммунных животных забирают кровь, освобождают ее от форменных элементов и фибрина; сыворотки очищают и концентрируют ферментативным способом в сочетании с диализом (метод «Диаферм» ), осаждением спиртом на холоде, хроматографией и др. ; стандартизируют по концентрации АТ (антитоксинов); контролируют: на титр специфических АТ, на протективность, реактогеность, аллергенность, стерильность.

Иммуноглобулины n Иммуноглобулины содержат меньше балластного белка и имеют более высокую концентрацию АТ. Из сыворотки выделяют чистую фракцию гаммаглобулинов. n Гетерологические иммуноглобулины получают из крови лошадей, n гомологичные – из крови вакцинированных доноров. n Иммуноглобулины вводят внутримышечно или наносят на слизистые. Иммуноглобулины, предназначенные для внутривенного введения, подвергают дополнительной обработке с целью удаления агрегатов и снижения реактогенности.

Нормальный иммуноглобулин человека n Нормальный иммуноглобулин человека — препарат, приготовленный из смеси образцов крови неиммунизированных доноров, но содержащий АТ к возбудителям банальных инфекций. n Используется для больных гипогаммаглобулинемией; n для экстренной профилактики и лечения часто встречающихся инфекций и инфекций, от возбудителей которых существует плановая вакцинация.

Правила введения гетерологических сывороточных препаратов n Осложнения: сывороточная болезнь, анафилактический шок. n Для профилактики анафилактического шока обязательна постановка внутрикожной пробы. n При отрицательной кожной пробе через 30 - 60 мин внутримышечно вводят назначенную дозу сыворотки. n При положительной кожной пробе препарат применяют только по жизненным показаниям. Для десенсибилизации сыворотку вводят дробно (Метод Безредка).

Пассивная иммунизация Болезни Видовая Назначение принадлежность АТ Дифтерия Человек, лошадь Для профилактики и лечения Столбняк Человек, лошадь Для профилактики и лечения Газовая гангрена Лошадь Экстренная профилактика Ботулизм Лошадь, человек Экстренная профилактика и лечение Стафилококковая Человек Лечение инфекция Лептоспироз Вол Лечение тяжелых форм Сибирская язва Лошадь Экстренная профилактика и лечение Укус ядовитой змеи или Лошадь Экстренная профилактика и скорпиона лечение

Пассивная иммунизация Болезни Видовая Назначение принадлежность АТ Бешенство Человек, лошадь Экстренная профилактика Грипп Человек Экстренная профилактика и лечение тяжелых форм Корь, коклюш, Нормальный Экстренная профилактика и полиомиелит, грипп, иммуноглобулин лечение генер. формы менинго- человека кокковой инфекции Гепатит А Нормальный иммуно- Профилактика (путешествие) глобулин человека Гепатит В Человек Экстренная профилактика Клещевой энцефалит Человек Экстренная профилактика и лечение Ветряная оспа Человек Лечение при иммунологи- (опоясывающий лишай) ческой недостаточности

Диагностические препараты АТ-содержащие АГ-содержащие Диагностические Диагностикумы сыворотки Б А Эритроцитарные К Агглютинирующие диагностикумы Т Е Р Преципитирующие Антигены И О Ф Люминисцентные Аллергены А Г И

Диагностические сыворотки n Применяются для выявления АГ возбудителей в клиническом материале и для определения вида или типа возбудителя (серологическая идентификация микроорганизмов). n Диагностические сыворотки: видовые (видоспецифические), групповые состав (группоспецифические), типовые (типоспецифические). n Устранить групповую агглютинацию можно, удалив из сыворотки АТ против общих АГ (добавление к сыворотке микробов, дающих групповую агглютинацию). После центрифугирования в сыворотке остаются только типовые АТ (метод АТ адсорбции сывороток по Кастеллани).

Получение диагностических сывороток n Иммунизация животных (чаще кроликов) живыми или убитыми АТ микроорганизмами; n из крови получают сыворотку, при необходимости адсорбируют и лиофилизируют; n контролируют стерильность, специфичность, высоту титра.

Получение люминисцирующих сывороток n РИФ – метод экспресс- диагностики для определения возбудителей в материале от больного. n Люминесцентные сыворотки готовят из специфических иммунных сывороток, из которых извлекают иммуноглобулиновую фракцию. n Полученные глобулины обрабатывают флюорохромами. АТ

Антигенсодержащие препараты n Диагностикумы, эритроцитарные диагностикумы, антигены, аллергены. n Диагностикумы – это взвесь убитых возбудителей или их отдельных компонентов, чаще всего в физиологическом растворе. Применяют для определения специфических АТ в серологических реакциях. n Получение: культивирование микроорганизмов, инактивация, очистка, контроль на стерильность и специфическую активность, при необходимости лиофилизация. АГ n Антигены готовят путем обработки бактерий температурой, УЗ, спиртом, кислотой, многократным замораживанием о оттаиванием и т. д.

Антигенсодержащие препараты n Эритроцитарные диагностикумы: АГ (диагностикум) соединяют с эритроцитами. Контроль: отсутствие спонтанной агглютинации, специфическую активность с соответствующими иммунными сыворотками. РНГА. n Аллергены при одних заболеваниях (туберкулез, бруцеллез) представляют собой фильтраты бульонных культур, при других (туляремия) – взвесь убитых нагреванием бактерий. АГ n Используют в кожно-аллергических пробах. n Туберкулин, бруцеллин, тулярин, антраксин, токсоплазмин. n Туберкулин – белковая вытяжка из культуры туберкулезной палочки в физиологическом растворе с твином в качестве консерванта и фенолом – стабилизатора. Вводят внутрикожно (реакция Манту).

Бактериофаги n Бактериофаги – это иммуно- биологические препараты, состоящие из вирусов бактерий. n Получение: инфицирование фагом выращенной в производственных условиях культуры бактерий, чувствительной к данному фагу; фильтрация, очистка, стандартизация, при необходимости лиофилизация, контроль на специфичность и титр фага. n Бактериофаги выпускают в виде таблеток, в жидком виде.

Применение бактериофагов n Бактериофаги применяют для профилактики и лечения ряда бактериальных инфекций. Препарат назначают перорально, а в случаях раневых инфекций – орошают раны. n Фаги используют в диагностике бактериальных инфекций с целью их фаготипирования. По спектру действия выделяют поливалентные (лизирующие родственные бактерии, в том числе близких видов), моновалентные (лизирующие бактерии одного вида) и типоспецифические.

Эубиотики n Эубиотики состоят из живых микроорганизмов – представителей микрофлоры человека. Они используются для профилактики и лечения дисбактериозов. n Эубиотики получают путем выращивания бактерий на питательных средах, концентрирования, стандартизации и лиофилизации. n «Колибактерин» , «бифидумбактерин» , «лактобактерин» , «бификол» и др.

УДАЧИ В НОВОМ ГОДУ!