
Гибридомная технология старая.ppt
- Количество слайдов: 12
ГИБРИДОМНАЯ ТЕХНОЛОГИЯ И МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА
ТЕРМИНЫ Антитела - белки сыворотки крови, которые синтезируются в организме как проявление защитной реакции при попадании в него чужеродного вещества (антигена) Антиген (от antigen = antibody-generating — «производитель антител» ) — это вещество, которое организм считает чужеродным или потенциально опасным. Против антигена организм начинает вырабатывать собственные антитела ( экзо-, эндо-, ауто-)
АНТИТЕЛА 1. Синтезируются В-лимфоцитами 2. Идентификация и нейтрализация чужеродных объектов 3. Функции - антиген-связывающая - эффекторная (иммунный ответ) 4. Образуются к эпитопам Два В-лимфоцита Эпитоп (антигенная детерминанта) — часть молекулы антигена, которая распознаётся иммунной системой 5. Выделяют 5 классов иммуноглобулина человека - Ig. G, Ig. M, Ig. А, Ig. E, Ig. D (различающиеся между собой по строению и аминокислотному составу тяжелых цепей)
СТРОЕНИЕ АНТИТЕЛ 1. Fab – фрагменты 2. Fc – фрагмент 3. тяжелая цепь; 4. легкая цепь; 5. антиген-связывающийся участок; 6. шарнирный участок Типы тяжелых цепей: α-, γ-, δ-, ε-и μТипы легких цепей: κ-цепь и λ-цепь
ДИМЕР IGA И ПЕНТАМЕР IGM
СЫВОРОТКИ Используются: 1. В случаях профилактики и лечения инфекционных заболеваний. 2. При отравлении ядами микробов или животных – при столбняке, ботулизме дифтерии 3. Для создания различных диагностических наборов (например, в тестах на определение беременности) Получение: Из крови животных Из культивируемых животных клеток Недостатки: Невозможность получения стандартных препаратов Сложность обеспечения стабильного роста животных клеток Для иммунохимических анализов необходимы абсолютно идентичные антитела
Сезар Мильштейн Георг Кёлер С. Мильштейн и Г. Кёлер на церемонии присуждения Нобелевской премии (1984 год)
ГИБРИДОМЫ 1975 год Георг Кёлер и Цезарь Мильштейн Образуются в результате слияния лимфоцитов (клеток производящих антитела), взятых от иммунизированных животных, с клетками миеломы костного мозга. Гибридные клетки способны неограниченно долго жить в искусственных средах и одновременно они сохраняют способность синтезировать антитела Моноклональные антитела (МКАТ) - антитела, однородные по структуре и специфичности, производимые в неограниченных количествах
ПОЛУЧЕНИЕ МКАТ
ПРИМЕНЕНИЕ МКАТ 1. В медицинской диагностике 2. Очистка веществ 3. Стимуляция иммунной системы с помощью антител 4. МКАТ - специфические переносчики токсических веществ в опухолевые клетки 5. Иммуноферментный анализ
ИФА – ИММУНОФЕРМЕНТНЫЙ АНАЛИЗ 1955, АЛЬБЕРТ КУНС
ПРИМЕНЕНИЕ ИФА 1. В диагностике микробных и вирусных возбудителей. 2. В диагностике неинфекционных болезней (диабет, рак, сердечнососудистые заболевания. 3. Для выявления отравления наркотиками, для выявления допинговых препаратов в организме человека 5. В контроле технологических процессов, в определении качества биотехнологической продукции в микробиологических производствах: 5. 1. Для быстрого выявления высокоэффективных микроорганизмов – продуцентов ферментов, антибиотиков и других веществ 5. 2. Для контроля наличия посторонних микроорганизмов и бактериофагов в ферментерах 5. 3. Для определения степени загрязненности воздуха 5. 5. Для определения белковых примесей в препарате инсулина.
Гибридомная технология старая.ppt