ГИСТОЛОГИЯ. ЛЕКЦИЯ 11 Введение в курс. Методы гистологического

ГИСТОЛОГИЯ. ЛЕКЦИЯ 11 Введение в курс. Методы гистологического исследования. Содержание

Ткань- это исторически(филогенетически) сложившаяся система клеток и их производных, специализированная на выполнении определённых функций и обладающая общностью строения и развития.

СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ЭЛЕМЕНТЫ ТКАНИ Клетка- главный элемент. Межклеточное вещество (тканевой матрикс). Постклеточный структуры- эритроциты, тромбоциты, роговые чешуйки. Симпласты- волокна скелетной мышечной ткани, остеокласты и др. Синцитий- синцитиотрофобласт, синцитий сперматогенного эпителия.

ТИПЫ ТКАНЕЙ Эпителиальные ткани( пограничные) ткани. Ткани внутренней среды (соединительные). Мышечные ткани. Нервная ( нейральная) ткань.

МЕТОДЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 1. Гистологические препараты. 2. Гистохимические методы. 3. Цитофотометрия. 4. Радиоавтография. 5. Имуногистохимически методы.

ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ Световая микроскопия 1. Гистологические срезы 2. Мазки(кровь, мозг) 3. Мазки отпечатки (слизистые оболочки) 4. Смывы(полости) Электронная микроскопия 1. Ультратонкие срезы(ПЭМ) 2. Тотальные препараты(СЭМ)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ Приготовление постоянного гистологического препарата из кусочка ткани, залитого в затвердевающую среду. 1. Фиксированный( и залитый парафином) препарат режут на микротоме 2. Депарафинирование и окрашивание 3. Обезвоживание, просветление и помещение в КС 4. Готовый препарат БЛ-блок БР-стальная бритва СР-срез ССР-серия срезов ПРС-предметное стекло КС-консервирующая среда ПОС-покровное стекло (по Быкову и др. , 1998. )

ЭТАПЫ ПРИГОТОВЛЕНИЕ УЛЬТРАТОНКИХ СРЕЗОВ(УТС) ( по Афанасьеву и др. , 2004)

ОКРАСКА ОСНОВНЫМИ И КИСЛЫМИ КРАСИТЕЛЯМИ Базофильные и оксифильные структуры клеток крови Мазок периферической крови(Общий вид) Окраска: Гематоксилин-Эозин 1. Эритроциты 2. Лимфоциты 3. Моноцит 4. Нейтрофильные гранулоциты 5. Эозинофильные гранулоциты 6. Базофильные гранулоциты 7. Тромбоциты ( по Волковой и др. , 1996)

РЕАКЦИЯ ФЕЛЬГЕНА Схема проведения реакции Фельгена 1. Краситель парарозанилин(основной фуксин) переходит в неокрашенную лейкоформу (2)Реактив Шиффа 3. Гидролиз ДНК соляной кислотой приводит к образованию альдегидных групп на дезоксирибозе, которые, взаимодействуя с реактивом Шиффа, переводят его в окрашенное состояние(4) ( по Волковой и др. , 1996)

ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ РЕАКЦИЯ НА НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ Цитохимическая окраска нуклеиновых кислот а-реакция Фельгена на ДНК, окраска цитоплазмы светлым зелёным. б-окраска рибосом пиронином , хроматин ядра окрашен метиловым зелёным. (по Кацнельсон и др. , 1970)

ШИК-РЕАКЦИЯ НА ГЛИКОПРОТЕИНЫ ХРЯЩЕВОЙ ТКАНИ 1 - надхрящница, 2 - гликопротеины межклеточного вещества; 3 – гликопротеины в цитоплазме хондроцитов ( по Елисееву и др. , 1970)

ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ОКРАШИВАНИЕ ЖИРОВЫХ ВКЛЮЧЕНИЙ а-фиксация формалином, б-Фиксация осмиевым фиксатором, окраска включений суданом-III, докрашивание ядер сафранином подкрашивание ядер гематоксилином ( по Елисееву и др. , 1970)

АВТОРАДИОГРАФИЯ Синтез ДНК в клетках животного. Автографы гладких мышц стенки желудка двухдневных (1, 2) и семидневных (3, 4) мышей. Результаты опытов с трехкратной инъекцией H-тимидина. Через час (1, 3), через 7 , 5 сут (2, 4) последней инъекции. Окраска гематоксилин-эозином. x 700

ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ ВИРИОНОВ, ВЫЗЫВАЮЩИХ ОРНИТОЗ Цитоплазматические (РНК-содержащие) оранжево-красные включения (а) при орнитозе. Акридиновый оранжевый. Люминесцентная микроскопия. ( по Ярыгину и др. , 1977).