Гонорея. Методы диагностики
Гонорея ( «гонос» – семя, «реос» – истечение) –инфекционное заболевание, вызываемое специфическим возбудителем, гонококком, передающимся преимущественно половым путем и характеризующееся, в основном, поражением слизистых оболочек мочеполовых органов.
Источник заражения. - Больные хронической гонореей, преимущественно женщины – хронический процесс протекает почти незаметно, более длительно, труднее диагностируется.
Этиология. Neisseria gonorrheae из семейства Neisseriacae , рода Neisseria. Это грамотрицательный бобовиднвй диплококк, являутся аэробом или факультативным анаеробом.
Возбудитель открыт Нейсером в 1879 г. Это парный кокк (диплококк), внешне напоминает кофейные зерна, сложенные вогнутыми сторонами внутрь. Снаружи имеет капсулу из мукополисахарида. В цитоплазме – рибосомы, мезосомы, ядерная вакуоль с нитями ДНК. На наружной стенке – тонкие нити (пили). Размножаются путем поперечного деления, а L-формы – почкованием. Находятся внутри лейкоцитов, эпитемальных клетках, трихомонадах, при этом они сохраняют свою жизнеспособность.
При неблагоприятных условиях или спонтанно способны образовывать L-формы : они изменяют форму и размеры шаровидные или в виде мелких пылевидных частиц; резистентны к антибиотикам. Отдельные штаммы гонококков вырабатывают фермент Влактамазу, разрушающую пенициллин.
Растет на искусственных питательных средах. Рост начинается через 24 ч в виде мелких росовиднных колоний, бесцветных, с гладкой блестящей поверхностью. Края колоний гладкие и ровные. Через 72 ч колонии увеличиваются в размере. Лучше развиваются в условиях с повышенным содержанием углекислоты, t 36, 537.
Малоустойчив к внешним раздражителям: гибнет при высыхании, под влиянием ультрафиолетовых лучей, температуре выше 56, солей серебра, ртути, хлоргексидина, этилового спирта. Лучше сохраняется при низкой температуре.
Поражают слизистые оболочки мочеиспускательного канала, влагалища, прямой кишки, полостей рта, носа, гортани. У мужчин – предстательную железу, семенные пузырьки, придатки яичек, яичко. У женщин – матку, яичники, маточные трубы. Распространяясь по кровеносному руслу может вызвать гонококковый сепсис и метастазы в различные органы: суставы, глаза, плевру, эндокард, мышцы, кости.
Схема обследования. Анамнез: зуд, жжение в мочеиспускательном канале, расстройства мочеиспускания и половых функций. ü Осмотр выделений: незначительны, по утрам, могут отсутствовать. ü Пальпация органов мошонки с целью выявления инфильтратов, спаек, болезненности. ü
Пальпаторное исследование простаты ü Бактериоскопическое исследование выделений из уретры ü Бактериологическое исследование выделений из уретры ü Уретроскопия ü
Диагностика гонореи. Анамнез заболевания клиническая картина Анамнез заболевания Клиническая картина Обнаружение возбудителя
При подозрении на гонококковую инфекцию исследуют отделяемое: Ø Ø Ø Мочеиспускательного канала Парауретральных протоков Секрет предстательной железы Семеных пузырьков Желез и лакун мочеиспускательного канала Промывные воды прямой кишки
В клинической практике для диагностики гонореи применяют бактериоскопические и бактериологические методы, реже иммунофлюоресцентные, иммунохимические, серологические.
Бактериоскопическое исследование. Забор материала : • У женщин – шейка матки, влагалище, уретра, бартолиновы железы, парауретральные ходы. • Из прямой кишки материал берут тупой ложечкой или с помощью промывных вод (подозрительные комочки, нити).
