Грибы.

Грибы. План: 1. КЛАССИФИКАЦИЯ 2. МОРФЛОГИЯ 3. РАЗМНОЖЕНИЕ ГРИБОВ 4. КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА 5. ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИКОЗЫ 6. ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ МИКОЗАХ 7. ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ МИКОЗОВ 8. ЛЕЧЕНИЕ 9. профилактика

КЛАССИФИКАЦИЯ: МОРФЛОГИЯ: Надцарство – ЭУКАРИОТЫ - Клетка – ГИФА по строению относится к низшим ЭУКАРИОТАМ Царство – ГРИБЫ (MYCOTA или FUNGI) (растениям, животным). Она содержит контурированное ядро Отделы: ГРИБЫ-СЛИЗНЕВИКИ (Myxomycota) или несколько ядер, систему НАСТОЯЩИЕ ГРИБЫ (Eumycota) внутриклеточных мембран - митохондрии, лизосомы, аппарат Классы : ( в зависимости от типа размножения Гольджи, эндоплазматический – полового или бесполого): ретикулум. В цитоплазме - вакуоли, включения 1. Chytridiomycetes липидов, гликогена, волютина, кристаллов, пигментов. 2. Zygomycetes -Имеется прочная оболочка 3. Ascomycetes (клеточная стенка), содержащая НИЗШИЕ целлюлозу, хитин. Гифы имеют форму трубочек, округлую, 4. Basidomycetes яйцевидную. Зрелые и старые клетки 5. Deuteroimycetes (Fungi становятся грушевидными, imperfecti) – амебовидными, веретеновидными. несовершенные -По химическому составу оболочка грибов существенно отличается от клеточной стенки бактерий. Она не -существует много тысяч видов имеет муреина, поэтому и не грибов, из них патогенными для чувствительна к лизоциму. человека являются примерно -Маркерным полимером для около 100 (около 15 родов) большинства является хитин. Заболевания, вызываемые грибами называются МИКОЗЫ.

Структура клетки гриба

ТЕЛО ГРИБА - МИЦЕЛИЙ. 1. ИСТИННЫЙ мицелий – система изогнутых трубок с перегородками (трубки, наполненные клетками) 2. ЛОЖНЫЙ мицелий (псевдомицелий) - состоит из отдельных клеток, не имеет общей оболочки 3. ВОЗДУШНЫЙ (репродуктивный) мицелий -несет споры 4. СУБСТРАТНЫЙ (вегетативный) мицелий служит для закрепления и питания гриба.

Образование гифы Прорастание спор, образование ростовых трубок

Candida albicans

Микрофотография Candida albicans 1 - псевдомицелий 2 - бластоспоры 3 - хламидоспоры (толстая КС)

ДРОЖЖЕВАЯ ФОРМА Candida

Микрофотография конидиеносцев Aspergillus flavus Конидиеносцы имеют характерное строение в виде носика лейки

конидии хламидоспоры Бластоспоры спорангий

РАЗМНОЖЕНИЕ ГРИБОВ -грибы размножаются бесполым и половым путем 2. ПОЛОВЫЕ СПОРЫ Исключение составляют образуются из половых дейтеромицеты (несовершенные) клеток после их созревания и -размножение всегда связано со слияния. Споры в спорой, которая попадает в субстратном и том же субстрат и прорастает в гифу, из которой затем образуется мицелий мицелии образуются и -форма спор и процессы их бесполые, и половые споры. образования разнообразны –это -ЗИГОСПОРЫ – мужская и служит критерием определения женская гаметы одинаковые вида, рода БЕСПОЛЫЕ (вегетативные) споры: -ООСПОРЫ – мужская и – АРТРОСПОРЫ – образуются женская гаметы различны при расчленении -АСКОСПОРЫ – образуются родительского мицелия на фрагменты внтри мешков (аска) – БЛАСТОСПОРЫ – почкование -БАЗИДОСПОРЫ – гифов отшнуровывание споры от – ХЛАМИДОСПОРЫ - клетка в булавовидной клетки - толстой оболочке базидии. – ЭНДОСПОРЫ (спорангиоспоры) – внутри сумок (спорангиев) – ЭКЗОСПОРЫ (конидии)

КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА: -бесхлорофильные, -Ферментативная активность гетеротрофные аэробные или грибов достаточно выражена факультативно-аэробные (содержат ферменты всех микроорганизмы классов). (За счет -Большинство не требовательно к пит. средам (многие грибы растут ферментативной активности на минимальных по составу грибы могут быть одной из ингридеинтах питательных причин микробиологической средах), но есть микробы которым коррозии различных нужны специальные питательные среды (Сабуро, Чапека, сусло - сооружений, приборов, агар, жидкое сусло), аппаратов) -на жидких средах - пленка Часть ферментов на плотных – молодые колонии (гидролазы) –являются бесцветные, а позже в период факторами патогенности. спорообразования – появляется пигментированные -Отдельные виды образуют -чаще мезофилы (20 -45 С), но сильные токсины выращивают на двух чашках при (афлотоксины, температуре 25 С и 37 С, так как это фаллотоксины, мускарин и позволяет сразу выявить возможный диморфизм. т. д. )

