ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ ИБП 1 ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИБП 2 ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ

ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ (ИБП) 1. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИБП 2. ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ ИБП

ИБП l Все средства, применяемые для воздействия на иммунную систему, известны как иммунобиологические препараты К ним относят разнообразные по природе и происхождению вещества

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ИБП 1. ИБП, содержащие антигены: l l Диагностикумы Аллергены Токсины 2. ИБП, содержащие антитела: l Диагностические сыворотки l 3. Диагностические бактериофаги

ДИАГНОСТИКУМЫ l Активное начало - микробные антигены l Применят в серологическом методе диагностике для поиска антител инфекционного происхождения в сыворотке крови больного

МИКРОБНЫЕ ДИАГНОСТИКУМЫ: l ЖИВЫЕ - живые культуры микроорганизмов l УБИТЫЕ - убитые нагреванием или химическими веществами культуры микроорганизмов (спирт этиловый, фенол) l ХИМИЧЕСКИЕ – антигены, извлечённые из микробной клетки и закреплённые на носителях (частицы латекса, угля и др. ) l ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ - эритроциты, нагруженные известными антигенами или антителами

АЛЛЕРГЕНЫ l Активное начало – антигены микробных клеток l Представляют собой убитые и разрушенные клетки возбудителей, отдельные фракции клеток, биологически активные вещества микроорганизмов Примеры: бруцеллин, антраксин, тулярин, туберкулин -

АЛЛЕРГЕНЫ (продолжение) l - Используют в аллергическом методе диагностики инфекционных заболеваний для: выявления лиц инфицированных или больных, для отбора лиц для вакцинации и ревакцинации l Ставят кожные пробы l Выявляют в организме человека гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ)

МИКРОБНЫЕ ЭКЗОТОКСИНЫ l Получают из токсигенных культур микроорганизмов путём их выращивания на специальных жидких питательных средах l Единицы измерения - DLM l Из экзотоксинов получают анатоксины (вакцинные препараты)

ЭНДОТОКСИН l Получают из грамотрицательных культур микроорганизмов l Обладает пирогенными свойствами l Используют для создания лабораторных тест-систем Пример: LAL- тест, контроль

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Активное начало - антитела l Используют для выявления микробных антигенов l Применяют в культуральных и собственно-иммунном методах диагностики l Получают путём иммунизации кроликов: культурами микроорганизмов, отдельными микробными антигенами, микробными токсинами -

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ, ИХ РАЗНОВИДНОСТИ: l l l l Агглютинирующие, Преципитирующие, Гемолитические, Антитоксические, Антиглобулиновые, Люминисцентные Антибактериальные, Противовирусные и др.

АГГЛЮТИНИРУЮЩИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Получают путём иммунизации кроликов живыми или убитыми культурами микроорганизмов l Монорецепторные сыворотки получают из комплексных методом истощения по Кастеллани l Титр агглютинирующей сыворотки – наибольшее её разведение, при котором наблюдается реакция агглютинации l Применяют в реакции агглютинации (РА) для идентификации микроорганизмов Бактериологический метод диагностики l

ПРЕЦИПИТИРУЮЩИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Получают путём иммунизации кроликов растворёнными антигенами (экстрактами антигенов) или токсинами l Титр преципитирующей сыворотки – наибольшее её разведение, при котором наблюдается явление преципитации (обычно титры 1 : 100 000; 1 : 1000 000) l Применяют для постановки реакции преципитации (РП) с целью выявления микробных антигенов Собственно- иммунный метод диагностики l

ГЕМОЛИТИЧЕСКИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Получают путём иммунизации кроликов эритроцитами барана l Содержат антитела - гемолизины l Титр гемолитической сыворотки – максимальное её разведение, которое в присутствии комплемента вызывает лизис 3% взвеси эритроцитов барана l Используют в реакции иммунного гемолиза (РИГ) для титрования комплемента, гемолитической сыворотки, антигена (перед постановкой основного опыта РСК)

АНТИТОКСИЧЕСКИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Получают путём иммунизации лабораторных животных анатоксинами или микробными экзотоксинами l Титруют в реакции флоккуляции (РФ) или в реакции нейтрализации (РН) токсина антитоксической сывороткой на лабораторных животных (мышах) l Единицы измерения - АЕ/мл l Применяют для обнаружения и определения типа микробных экзотоксинов Собственно- иммунный метод диагностики, бактериологический l

ЛЮМИНИСЦЕНТНЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ l Гамма-глобулиновую фракцию сыворотки крови химически связывают с флюорохромами (вещества, которые светятся при попадании УФЛ) l Применяют для постановки реакции иммунной флюоресценции (РИФ) Примеры: видовые и антиглобулиновые сыворотки, меченные флюорохромами l l Собственно-иммунный, бактериологический, серологический методы

АНТИГЛОБУЛИНОВЫЕ ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ СЫВОРОТКИ (АГС) l Получают путём иммунизации лабораторных животных глобулинами крови человека или кролика l Содержат антитела к глобулинам крови человека или кролика (антитела) l Применяют для постановки: непрямой РИФ, ИФА (вариант поиска антител), реакции Кумбса (антиглобулиновый тест) Применяют в серологическом и собственно-иммунном методах диагностики l

ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ БАКТЕРИОФАГИ l Бактериофаги - вирусы бактерий l Диагностические бактериофаги используют: Для идентификации бактерий Бактериологический метод диагностики 1. 2. Для индикации возбудителя в патологическом материале или в объектах внешней среды. Когда не удаётся обнаружить возбудитель, то о его присутствии судят по наличию бактериофагов 3. Для определения источника и путей распространения инфекции Используют диагностические типовые бактериофаги. Бактериологический метод диагностики

ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЕ ИБП 1. l 2. ИБП, содержащие антигены: Вакцины и анатоксины l ИБП, содержащие антитела: Сывороточные препараты (сыворотки, иммуноглобулины) 3. Лечебные бактериофаги 4. Микробы-антагонисты (эубиотики, пробиотики) 5. Интерфероны

ИММУНОТЕРАПИЯ И ИММУНОПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ l Иммунотерапия — введение с лечебными целями иммунных препаратов (например, AT, ИФН, цитокинов и др. ) l Иммунопрофилактика — введение иммунных препаратов с профилактической целью – для предотвращения развития инфекционных заболеваний (вакцины, сыворотки)

ИММУНОТЕРАПИЯ И ИММУНОПРОФИЛАКТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (продолжение) l Первая вакцина против натуральной оспы была создана английским врачом Дженнером за 100 лет до открытия вирусов (XVIII в. ) l Научные основы иммунопрофилактики были заложены исследованиями Луи Пастера, открывшего феномен аттенуации (ослабления вирулентных свойств) микробов и создавшего вакцины против сибирской язвы и бешенства (за 7 лет до открытия вирусов)

ЭФФЕКТЫ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ l - Иммунобиологические препараты могут: создавать активный или пассивный иммунитет, оказывать специфическое или неспецифическое воздействие l Активный иммунитет - ИБП индуцируют иммунные реакции с образованием защитных факторов (антител, ЦТЛ и др. ) l Активный иммунитет создают вакцины

ЭФФЕКТЫ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (продолжение) l Пассивный иммунитет – введение в организм ИБП, содержащих уже готовые защитные факторы (антитела, цитокины и др. ). l Пассивный иммунитет создают сывороточные препараты плазма, сыворотка, иммуноглобулины -

ЭФФЕКТЫ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ (продолжение) l Специфическое действие Проявляют препараты, обеспечивающие защиту от конкретного возбудителя (например, противокоревая вакцина, столбнячный анатоксин) l Неспецифическое действие Оказывают препараты, неспецифически стимулирующие функции иммунокомпетентных клеток. Такой эффект оказывают иммуномодуляторы, многие биостимуляторы и другие препараты

ВАКЦИНЫ l Вакцины — иммунобиологические препараты, предназначенные для активной иммунопрофилактики l Создают искусственный активный иммунитет l Вакцинация признана ВОЗ идеальным методом профилактики инфекционных заболеваний человека