У мужчин отделяемое слизистой оболочки берут петлей из глубины уретры, предварительно очистив ее отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. • При подозрении на фарингеальную гонорею – обработанным ватным тампоном берут материал из лакун миндалин м с задней стенки глотки, выше нижнего края мягкого неба. •
Техника получения мазка. Из материала, взятого из каждого пораженного органа и урогенитального тракта, готовят мазки на 2 стеклах. Мазки должны быть равномерно размазанными, нетолстыми. 1. Окраска по Граму(окончательное заключение микроскопии) 2. Окраска метиленовым синим (предварительный вывод)
Окраска метиленовым синим. Высушенные на воздухе мазки фиксируют пламенем спиртовки, на 15 -20 с наносят 1%-ный водный р-р метиленового синего, смывают водой, сушат и микроскопируют. Цитоплазма форменных элементов – бледно-голубая, ядра – синии, гонококки – интенсивно-синии.
Окраска по Граму. На высушенный и фиксированный под над пламенем спиртовки мазок кладут фильтровальную бумагу, наливают на 1 -2 минуты р-р кристаллического фиолетового; мазок смывают водой и заливают р-ром Люголя на 30 -60 с, смывают м погружают в ванночку с 96%-ным спиртом для обесцвечивания, промывают водой и на 2 мин наливают р-р нейтрального красного. Мазок промывают водой и высушивают на воздухе.
Гонококки окрашиваются в ярко-розовый цвет. Ядра лейкоцитов и эпителиальных клеток- в слабо-синий цвет.
В направлении в лабораторию указывают откуда взят материал, фамилию, инициалы больного, номер истории болезни, предполагаемый диагноз. В ответах из лаборатории отмечают количество форменных элементов, эпителиальных клеток в мазке, присутствие или отсутствие других микроорганизмов, вагинальных трихомонад, дрожжевых клеток.
Если при бактериоскопии не выявлены гонококки- используют метод посева патологического материала из очагов поражения на искусственные питательные среды.
Используют при: ü подозрительных на гонорею случаях, ü при торпидной, хронической гонорее, ü у заведомых источников заболевания, ü в случавоспалительных заболеваний урогенитальгого тракта у женщин, ü Подтверждение диагноза при установлении излеченности у детей, ü Исследовании материала из полости рта ü Подозрение на гонорею глаз.
При посеве загрязненного посторонней микробной флорой (из прямой кишки) материала в среду добавляют полимиксин М (12, 4 ЕД/мл) и ристомицин (6, 2 ЕД/мл). Они подавляют рост грам- и грам+ флоры, не влияют на рост гонококков.
Распознать гонококковые колонии помогает оксидная реакция – на выросшие подозрительные колонии наносят 1 -2 капли 1%-ого р-ра парафенилендиамина или 0, 5%-ный р -р тетраметилпарафенилендиамина гидрохлорида. Гонококковые колонии окрашиваются в пурпурно-коричневый (до черного) цвет. Ø В суточной колонии – гонококки имеют вид кокков или диплококков одинаковой величины Ø В 3 -суточной – полиморфны, невелико, окрашиваются бледно.
Дальнейшая идентификация подозрительных на гонококк колоний производят на желточной среде ферментации. Отличие гонококков от сходных микробов – исследовании ферментации глюкозы, мальтозы, левулезы. Гонококк ферментирует только глюкозу!
Показания к проведению бактериологического исследования: Неоднократное получение отрицательного результата бактериоскопического анализа при клиническом, эпидемиологическом , анамнестическом подозрении на гонорею Наличие в мазках из патологического материала подозрительных на гонококк микроорганизмов Установление излеченности гонореи.
Серологическая диагностика. Единственная серологическая реакция для диагностики гонореи – РСК (реакция Борде-Жангу). Рекомендуется проводить при хронической и осложненной гонорее, особенно если не подтверждено бактериологически. Серологические методы, кожноаллергическая проба с гонококковой вакциной непригодны для доказательства инфекции и установления излеченности.
Иммунофлюоресцентный метод. Прямая иммунофлюоресценцияпозволяет отличить гонококки от других микроорганизмов. 2) Замедленная иммунофлюоресценция – для более раннего выявления гонококков в отделяемом больных, особенно женщин. 1)
Иммунохимический метод. Высокочувствителен. Оказывает помощь при выборе тактики обследования и лечения больных. Встречный иммуноэлектрофорез : антигены- отделяемое из иочеиспускательного канала или шейки матки обследуемых, антителагипериммунная антигонококковая сыворотка.
Благодарим за внимание !