Иммуноаффинная хроматография Хроматография — физико-химический

Иммуноаффинная хроматография.

• Хроматография - физико-химический метод разделения и анализа смесей веществ, а также изучения их свойств. Основан на распределении веществ между двумя фазами — неподвижной (твердая фаза или жидкость, связанная на инертном носителе) и подвижной (газовая или жидкая фаза, элюент).

• История. Хроматография была открыта в 1903 году, автор ее – Цвет М. С. Он проводил изыскания в области физиологии и биохимии растений, и, пропуская растительные экстракты через колонку с карбонатом кальция, смог получить в чистом виде хлорофиллы a, b, c и ряд ксантофиллов.

• Классификация (по агрегатному состоянию фаз): Газовая Газо-жидкостная Газо-твёрдофазная Сверхкритическая флюидная Жидкостно-жидкостная Жидкостно-твёрдофазная Жидкостно-гелевая

• Классификация (по механизму взаимодействия): Распределительная хроматография Ионообменная хроматография Адсорбционная хроматография Эксклюзионная хроматография Гель-хроматография Осадочная хроматография Адсорбционно-комплексообразовательная хроматография

• Принцип действия Неподвижная фаза (сорбент) удерживается фильтрами, подвижная фаза – растворитель (элюент) движется вдоль сорбента. Скорость движения веществ подвижной фазы зависят непосредственно от сил межмолекулярного взаимодействия между ними и молекулами сорбента. Для оценки данных строится хроматограмма. Хроматограмма кривая, изображающая зависимость концентрации соединений, выходящих из колонки с потоком подвижной фазы, от времени с момента начала разделения

• Аффинная хроматография – род лигандной хроматографии, в основе которой лежит биологическое взаимодействие между молекулами (фермент - субстрат/ингибитор/кофермент; рецептор – медиатор и др. ). Особым её типом является иммуноаффинная хроматография, в основе которой лежит взаимодействие антиген – антитело. Основным достоинством является высокая специфичность.

• Применение Применяется, как правило, для определения веществ либо для их очистки. - Анализ: -прямой (высокомолекулярные соединения); (диагностические тесты, тесты на беременность) -конкурентный (низкомолекулярные соединения); (различного рода метаболиты, в т. ч. тесты на на наркотики).

Спасибо за внимание