ГИСТОЛОГИЯ ЛЕКЦИЯ 1 Введение в курс Методы гистологического

ГИСТОЛОГИЯ. ЛЕКЦИЯ 1 Введение в курс. Методы гистологического исследования.

МЕТОДЫ ГИСТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ 1. 2. 3. 4. Гистологические препараты Гистохимические методы Цитофотометрия Радиоавтография

ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ 1. 2. 3. 4. 1. 2. Световая микроскопия Гистологические срезы Мазки(кровь, мозг) Мазки отпечатки (слизистые оболочки) Смывы(полости) Электронная микроскопия Ультратонкие срезы(ПЭМ) Тотальные препараты(СЭМ)

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ Рис. 1. Приготовление постоянного гистологического препарата из кусочка ткани, залитого в затвердевающую среду. 1. Фиксированный( и залитый парафином) препарат режут на микротоме 2. Депарафинирование и окрашивание 3. Обезвоживание, просветление и помещение в КС 4. Готовый препарат БЛ-блок БР-стальная бритва СР-срез ССР-серия срезов ПРС-предметное стекло КС-консервирующая среда ПОС-покровное стекло

ПРИГОТОВЛЕНИЕ УЛЬТРАТОНКИХ СРЕЗОВ(УТС) Рис. 2. Этапы приготовления УТС

ОКРАСКА ОСНОВНЫМИ И КИСЛЫМИ КРАСИТЕЛЯМИ Базофильные и оксифильные структуры клеток крови Рис. 3. Мазок периферической крови взрослого человека (Общий вид) Окраска: Гематоксилин-Эозин 1. Эритроциты 2. Лимфоциты 3. Моноцит 4. Нейтрофильные гранулоциты 5. Эозинофильные гранулоциты 6. Базофильные гранулоциты 7. Тромбоциты

РЕАКЦИЯ ФЕЛЬГЕНА Рис. 4 Схема проведения реакции Фельгена 1. Краситель парарозанилин(основной фуксин) переходит в неокрашенную лейкоформу (2)Реактив Шиффа 3. Гидролиз ДНК соляной кислотой приводит к образованию альдегидных групп на дезоксирибозе, которые, взаимодействуя с реактивом Шиффа, переводят его в окрашенное состояние(4)

ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ РЕАКЦИЯ НА НУКЛЕИНОВЫЕ КИСЛОТЫ Рис. 5. Цитохимическая окраска нуклеиновых кислот а-реакция Фельгена на ДНК, окраска цитоплазмы светлым зелёным. б-окраска рибосом пиронином , хроматин ядра окрашен метиловым зелёным.

ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ОКРАШИВАНИЕ ЖИРОВЫХ ВКЛЮЧЕНИЙ Рис. 6. Окраска включений липидов а-фиксация формалином, б-Фиксация осмиевым фиксатором, окраска включений суданом-III, докрашивание ядер сафранином подкрашивание ядер гематоксилином