Группа веществ, изолируемых из биологического материала методом перегонкой с водяным паром. «Летучие яды»
Особенности токсического действия "Неэлектролиты" - многочисленные соединения разного химического строения, но с близкими физико-химическими свойствами, Характерным для неэлектролитов является: неполярность; в воде не растворяются или образуют водные растворы, непроводящие электрический ток, т. е. не диссоциируют в воде; хорошо растворимые в липидах вещества; при нормальных условиях представляющие собой летучие жидкости или газы, инертные в химическом отношении.
продолжение выделяющиеся в неизменном виде или претерпевают медленные превращения в организме, характерен летальный синтез, приводящие к изменению токсичности, оказывают неспецифическое действие, результатом которого в основном является угнетение функций, присущих здоровому организму. Такой вид действия называется наркотическим, физическим. Развивается состояние, напоминающее опьянение, анальгезия, потеря сознания, подавление сенсорных и автономных рефлексов, кома, миорелаксация, угнетение дыхания и сердечной деятельности.
H. Meyera (1899), Overtona (1896), K. Meyera (1937), Н. В. Лазарева (1938) установили, что наркотическая активность веществ прямо пропорциональна величине их коэффициента распределения в среде масло/вода (степень гидрофобности молекулы). Например, р. Км/в спирты – 10 -3 – 10 -2 Эфиры - 10 -2 – 10 -1 Хлорированные углеводороды - 10 5
Этиленгликоль. Метаболизм ОН СН 2 ОН ОН СН 2 СНО ОН СН 2 СООН ГЛИКОЛЬАЛЬДЕГИД ОНС ГЛИКОЛЕВАЯ КИСЛОТА СНО НОС ГЛИОКСАЛЬ НСООН МУРАВЬИНАЯ КИСЛОТА СООН ГЛИОКСИЛОВАЯ КИСЛОТА НООС СООН СО 2 + Н 2 О ЩАВЕЛЕВАЯ КИСЛОТА (ООС СОО)Са 2
Газожидкостная хроматография
Распределение смеси веществ К = Cж/ Сг, Сж - концентрация вещества в жидкой фазе, Сг – концентрация вещества в газовой фазе КА , КВ – коэффициент распределения веществ А и В, так что КА < КВ А В
Качественные параметры хроматографического пика t - абсолютное время удерживания, время, измеренное от момента ввода пробы до момента выхода максимальной концентрации определяемого вещества (максимума пика) (мин, с); L - абсолютное расстояние удерживания, расстояние, измеренное от момента ввода пробы до момента выхода максимальной концентрации определяемого вещества (мм, см); V - абсолютный объем удерживания, объем газа- носителя прошедшего через колонку от момента ввода пробы до момента выхода максимальной концентрации определяемого вещества (мл); V=Fоб. t Fоб - постоянная объемная скорости газа-носителя
Определение абсолютных качественных параметров газожидкостной хроматографии, абсолютных качественных параметров пиков Пик воздуха Момент ввода пробы L 1 L 2
Определение относительных качественных параметров пиков Стандарт (внешний) исследуется отдельно в аналогичных условиях, (tст Vст ) Lст - абсолютные параметры удерживания стандарта (tx. Vx) Lx (tотн. Vотн)Lотн = --------(tст. Vст )Lст
Количественные параметры газожидкостной хроматографии, количественные параметры пика. Расчет содержания вещества в пробе методом абсолютной калибровки S – площадь хроматографического пика вещества, h- высота хроматографического пика вещества, h (S ) hх hх (Sх) Sх Сх C мг/мл, %, ‰
Расчет содержания вещества в пробе методом внутреннего стандарта h (S)- высота (площадь) пика вещества, hст (S)- высота (площадь) пика внутреннего стандарта h ---hст hх Sх --Sст S --Sст hх ---hст hcт Sх S cт Сх C мг/мл, %, ‰
Изолирование этиленгликоля из биологических жидкостей (метод Гуляевой) К 10 мл крови прибавляют 15 мл ацетона, смесь тщательно перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют. Водно-ацетоновый слой декантируют в стаканчик, куда прибавляют 0, 5 г активированного угля. Взвесь фильтруют в выпарительную чашку, при этом фильтр промывают несколькими порциями ацетона, которые присоединяют к основному фильтру. Затем фильтрат выпаривают под вентилятором в токе горячего воздуха (температура 60 0 С) до исчезновения запаха ацетона. Полученное водное извлечение переносят в мерную пробирку, и после измерения объема (1, 0 -1, 5 мл) исследуют хроматографическими методом.
