Генная инженерия совокупность биотехнологических методов, позволяющих создавать синтетические системы на молекулярнобиологическом уровне.
Задачи генной инженерии Придание особых качеств: устойчивость к ядохимикатам устойчивость к вредителям, болезням повышенная продуктивность
Этапы решения генноинженерной задачи 1. 2. 3. 4. 5. Получение изолированного гена Введение гена в вектор переноса Перенос вектора в модифицируемый организм Клонирование трансгенных клеток Выращивание трансгенных организмов
I. Получение исходного фрагмента ДНК (трансгена) Из природного материала (путем расщепления ДНК на короткие нуклеотидные последовательности с помощью рестриктаз) Из банка генов Химическим синтезом Синтезом к. ДНК на матрице м. РНК с помощью обратной транскриптазы
II. Векторы переноса Вектор переноса – молекула ДНК, способная переносить включенные в них чужеродные гены в клетку, где эти молекулы реплицируются. Векторы: ДНК вирусов или бактериофагов Плазмиды – внехромосомные генетические элементы, автономно реплицирующиеся в клетке. Космиды (объединение преимуществ плазмид и фагов) Искусственные хромосомы дрожжей
Векторы переноса: свойства Способность к автономной репликации Наличие сайта для встраивания фрагмента ДНК Наличие маркерных генов (селективные, репортерные) Наличие соответствующего промотора
Плазмидный вектор p. BR 322 тпн) (10
Фаговый вектор (до 23 тпн)
Космида (до 45 тпн)
Схема опыта по генной инженерии
III. Перенос вектора в организм Трансдукция (вирусное введение) Трансфекция (невирусное введение для животных) Транформация (невирусное введение для растений, грибов, бактерий)
Методы невирусного переноса Микроинъекции Электропорация Кальций-фосфатная трансфекция Липосомальное введение Положительно-заряженные полимеры «Генная пушка» (биобаллистика)
IV. Клонирование генов Для увеличения количества нужных генов, нужных белков
Банк генов (клонотека) Банк генов – коллекция клонов ДНК, включающая все фрагменты, входящие в состав генома данного вида. Создание: - выделение всей ДНК -фрагментация (рестриктазы, метод дробовика) -присоединение к векторам Введение векторов в бактерии Клонирование бактерий
Скрининг банка генов Электрофорез белков Молекулярные зонды
Скачать презентацию Генная инженерия совокупность биотехнологических методов позволяющих создавать синтетические
Генная инженерия.ppt