ВАКЦИНЫ l ЖИВЫЕ l ИНАКТИВИРОВАННЫЕ (убитые): КОРПУСКУЛЯРНЫЕ - целая микробная клетка, вирусная частица; ХИМИЧЕСКИЕ (компонентные, субъединичные) – отдельные протективные антигены возбудителя - l АНАТОКСИНЫ (молекулярные) l ГЕННОИНЖЕНЕРНЫЕ (рекомбинантные) l СИНТЕТИЧЕСКИЕ

ВАКЦИНЫ (продолжение) l l МОНОВАКЦИНЫ – содержат антигены одного вида возбудителя (АД; АС и др. ) АССОЦИИРОВАННЫЕ (комплексные) – содержат антигены нескольких видов возбудителей (АКДС и др. ). l АУТОВАКЦИНЫ – готовят из представителей нормальной микрофлоры конкретного человека l Вакцины бывают: бактериальные, вирусные, риккетсиозные, лептоспирозные -

ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ l ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ — препараты из аттенуированных или генетически изменённых патогенных микроорганизмов, а также близкородственных микробов, способных создавать активный иммунитет l Все живые вакцины относят к группе корпускулярных вакцин

ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ (продолжение) l Достоинство живых вакцин: - Полностью сохранённый набор антигенов возбудителя, Создание длительного напряжённого иммунитета l Недостатки живых вакцин: - Риск развития манифестной инфекции в результате снижения аттенуации вакцинного штамма. Подобные явления типичны для противовирусных вакцин (например, живая полиомиелитная вакцина в редких случаях может вызвать полиомиелит вплоть до развития поражения спинного мозга и паралича)

ЖИВЫЕ ВАКЦИНЫ (продолжение) l АТТЕНУИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ - готовят из культур, утративших вирулентные свойства, но сохранивших иммуногенные свойства Вакцины сибирской язвы, бруцеллёза, брюшного тифа, противополиомиелитная вакцина Сэйбина, вакцины против гриппа, кори, краснухи, паротита и др. l ДИВЕРГЕНТНЫЕ ВАКЦИНЫ – используют микроорганизмы, находящиеся в близком родстве с возбудителями инфекционных заболеваний Вакцина против натуральной оспы – из вируса коровьей оспы; БЦЖ – из микобактерий бычьего туберкулёза

МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ АТТЕНУИРОВАННЫХ ШТАММОВ l - l Культивирование вирулентных штаммов при неблагоприятных условиях: повышенная температура, УФЛ, ионизирующая радиация, мутагены и др. ). Это ведёт к утрате вирулентных свойств Культивирование возбудителей в организме животных Это ведёт к снижение вирулентных свойств для человека

МЕТОДЫ ПОЛУЧЕНИЯ АТТЕНУИРОВАННЫХ ШТАММОВ (продолжение) l Селекция штаммов, утративших вирулентные свойства в естественных условиях l Использование генноинженерных методов, направленных на снижение вирулентных свойств возбудителя

ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ (УБИТЫЕ) l ДОСТОИНСТВА: Менее реактогенные – дают меньший процент осложнений по сравнению с живыми вакцинами l НЕДОСТАТКИ: Обладают менее выраженными иммуногенными свойствами, поэтому требуют многократной иммунизации l КОРПКУСКУЛЯРНЫЕ ВАКЦИНЫ Взвесь целых микробных клеток или частиц, обработанных физическими или химическими методами (нагреванием, УФЛ, спиртом, формалином и др. ) Противочумная, антирабическая вакцины и др.

