Фотосинтез и свет Зависимость фотосинтеза от интенсивности света

Фотосинтез и свет Зависимость фотосинтеза от интенсивности света Компенсационная интенсивность –интенсивность света которая необходима для достижения минимальной скорости валового фотосинтеза, при которой скорость чистого фотосинтеза равна 0. Было принято, что среднее значение компенсационной интенсивности равно 1% величины поверхностной освещенности. Насыщающая интенсивность количество света, необходимое для максимального фотосинтеза Ингибирующий эффект – уменьшение фотосинтетической активности при очень высоких значениях энергии света Несмотря на то, что вид зависимости Р/E является общим для всего фитопланктона, компенсационная и насыщающая интенсивности, так же как Рmax и начальный наклон, неодинаковы для различных видов.

Фотосинтез и свет Влияние адаптации (акклимации) • Альгологи различают световой планктон, находящийся вблизи поверхности и приспособленный к относительно высоким интенсивностям света, и теневой, живущий у нижней границы эвфотической зоны и адаптированный к более низким интенсивностям света. • Существование теневого и светового планктона особенно выражено в сильно стратифицированных тропических водах. • Пример. Эксперименты с тремя видами водорослей показали, что Lauderia borealis и Thalassiosira gravida очень быстро размножались на поверхности и в верхнем двухметровом слое, а T. nordenskioldii лучше всего росла на глубине от 2 до 5 м или, возможно, глубже, что свидетельствует о потребности ее в свете более низкой интенсивности.

Фотосинтез и свет Влияние физиологического состояния • Параметры кривой для какого либо одного вида не являются абсолютными и могут изменяться в зависимости от физиологического состояния клеток: • Оптимумы меняются в процессе роста популяций в ответ на изменения в концентрациях ферментов и других компонентов клеток. • Разные фазы клеточного деления (деление ядер, образование мембран и клеточных стенок и др. ) влияют по разному на скорость фотосинтеза.

Фотосинтез и свет Влияние адаптации (акклимации) • Возможно, основным фактором, влияющим на скорость фотосинтеза, является предшествующая история развития, во время которой водоросли вырабатывают определенный набор и количество ферментов. • Адаптация к интенсивности света (температуре, концентрации биогенных элементов) в последующем влияет на световой, (температурный и др. ) оптимумы. • Хорошо известно, что многие виды способны существовать в различных условиях окружающей среды и один и тот же вид может иметь широкое географичесое распространение. Вместе с тем на практике, как правило, существует конкуренция между видами и распространение их в большой степени ограничено теми ареалами, где превалируют условия, близкие к оптимальным для данного вида. • Во многих ареалах, в частности в тех, где ярко выражены сезонные изменения, взаимодействие факторов окружающей среды играет наиболее важную роль в сукцессии видов фитопланктона.

Опускание ниже эвфотической зоны • Водоросли могут опускаться или переноситься в результате турбулентного перемешивания на глубины ниже компенсационной точки, и для экологии важно выяснить: – остается ли хлорофилл активным в течение какого то достаточно длительного периода? – если клетки возратятся в эвфотическую зону, смогут ли они снова стать продуктивными? • Способность фитопланктона выживать при интенсивностях света ниже компенсационной точки до некоторой степени связана с проблемой разрушения хлорофилла. • Наши знания о частично разложившемся хлорофилле (в море) ограничены. В любом случае хлорофилл теряет свой центральный атом магния: в феофетине фитол остается. С глубиной доля хлорофилла уменьшается, а феофитина увеличивается. • Существует мнение, что хлорофилл также превращается в феофитин при недостатке биогенов в культуре.

Исследования на культурах водорослей Йенч исследовал влияние темноты на Phaeodactilum tricornutum. – На свету в лабораторных культурах содержание хлорофилла увеличивалось, а феофетин присутствовал в незначительных количествах. – Когда культуры помещали в темноту, содержание хлорофилла вначале увеличивалось, и достигало максимума после 70 часов темнового воздействия; затем суммарное содержание пигментов, особенно хлорофилла, уменьшалось, а феофетина возрастало. – Дальнейшее выдерживание в темноте приводило к снижению суммарного содержания пигментов, но содержание феофитина существенно увеличивалось; спустя приблизительно 270 часов хлорофилл практически исчезал и оставался только феофетин. Была исследована возможность обратного превращения феофетина в хлорофилл. Культуры Phaeodactilum, предварительно выдержанные в темноте в течение 25 дней, при экспозиции на свету слабо продуцировали хлорофилл. После 250 часового выдерживания на свету относительное содержание феофитина значительно уменьшилось, тогда как содержание хлорофилла существенно увеличилось и спустя 500 часов все пигменты были представлены хлорофиллом.

