Григорий Иосифович Барам доктор химических наук 7 -913

Григорий Иосифович Барам доктор химических наук +7 -913 -910 -90 -82 gbaram@mail. ru

Эко. Нова'12 ВЭЖХ для ВСЕХ 4. Неподвижные фазы Новосибирск – 2012

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Механическая прочность Мягкие фазы на основе целлюлозы, декстрана, полиакриламида, полистирола и др. для колоночной ЖХ низкого давления (Рмакс<0. 2 МПа) Полужесткие фазы на основе поливинилового спирта, полистирола для ВЭЖХ на коротких колонках (Рмакс до 10 МПа) Жесткие фазы на основе окисей кремния, алюминия, циркония, стекла (Рмакс до 150 МПа). 4 -01

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Форма частиц - сферическая - неправильная (скругленная) 4 -02

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Площадь поверхности непористая фаза "открытая" колонка поверхностно-пористая (pellicular) фаза Zorbax® (Du. Pont) объемно-пористая фаза 4 -03

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ (Экспериментальные) Перфузионная фаза Монолитная колонка Поликапиллярная колонка Поливолоконная колонка Y. Saito et al. Anal. Chem. , 2003, 75, 5525– 5531 R. K. Marcus et al. J. Chromatogr. A, 2003, 986, 17– 31. 4 -04

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Распределение частиц и пор по размерам 4 -05

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Распределение частиц по размерам 20 мкм Диасфер-250 -СТ (5 мкм) 8 мкм Золотистый стафилококк 4 -06

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Бактерия Вирус 5 мкм 0 2 4 мкм Масштаб 4 -07

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Колонка как фильтр 4 -08

Эко. Нова'12 Адсорбенты для ВЭЖХ H+ x. Si. O y. H O Na 2 Si. O 3 + H 2 O 2 2 H+ x. Si. O y. H O Si(OC 2 H 5)4 + H 2 O 2 2 Силанольные группы Синтез объемно-пористого силикагеля конц. щелочь t=150 -1000 C 4 -09

Эко. Нова'12 Адсорбенты для ВЭЖХ Объемно-пористый силикагель Типичный силикагель для ВЭЖХ концентрация силанолов: 7 -8 мкмоль/м 2 размер частиц: 3, 5 1, 7, 10 диаметр пор: 10 2 нм удельная поверхность: 300 м 2/г удельный объем пор: 0. 8 мл/г Nucleosil 100 -5, Li. Chrosorb Si 60, Li. Chrospher Si 100, Zorbax BP-Sil и т. д. Плотность силанолов: 1 группа на 0. 2 нм 2 4 -10

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Архитектура зерна адсорбента Технология Zorbax® 4 -11

Эко. Нова'12 Core-Shell sorbents Sanchez C. , Farkas T. The Latest Trend in LC Analysis: UHPLC Core-Shell Particles. American Lab. , 2012, V. 44, No. 3, pp. 11 -14. Brownlee Superficially Porous Particle (SPP) 4 -12

Эко. Нова'12 Core-Shell sorbents Sanchez C. , Farkas T. The Latest Trend in LC Analysis: UHPLC Core-Shell Particles. American Lab. , 2012, V. 44, No. 3, pp. 11 -14. 4 -13

Эко. Нова'12 Адсорбенты для UPLC™ Уменьшение растворимости силикагеля Технология Waters BEH: Bridged Ethyl-siloxane Hybrid 4 -14

Эко. Нова'12 Адсорбенты для UPLC™ Уменьшение растворимости силикагеля Технология Akzo. Nobel 4 -15

Эко. Нова'12 Адсорбенты для ВЭЖХ Синтез привитых мономерных фаз Присоединение функциональной группы R Инактивация оставшихся силанолов ("endcapping") 4 -16

Эко. Нова'12 Адсорбенты для ВЭЖХ Синтез привитых полимерных фаз Bidentate C 18 (Zorbax Extend-C 18) 4 -17

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Привитые обращенные фазы на основе силикагеля 4 -18

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Привитые обращенные фазы на основе силикагеля Какие фазы использовать? Результаты опроса журнала LC-GC (2009 г. ) С 18 С 4 С 1/С 2 Phenyl Cyano Другие - 81% - 6% - 3% - 1% - 5% - 2% - 3% 4 -19

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Обращенные фазы на основе силикагеля Nucleosil 100 -5 C 18; Nucleosil 100 -5 C 18 PAH; Nucleosil 100 -5 C 18 AB Li. Chrosorb RP 18; Li. Chrospher RP 8 Zorbax ODS Количество ковалентно связанного углерода: 2 -3. 5 мкмоль/м 2 6 -10% для фаз С 8 12 -17% для фаз С 18 18 -25% для полимерных фаз Предельная емкость фаз С 18 для веществ с M=100 -500 составляет 200 мг вещества на 1 г адсорбента Все фазы стабильны в растворах с р. Н 2 8 (3 6) 4 -20

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Обращенная фаза С 18 Радикалы –(СН 2)17 -СН 3 на поверхности силикагеля 4 -21

Эко. Нова'12 Фаза С 18 под "микроскопом Коллапс обращенной фазы Малое содержание воды - Вода Высокое содержание воды - Метанол 4 -22

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Привитые фазы на основе силикагеля 4 -23

Эко. Нова'12 Фаза С 18 под "микроскопом 4 -24

Эко. Нова'12 Фаза С 18 под "микроскопом 4 -25

Эко. Нова'12 СРАВНЕНИЕ ОБРАЩЕННЫХ ФАЗ Хроматографический способ Состав тестовой смеси: • урацил - маркер свободного объема колонки; • пиридин (P) - основной аналит; • N, N-диметиланилин (N) - основной аналит; • фенол (L) - кислый аналит; • 4 -бутилбензойная кислота (B) - кислый аналит; • толуол (T) - нейтральный аналит. Элюент: СH 3 CN - KH 2 PO 4 (р. Н 3. 2) = (65: 35). Величина k' вычислялась для всех пиков как k'=(t. R - t 0)/t 0, где t. R - время удерживания вещества, t 0 - время удерживания урацила ("мертвое" время) 4 -26

Эко. Нова'12 СРАВНЕНИЕ ОБРАЩЕННЫХ ФАЗ Хроматографический способ P - пиридин, N - N, N-диметиланилин, L - фенол, В - 4 -бутилбензойная кислота, Т - толуол 4 -27

Эко. Нова'12 Phenomenex versus Waters 4 -28

Эко. Нова'12 Waters versus Phenomenex Shoikhet K. , Engelhard H. A Photometric Flow Measurement Method for Characterisation of HPLC Pump. Chromatographia, 1994, No. 7/8, V. 38, pp. 421 -430. 4 -29

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ "Несиликагельные" обращенные фазы Графит Полистирол 4 -30

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Полистирол как обращенная фаза Хроматография белков при р. Н 13 Фаза устойчива в диапазоне р. Н 1 -13 4 -31

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Полистирол как обращенная фаза Колонки: 2 х75 мм Поток: 100 мкл/мин 1 - Бромид-анион 2 - Уридин 3 - Кофеин 4 - м-Нитроанилин 5 - п-Нитроанилин 4 -32

Эко. Нова'12 Неподвижные фазы для ВЭЖХ Ионообменники на основе полистирола DNAPac PA-100 (Dionex Co. , США) 4 -33