Изолирование этиленгликоля из биологической ткани (метод Гуляевой) К 20 г мелко измельченной ткани печени, почки или стенки мочевого пузыря, тщательно перемешивают, прибавляют 20 мл ацетона и настаивают в течение 30 мин. Затем ацетоновое извлечение сливают с объекта исследования, а последний вновь настаивают 30 мин. с новой порцией ацетона (20 мл). Водно-ацетоновые извлечения фильтруют в стаканчик, куда прибавляют 0, 5 г активированного угля. Взвесь фильтруют в выпарительную чашку, при этом фильтр промывают несколькими порциями ацетона, которые присоединяют к основному фильтрату, затем фильтрат выпаривают приблизительно до объема 1, 0 – 1, 5 мл. К остатку прибавляют 15 мл ацетона и, после перемешивания, 10 – 15 г безводного сульфата натрия. Далее поступают как при изолировании этиленгликоля из биологических жидкостей.
Метод Т. Н. Гуляевой, изолирование и газохроматографическое определение этиленгликоля (идентификация и количественное определение). Внутренний стандарт – пропиленгликоль или н-бутанол hх hст этиленгликоль 5, 17 мин пропиленгликоль 8 мин (бутанол 4 мин)
Газохроматографическое определение кислоты уксусной (метод Кахановского Ф. Н. ) 25 г стенки желудка измельчали, помещали в колбу вместимостью 50 мл с притертой пробкой и заливали 30 мл 96 % этилового спирта, подкисленного 1, 5 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое колбы тщательно взбалтывали и оставляли на 1 ч. К смеси добавляли 15 мл концентрированной серной кислоты, взбалтывали, быстро подсоединяли колбу к холодильнику Либиха, перегоняли на кипящей водяной бане до получения 25 мл дистиллята, который собирали в охлажденную мерную коблу. 1 мкл полученного дистиллята вводили в инжектор хроматографа. На хроматограмме отмечали два пика с абсолютным временем удерживания 95 с (этанол) и 125 с (этилацетат).
Метод Ф. Н. Кахановского, изолирование и газохроматографическое определение кислоты уксусной, идентификация Этанол 95 с Этилацетат 125 с
Модификация Пшеничникова Н. М. (Курган) В пенициллиновый флакон помещали по 0, 5 г внутренних органов, тщательно измельченных до 1 -2 мм, добавляли 0, 5 мл 20 % раствора фосфор-вольфрамовой кислоты, 0, 5 мл этанола, 0, 5 мл концентрированной серной кислоты, 0, 2 мл внутреннего стандарта (1 % водного раствора дихлорэтана) и 1 г прокаленного сульфата натрия. Флакон плотно закрывали резиновой пробкой, помещали в металлический фиксатор для обеспечения герметичности. Интенсивно встряхивали и помещали на перемешивающее устройство на 20 мин. При комнатной температуре. В течение этого времени происходит полное выделение имеющейся в образце УК. После этого фиксатор нагревали в течение 15 мин в термостате при 100 0 С или на кипящей водяной бане, затем охлаждали при комнатной температуре. После установления во флаконе равновесной парогазовой фазы с помощью подогретого шприца отбирали 0, 5 мл парогазовой фазы и вводили в дозатор хроматографа.
Метод Ф. Н. Кахановского, газохроматографическое определение кислоты уксусной, количественное определение hx hст Этанол 95 с Этилацетат 125 с Н-бутанол 143 с стандарт (дихлоэтан 137 с, по методу Н. М. Пшеничникова )
Скачать презентацию Группа веществ изолируемых из биологического материала методом перегонкой
летучие яды К..pptx