РОСТ ГРИБОВ РОДА CANDIDA НА АГАРЕ НИКЕРСОНА

Рост на среде Сабуро

ПО ЛОКАЛИЗАЦИИ ПОРАЖЕНИЙ: -СИСТЕМНЫЕ (глубокие, -ПОДКОЖНЫЕ (субкутанные) микозы- субкутанные) поражение кожи, подкожной клетчатки, респираторные ) -поражение фасций и костей (споротрихоз, хромомикоз, (споротрихоз, хромомикоз, внутренних органов с мадуромикоз). мадуромикоз). вовлечением в процесс Обычно возникают при попадании в рану при различных тканей (кокцидиодоз, травме гистоплазмоз, криптококкоз, Основные поражения первично локализованы в подкожных тканях, реже бластомикозы) наблюдают фунгемию и вовлечение в Заражение при вдыхании спор из инфекционный процесс мышечных тканей, костей и суставов. воздуха Заболевания хронические; характерно Первичный очаг в легких. образование узелков, отеков и язв; форм с самоограниченным течением неизвестны Респираторные поражения или редки. протекают легко и проходят -ЭПИДЕРМОМИКОЗЫ – поражение спонтанно. эпидермиса, волос и ногтей (дерматмикозы) (дерматмикозы) Реже встречаются Заболевание возникает после контакта с активным очагом поражения. Возбудители диссеменированные формы с размножаются в коже и её придатках; вовлечением любых внутренних Заболевания не представляют угрозу для органов (глубокие микозы). жизни, часто спонтанно ограничиваются и Прогноз в нелеченных случаях создают преимущественно косметические проблемы. неблагополучный. Инвазии живых тканей наблюдают редко. В Возбудители – сапрофиты, для редких случаях возникает молниеносное поражение прилежащих тканей, особенно у большинства характерна лиц с иммунодефицитами эндемичность

-ПОВЕРХНОСТНЫЕ (сапрофитии) – поражение волос и поверхностного рогового слоя эпидермиса (кератомикоз, разноцветный и черный лишай, трихоспороз и др. ) Имунные реакции на Аг возбудителя отсуствуют Создают чисто косметические проблемы и не представляют опасности для жизни Часто не требуют специального лечения.

Различают тримицетизм, типа 1. токсическое ( основных микотоксикоз – отравления поражения человека грибами: грибами и их токсинами); 2. сенсибилизирующее (микогенная аллергия); 3. инфекционное (развитие микозов)

Молочница.

ОППОРТУНИСТИЧЕСКИЕ МИКОЗЫ. Возбудители - сапрофиты, Следующие реакции проникающие из внешней обуславливают проявления среды (например, Aspergillus, клинических симптомов: Mucor) или эндогенно Развитие гиперчувствительности (например, Candida). к Аг Обладают ограниченной возбудителя и продуктам, их содержащих врожденной патогенностью. Микозы возникают при Явления интоксикации – при употреблении пищевых проникновении возбудителей продуктов, контаминированных в организм лиц, страдающих ядовитыми грибами, иммунодефицитами (СПИД), образующими токсичные либо при попадании в метаболиты (митотоксикозы), а области с нарушенной также при употреблении в пищу местной резистентностью ядовитых грибов (мицетизм). (ожоги). Поражение кожи и её придатков Продолжительность болезни Поражение подкожной клетчатки иногда (но не всегда) зависит (иногда поражение мышц и суставов) от сроков развития сенсибилизации у пациентов. Гриппоподобные поражения Хронические поражения Выделяют местные и дыхательных путей диссеменированные, а также Лихорадка неизвестного генеза острые , подострые и хронические формы Менингиальные симптомы инфекционного процесса.

ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ МИКОЗАХ: ГУМОРАЛЬНЫЕ РЕАКЦИИ. -Грибковые клетки -большинство микозов сопровождается образованием сильно иммуногенны высоких титр Ат, в определенной (проявляется в виде степени их тип и нарастание концентрации отражают статус и клеточных и прогрессирование инфекции. гуморальных реакций). – Из- за обилия Аг субстанций у грибковой клетки (кандид-78) и КЛЕТОЧНЫЕ РЕАКЦИИ. их способности происходить из содержимого цитоплазмы, -у зараженных лиц можно полагать, что при одной и развивается ГЗТ той же инфекции содержание Ат варьирует в качественном и (исключая количественном отношении. поверхностные микозы – При развитии инфекции - нет контакта м/у Аг и образуются Ат классов Ig. M, Ig. G, Ig. A; при наличии респираторной ИС), обнаруживаемый аллергии может увеличиваться уже ч/з 10 -14 сут. титр Ig. E. -Экспериментрально показана -активизируется защитная роль сыворотки при фагоцитоз. пассивном переносе, однако она скорее относительна, чем абсолютна и вряд ли может быть единственным механизмом, определяющим элиминацию возбудителя.

