ИММУННАЯ СИСТЕМА ОРГАНИЗМА ПРИЛОЖЕНИЕ К ЛЕКЦИИ 2

ИММУННАЯ СИСТЕМА ОРГАНИЗМА (ПРИЛОЖЕНИЕ К ЛЕКЦИИ 2)

Популяции ИКК Тип клеток Свойства Т-лимфоциты: Участвуют в клеточных иммунных реакциях Распознают АГ в комплексе с молекулой Т-хелперы HLA II; стимулируют дифференцировку В-клеток и цитотоксических Тлимфоцитов; активируют макрофаги Цитотоксические Распознают АГ в комплексе с молекулой HLA I; Т-лимфоциты уничтожают клетки, экспрессирующие (ЦТЛ) АГ Ингибируют активность ИКК Т-супрессоры 2

В-лимфоциты К-клетки Распознают Аг, дифференцируются в плазматические клетки; могут участвовать в представлении Аг и уничтожении клеток трансплантатов после фиксации на их поверхности молекул Ig. G Проявляют антителозависимую цитотоксичность 3

Макрофаги Поглощают и убивают микроорганизмы и опухолевые клетки; «перерабатывают» Аг и представляют его ИКК; Дендритные клетки секретируют ИЛ-1 Представление Аг 4

Алгоритм взаимодействия лимфоцитов с органами и тканями организма Место Название процесса Сущность процесса Костный мозг, тимус Лимфопоэз Дифференцировка лимфоцита от стволовой кроветворной клетки до зрелого неиммунного лимфоцита Периферические лимфоидные органы Иммуногенез Дифференцировка неиммунного лимфоцита в иммунные (эффекторные лимфоциты) Ткань, где присутствует причинный антиген Эффекторное звено иммунного ответа Организация деструкции антигена 5

2 Т- (ТCR) и В-клеточный (BKR) рецепторы 6

Т – клеточный рецептор (TCR) является белковым гетеродимером, главная часть которого у одного типа рецептора представлена полипептидными цепями α и β, а у другого γ и δ - с молекулярными массами соответственно 27 и 32, 35 и 45 к. Д. 7

В отличие от антител Т-клеточные рецепторы имеют только один связывающий участок, который может узнавать и связывать фрагменты чужеродных белков. Такие фрагменты презентируются белками ГКГС, локализованными на поверхности клеток 8

9

Схема комплекса Т-клеточного рецептора (TCR), антигена (Ag), МНС II и CD 8 Комплекс αβ-Т-клеточного рецептора человека (зеленый и серый), геммаглютининового пептида (антигена, желтый) и желтый главного комплекса гистосовместимости класса II HLA-DR 4 (синий и пурпурный) 10

11

24 Рецепторы и антигены В-лимфоцита к эритроцитам мыши ME-R EBV-R к вирусам Эпстайн-Барр для связывания АГ Y HLA-DR В-лимфоцит Fc к Fc фрагменту Ig CR 1 CR 2 к комплементу

Методы иммунодиагностики 13

Иммунологическая реакция –это взаимодействие антигена с антителом, которое определяется специфическим взаимодействием активных центров антитела (паратопа) с эпитопами антигенов.

Общая классификация: 1. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ реакции между антигенами (Ag) и антителами (Ig) in vitro 2. КЛЕТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ с участием иммунокомпетентных клеток 3. АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ ПРОБЫ выявление гиперчувствительности 15

Фазы серологических реакций: Ø специфическая фаза – фаза взаимодействия, в которой происходит комплементарное соединение активных центров антител и эпитопов антигена. Длится несколько секунд или минут. Ø неспецифическая фаза – фаза проявления, характеризующаяся внешними признаками образования иммунных комплексов. Длится от нескольких минут до нескольких часов.

Серологические реакции Цели постановки • для идентификации антигена – – в патологическом материале (экспрессдиагностика) в чистой культуре • • • серологическая идентификация (определение вида) серотипирование (определение серовара) для выявления антител (Ig) – – наличия количества (нарастание титра – метод «парных сывороток» ) 17

Серологические реакции Общая классификация 1. Простые (2 -х компонентные: Ag + Ig) Ú РА (с корпускулярным антигеном) Ú РП (с растворимым антигеном) 2. Сложные(3 -х компонентные: Ag + Ig + C) 3. С использованием метки 18

Агглютинацией называется склеивание микроорганизмов, эритроцитов или других клеток при действии на них специфических AT в присутствии электролита. 19

Реакция агглютинации с корпускулярным антигеном ü Прямая 1. Пластинчатая 2. Объемная 20

Пластинчатая реакция агглютинации 21

Объёмная (развернутая) реакция агглютинации 22

Реакция агглютинации • Непрямая 1. Латекс-агглютинация 2. Ко-агглютинация 3. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) 23

Латекс-агглютинация антителами частиц латекса, на поверхности которых адсорбирован антиген или гаптен. Ат(латекс) + Аг(образец) = Ат-Аг (агглютинация) 24

Реакция коагглютинации Она основана на способности белка А золотистого стафилококка неспецифически связывать Fc-фрагменты Ig. Стафилококки играют роль частиц с сорбированными на их поверхности AT. При внесении в систему соответствующих Аг с ними взаимодействуют Fab-фрагменты AT и образуются агрегаты из стафилококков, диагностических AT и исследуемых микробных Аг 25

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) 26

Реакция преципитации С растворимым антигеном ð Объемная ð В геле (иммунодиффузия) 1. Простая (по Манчини) 2. Двойная или встречная (по Оухтерлони) ð Реакция нейтрализации токсина антитоксином (РН) ð Другие варианты 1. Иммуноэлектрофорез 2. Иммуноблотинг 27

Реакция кольцепреципитации 28

Реакция радиальной иммунодиффузии

30

• Реакция флоккуляции (по Рамону) появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) в пробирке при реакции токсин – антитоксин или анатоксин – антитоксин. • Ее применяют для определения активности антитоксической сыворотки или анатоксина. 31

Иммуноэлектрофорез 32

СЛОЖНЫЕ СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ 3 Х компонентные: Ag+Ig+C 1. Видимые 1. Иммобилизация 2. Иммунного прилипания 3. Лизиса (в т. ч. гемолиза) 2. Невидимые 1. Реакция связывания комплемента (РСК) 33

РЕАКЦИИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТКИ üРИФ реакция иммунофлюоресценции üИФА иммуноферментный анализ üРИА радиоиммунный анализ üИЭМ иммунная электронная микроскопия 34

35

36

Серологические реакции см. учебник С. А. Павловича с. 383 -407 37