ИНАКТИВИРОВАННЫЕ ВАКЦИНЫ (УБИТЫЕ) (продолжение) l - l ХИМИЧЕСКИЕ (КОМПОНЕНТНЫЕ, ИЛИ СУБЪЕДИНИЧНЫЕ) С помощью физико-химических методов из микроорганизмов извлекают протективные антигены и сорбируют на гидроокиси алюминия (адьювант) Вакцины против брюшного тифа, сибирской язвы, гриппа и др. АДЬЮВАНТ - усиливает иммунный ответ, создаёт депо антигена в организме и достаточный по времени антигенный стимул

ГЕННОИНЖЕНЕРНЫЕ ВАКЦИНЫ l Создают с помощью методов генной инженерии l Способы создания генноинженерных вакцин: 1. Клонирование генов, отвечающих за синтез протективных антигенов в геноме микроорганизмовпродуцетов (дрожжей, кишечной палочки, псевдомонад ) с последующим выделением антигена Вакцина против гепатита В 2. Искусственное удаление генов вирулентности и использование модифицированных микроорганизмов в качестве вакцин Противочумная вакцина, сибиреязвенная вакцина

СИНТЕТИЧЕСКИЕ ВАКЦИНЫ l l Компоненты таких вакцин: Синтетический антиген (аналог природного), Высокомолекулярный носитель (винилпирролидон или декстран), Адъювант, повышающий иммуногенность вакцин Практически не дают осложнений

СИНТЕТИЧЕСКИЕ ВАКЦИНЫ (продолжение) l Недостатки: Синтетитеский антиген и природный не всегда идентины, поэтому низкая иммуногенная активность l Достоинства: Введение синтетических вакцин в комбинации с адъювантами и иммуномодуляторами перспективно у лиц с нарушениями иммунного статуса

В эксперименте показано, что иммунизация организма РНК и ДНК многих вирусов, малярийного плазмодия или возбудителя туберкулёза приводит к развитию стойкой невосприимчивости к заражению

АНАТОКСИНЫ l Получают из микробных экзотоксинов при их обработке теплом и формалином l Единицы измерения – ИЕ/мл l Титруют в реакции флоккуляции l Анатоксины применяют в сочетании с адьювантами l Используют в качестве вакцинных препаратов l Создают искусственный активный антитоксический иммунитет l Примеры: АКДС, АД, АС

СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ ВАКЦИН l l - Живые вакцины: накожно (скарификацией), интраназально перорально Анатоксины: подкожно Инактивированные корпускулярные вакцины: - парентерально l

ВАКЦИНАЦИЯ l Плановая (обязательная) вакцинация l Вакцинация по эпидемиологическим показаниям: персонал инфекционных отделений, в случае эпидемий, перед поездкой в эндемичные районы -

СЫВОРОТОЧНЫЕ ПРЕПАРАТЫ l Сыворотки и иммуноглобулины l В качестве активного начала содержат антитела l Создают пассивный иммунитет, непродолжительный (2 – 6 недели) l Применяют в случае экстренной профилактики и с лечебной целью l Вводятся парентерально

СЫВОРОТОЧНЫЕ ПРЕПАРАТЫ l - ГОМОЛОГИЧНЫЕ ПРЕПАРАТЫ (донорские): получают путём иммунизации доноров вакцинами, дают небольшой процент осложнений Против кори, вирусных гепатитов, столбняка ГЕТЕРОЛОГИЧНЫЕ ПРЕПАРАТЫ (животного происхождения, чужеродные): иммунизацией лошадей, реактогенные препараты, могут вызывать аллергические реакции Против столбняка, дифтерии

ИММУНОГЛОБУЛИНЫ l Иммуноглобулины получают осаждением из иммунной сыворотки крови, что освобождает их от балластных компонентов. Затем препараты очищают и концентрируют l Применяют для лечения и профилактики инфекций (кори, клещевого энцефалита, стафилококковых инфекций, столбняка и др. )

ОСЛОЖНЕНИЯ ПОСЛЕ ВВЕДЕНИЯ ВАКЦИН И СЫВОРОТОЧНЫХ ПРЕПАРАТОВ l Связанные с нарушением техники введения препарата и несоблюдением правил асептики (нагноения, абсцессы, подкожные инфильтраты) l Аллергические реакции (сывороточная болезнь, анафилактический шок) l Осложнения из-за индивидуальной непереносимости препарата (прежде всего со стороны ЦНС)