Лабораторная диагностика Клиническая картина микозов весьма полиморфна, поэтому во всех случаях диагноз должен быть подтвержден лабораторными методами исследования, успех которых во многом зависит от правильного взятия патологического материала.

Отделяемое со слизистых оболочек для посева берут ватным тампоном, который затем помещают в пробирку с 2 мл питательной среды (сусло Сабуро). Для микроскопии соскобы налетов берут ложечкой Фолькмана или предметным стеклом.

ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ МЕТОДЫ: Окраска метанаминовым серебряным -микроскопические. по Гомори-обработка гистологических Экспресс-метод (1 -2 ч). Окраска препаратов хромовой кислотой + специальными красителями, т. к. краситель; (клетки грибов темно-серые простая окраска гематоксилин - или черные) эозином часто не выявляет клетки – гриба. Окраска по Гридли - обработка По Граму хроматом лейкофуксина и фуксиновым альдегидом и метаниловым желтым (грибы розово- Обработка 10% едким кали (КОН)- пурпурные на желтом фоне) используется для того, чтобы лучше увидеть структуру гриба во фрагментах кожи и её придатков Окрашивание перйодной кислотой и (ногти, волосы), отделяемом из реактивом Шиффа (по Мак. Манусу) - влагалища. КОН разрушает кератин (клетки окрашиваются в насыщенно - клеток, оставляя неизмененными розовый или красный цвет) клетки грибов. Иммунофлюоресценция Окраска нитрозином или тушью- позволяет вывить Препарат раздавленная капля- капсулированные клетки (плесневые грибы Cryptococcus neoformans. Окраска по Романовскому - Гимзе или Райту –) мазки крови

ВЫДЕЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЯ (от нескольких дней до нескольких недель) – 2 типа сред : селективные и неселективные. НЕСЕЛЕКТИВНЫЕ: Сабуро, МПА, -ОПРЕДЕЛЕНИЕ НК – новый метод SABHI- агар, Чапека, дрожжевой идентификации патогенных агар, сусло-агар грибов для определения системных микозов (бласто- , крипто-, кокцидиодомикозов, и СЕЛЕКТИВНЫЕ: неселективные + гистолпазмоза). а/б для подавления роста плесневых грибов. -Проводят экстракцию РНК из культуры и вносят -СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ (ЛАТЕКС- одноцепочечные молекулы ДНК, АГГЛЮТИНАЦИЯ, РСК, ИФА) меченные флюоресцином ( при наличии в культуре одного из 4 -х -АЛЛЕРГИЧЕСКИЕ (кожные указанных возбудителей пробы) происходит гибридизация соответствующей ДНК с РНК - патогена с образованием легко обнаруживаемого комплекса. -Основное достоинство - это возможность применения на ранних сроках (5 сут) в культурах, содержащих мицелиальные и дрожжевые формы.

ЛЕЧЕНИЕ: Препараты, действующие на различные этапы жизнедеятельности и метаболизма грибов. 1. ПОЛИЕНОВЫЕ АНТИБИОТИКИ (амфотерицин В, нистатин, леворин )- связываются с эргостеролом в клеточных мембранах грибов повреждение мембраны, потеря клеточных макромолекул и ионов с развитием необратимых нарушений. 2. АЗОЛЫ ( имидазолы и триазолы) –наиболее известны клотримазол, миканазол и кетоназол. -блокируют активность ферментов, участвующих в деметилировании ланостерола, что нарушает синтез эргостерола. 3. « 5 -ФТОРЦИТОЗИН» (5 ФЦ) – антиметаболит, нуклеоидный аналог, ингибирующий синтез НК. (терапия системных дрожжевых микозов). 4. ЙОДИД КАЛИЯ- запивают молоком (при лечении споротрихоза) 5. ГРИЗИОФУЛЬВИН- а/б 6. ТОЛНАФТАТ-местно 7. ГАЛОПРОГИН-местно 8. ПИМАРЦИН - местно , в первую очередь при кератитах, вызванных паразитическими грибами 9. АЛЛИЛАМИНЫ (нафтифин, тербинафин)-ингибиру. т скваленэпоксидазу и нарушают синтез эргостерола. 10. МОРФОЛИНЫ (аморфолин) - ингибируют синтез эргостерола за счет блокирования фекостерина в эпистерин.

Спасибо за внимание!