Лекция Мбф_Гуморальное звено иммунитета.pptx
- Количество слайдов: 33
ГУМОРАЛЬНОЕ ЗВЕНО ИММУНИТЕТА. АНТИТЕЛА.
Определение Иммуноглобулины (Ig) – это гликопротеины, продуцируемые Влимфоцитами в ответ на иммуноген. Альбумин Глобулины
Функции иммуноглобулинов Связывание антител с антигенами Приводит к инактивации антигенов Блокирование сайтов связывания вирусов и бактерий Агглютинация нерастворимых бактерии антигенов Преципитация растворимых антигенов Активация системы комплемента вирус антигены бактерия Усиление фагоцитоза Фагоцит Лизис бактериальной клетки
Функции иммуноглобулинов Активация комплемента Антителаагонисты Естественный лиганд Антителаантагонисты Антителакоагонисты Fc рецептор Цитокиновый рецептор Рецептор Проведение сигнала Интернализация рецепторов Гибель
Суперсемейство иммуноглобулинов
Строение молекулы антитела
Строение молекулы антитела ИММУНОГЛОБУЛИН Восстановление, обработка кислотой Разделение цепей ИММУНОГЛОБУЛИН ПАПАИН Получение 2 -х Fab-фрагментов ИММУНОГЛОБУЛИН ПЕПСИН Получение (Fab)2 -фрагмента
Строение молекулы антитела
Структура молекулы антитела
Функции шарнирного участка Шарнир
Строение вариабельного участка Петли, связывающие антиген Антиген-связывающий сайт Тяжелая цепь Антиген VH-домены Легкая цепь VL-домен Дисульфидная связь Вариабельный домен Константный домен
Строение антиген-связывающего участка
Изотипы, аллотипы, идиотипы ИЗОТИПЫ АЛЛОТИПЫ ИДИОТИПЫ
Изотипы антител Ig. D Ig. G Ig. E Ig. A J-цепь Ig. M
Изотипы антител % Время полужизни
Свойства изотипов иммуноглобулинов Свойство Ig. G 1 Ig. G 2 Ig. G 3 Ig. G 4 Ig. A 1 Ig. A 2 Ig. M Ig. E Ig. D 150000 150000600000 15000060000 900000 190000 150000 Тяжелая цепь γ 1 γ 2 γ 3 γ 4 α 1 α 2 μ ε δ Время полужизни 23 23 8 23 6 6 5 2, 5 3 Активация комплемента по классическому пути + +/- ++ - - - +++ - - Пересекает плацентарный барьер + +/- + + - - - Есть на мембране зрелых В-клеток - - - + - + ++ +/- ++ + - - ? - - Проходит через слизистые - - ++ ++ + - - Вызывает дегрануляцию тучных клеток - - - - + - MW Имеет Fcрецепторы на фагоцитах
Транспорт иммуноглобулинов Транспорт Ig. G Транспорт Ig. A Секреторный компонент J-цепь ПЛАЦЕНТА Клетка эпителия ЖКТ новорожденного Клетка эпителия ЖКТ взрослого
Роль секреторного участка Ig. A
Взаимодействие антител с антигеном KA= [Ab≡Ag] / [Ab] * [Ag] Зона эквивалентности Избыток антигена Избыток антител
Валентность и авидность антитела Валентность МОНО БИ ПОЛИ Авидность Низкая Высокая Очень высокая
Виды фрагментов антител
Виды фрагментов антител
Получение моноклональных антител Гибридомная технология Активированная В-клетка Миеломная клетка (клетка плазмацитомы) Слияние клеток с помощью ПЭГ, культивирование клеток на среде HAT Гибридома
Преципитация и агглютинация Турбидиметрия Детекция поглощения Детекция светорассеяния Нефелометрия
Радиальная иммунодиффузия по Манчини Диаметр Гель содержит антитела Концентрация антигена
Радиоиммунный анализ КОНТРОЛЬ Измерение радиоактивности в преципитате Введение меченого антигена Добавление специфических антител ПРОБА Преципитация комплекса Аг-АТ с помощью дополнительных антител Радиоактивность ниже, и она зависит от количества антигена, который необходимо было обнаружить Введение меченого антигена и сыворотки, содержащей определяемый антиген Конкуренция за сайты связывания Добавление преципитирующих антител
Иммуноферментный анализ Добавление АТ, конъюгированных со стрептавидином Антитела к антигену на твердой фазе Инкубация с сывороткой, отмывание от несвязавшихся антигенов Добавление биотина, конъюгированного с пероксидазой Изменение окраски субстрата
Иммуноферментный анализ
Иммунохемилюминесцентный метод Формирование конъюгата Сорбирование конъюгата на твердой фазе Выделение конъюгата Отмывка Добавление люминола, измерение люминесценции
Иммунофлюоресценция Антитела к Аг Анти-антитела меченые флюорохромом Формирование комплекса Аг-АТ-а. АТ
Реакция связывания комплемента • Принцип метода Исследуемая сыворотка смешивается с раствором антител – Добавляется комплемент – Добавляется индикаторная система (эритроциты, покрытые антителами – В случае отсутствия АГ происходит лизис эритроцитов Нет антигена Антиген Аг Аг Сыворотка пациента
Химерные АТ Мурономаб Инфликсимаб Гуманизированные АТ Ритуксиксимаб Снижение иммуногенности Панитумумаб
Каталитические антитела - абзимы
Лекция Мбф_Гуморальное звено иммунитета.pptx