Генная инженерия животных Практикум ФББ МГУ – ЦКП ИБГ РАН 2016
Что делать после микроинъекций? • Культивация • Трансплантация
Культивация Проблема двуклеточного блока
Культивирование в CO 2 -инкубаторе Cреды KSOM и KSOM-AA
Что мы видим при культивировании
Отличаем хорошие клетки от плохих
Отличаем хорошие клетки от плохих
Отличаем живые клетки от дохлых
1 е сутки культивирования
2 е сутки культивирования
2 е сутки культивирования: аномалии
3 е сутки культивирования
4 е сутки культивирования
Анализ • Отмывка бластоцист • ПЦР с целой бластоцистой • ПЦР с предварительно выделенной ДНК
Выделение ДНК из бластоцист • Add to the each tube 10 ul of BLB (Mix 100 ul of 1 M Tris-HCl p. H 8, 3 , 100 ul of 1 M KCl, 100 ul of 0, 2% gelatin, 4, 5 ul of Tween-20, 6, 25 ul of Proteinase K 20 mg/ml solution, bring final volume to 1 m. L. ) • incubate 10 min at 56 o. C and 10 min at 95 o. C • freeze and store at -20 before use • use 5 ul of solution in PCR
Трансплантация эмбрионов в яйцевод
Состояние эндометрия
Анатомия половой системы
Схема операции
Разрыв капсулы яичника
Введение капилляра с эмбрионами
Еще вариант
Трансплантация в рог матки
Схема операции
Беременность и эмбриональное развитие
Матка, 8 й день
Беременность и эмбриональное развитие
Зародышевые оболочки
Кесарево сечение
Новорожденные мышата
Кормление (21 день)
Анализ трансгенов: химеризм
Анализ трансгенов: выделение ДНК Экспресс-методы: • хвост • кровь
Скачать презентацию Генная инженерия животных Практикум ФББ МГУ ЦКП
animal_gene_eng_2016_5.pptx