МИКРОБЫ АНТАГОНИСТЫ l Представители нормальной микрофлоры l Получают путём выращивания культур микроорганизмов на питательных средах, далее эти культуры лиофильно высушивают l Подавляют рост и размножение патогенной и гнилостной микрофлоры l Применяют для лечения дисбиозов и детоксикации организма l Моно- и комплексные препараты (бифидумбактерин, лактобактерин, колибактерин; бификол, линекс, биовестин и др. )

ЛЕЧЕБНЫЕ БАКТЕРИОФАГИ l Бактериофаги – вирусы бактерий l Лизируют клетки возбудителя l С лечебной целью применяют вирулентные бактериофаги l l Применяют для лечения и профилактики инфекционных заболеваний Стафилококковые инфекции, брюшной тиф, дизентерия и др. Выпускают в жидкой и таблетированной форме

ЛЕЧЕБНЫЕ БАКТЕРИОФАГИ l - Препараты бактериофагов вводят: путём аппликаций, орошений, полосканий, перорально, внутрикожно, подкожно, внутримышечно

ИНТЕРФЕРОНЫ (ИФН) l Низкомолекулярные пептиды l Обладают противовирусной, противоопухолевой и иммуномоделирующей активностью, действует как цитокины l В лечебной практике используют донорские и генноинженерные препараты интерферонов

ИНТЕРФЕРОНЫ (ИФН) (продолжение) l α-ИФН (лейкоцитарный) - синтезируют лейкоциты периферической крови, противовирусная активность – нарушает адсорбцию вируса и репликацию вирусного генома l β-ИФН (фибробластный) - синтезируют фибробласты, противоопухолевая активность l γ-ИФН (иммунный) - продукт стимулированных Т-лимфоцитов, NK-клеток и (возможно) макрофагов иммуномоделирующая активность -

РЕАКЦИИ ИММУНИТЕТА l l Реакции между антигенами и антителами получили название реакций иммунитета Они протекают in vivo и in vitro

СВОЙСТВА ИММУННЫХ РЕАКЦИЙ l Строгая специфичность – способность l Чувствительность – минимальное l Протекают с образованием иммунных комплексов (без образования третьего антигена реагировать с гомологичными антителами количество антигена или антител, выявляемых в данной реакции продукта). Эти реакции не приводят к химическим изменениям антигенов и антител

ИММУННЫЕ РЕАКЦИИ ПРОТЕКАЮТ В ДВЕ ФАЗЫ: СПЕЦИФИЧЕСКАЯ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ФАЗА: l Протекает в течение нескольких секунд l Невидима глазом l Не зависит от наличия электролитов, р. Н среды, температуры, дозы антигена и антител l В эту фазу антигенные детерминанты соединяются с активными центрами антител l Имеют значение электростатические силы, водородные связи l Химических превращений антигена не происходит

НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ ФАЗА: l Имеет визуальный эффект, если протекает in vitro l Более длительная по времени, чем специфическая фаза, от нескольких минут до суток l Зависит от температуры, р. Н среды, присутствия электролитов, дозы антигена и антител l Зависит от агрегатного состояния антигена (корпускулярный или растворимый)

Иммунные реакции используют в двух направлениях: l l l для поиска неизвестных антигенов для поиска неизвестных антител Иммунные реакции можно использовать в разных методах диагностики инфекционных заболеваний

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ МЕТОДЫ бактериологический, вирусологический, микологический l Идентификация чистой культуры возбудителя с помощью известных иммунных диагностических сывороток l Изучение антигенной структуры возбудителя (серологические свойства микроба)

СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ l Поиск антител инфекционного происхождения в сыворотке крови больного с помощью известных микробных диагностикумов l Доказательства инфекционной природы антител: выявление антител в диагностически значимых количествах, метод парных сывороток, выявление Ig. M -

АЛЛЕРГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ l Выявление ГЗТ (вариант клеточного иммунного ответа) с помощью аллергенов

СОБСТВЕННО – ИММУННЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ l Выявление микробных антигенов в патматериале с помощью иммунных сывороток