Исследования природных популяций • В природных популяциях фитопланктона, отобранного с глубины 250 м во Флоридском проливе, свыше 75% пигментов было представлено феофитином. • Когда пробы поместили на свет, наблюдалось медленное снижение содержания феофитина, а после лаг фазы концентрация хлорофилла непрерывно увеличивалась.

Сохранение фотосинтетической активности • Таким образом, клетки, временно опустившиеся ниже эвфотической зоны, могут стать фотосинтетически продуктивными при возвращении на свет. • Однако, специфические различия в сохранении фотосинтетической способности могут иметь большое значение при сукцессии видов.

Выживание в течение зимы • Выживание водорослей в эвфотической зоне в течение зимы в умеренных и высоких широтах затрудняется. • Некоторые неритические формы могут образовывать покоящиеся споры, но это не распространяется даже на все прибрежные виды (например, на Asterionella, Skeletonema) и не свойственно океаническим формам. • Опыты с культурами водорослей показали, что выживаемость в темноте повышается у некоторых водорослей с понижением температуры, при периодическом кратковременном освещении (Skeletonema costatum и др. ). • Некоторые авторы полагают, что низкая температура может способствовать накоплению углеводов при ограниченном делении клеток и, снижая метаболические потребности, может давать возможность антарктическому фитопланктону использовать резервные углеводы во время долгого периода выживания в темноте. • Низкая температура является мощным фактором сохранения жизнеспособности покоящихся спор, по крайней мере, для некоторых диатомовых, нормально переносящих такие условия.

Образование покоящихся спор • Так, Дурбин (Durbin, 1978), исследуя образование покоящихся спор двух диатомей Thalassiosira nordenskioldii и Detonula confervacea в арктических водах в зимне весенний сезон, обнаружил, что – Споры сохраняли жизнеспособность в темноте в течение долгого периода при низких температурах, особенно при 0 5 о С. – При 15 о. С Thalassiosira была не способна образовывать покоящиеся споры – Споры , образованные обоими видами при более низких температурах, могли сохраняться только очень короткое время (менее 7 дней) в темноте при температуре 20 о С. – При 0 о С споры Thalassiosira, содержащиеся в темноте, оставались жизнеспособными даже в течение 576 дней!

Гетеротрофная активность фитопланктона • Рост фитопланктона осуществляется в основном за счет процессов фотосинтеза. • Однако, достаточно характерными являются ситуации, когда при крайне низких значениях скорости фотосинтеза происходит интенсивный рост микроводорослей. • Происходит это за счет гетеротрофного питания, т. е. за счет потребления органического вещества (ОВ): прежде всего растворенного органического вещества (РОВ), либо в меньшей степени взвешенного органического вещества (ВОВ). • Способность к миксотрофному питанию обнаружена у представителей почти всех классов микроводорослей. • Tuchman (1996) предположил, что поскольку все группы фотосинтезирующих водорослей имели предков гетеротрофов, поэтому способны потреблять органические субстраты.

• Переносчики гексоз обнаружены во всех группах организмов от бактерий до высших растений и животных (включая человека). Зеленая водоросль Chlorella имеет по крайней мере три хорошо изученных переносчика • гексоз. Эти переносчики • (транспортные белки) локализованы в клеточной мембране. Перенос глюкозы через мембрану обеспечивается за счет • изменения конформации молекулы переносчика. Модель возможной конформации одного из гексозных транспортных белков, расположенных в клеточных мембранах водоросли Chlorella. Представители этого большого семейства структурно близких переносчиков характеризуются наличием 12 трансмембранных α спиральных фрагментов (темные прямоугольники), насыщенных гидрофобными аминокислотами, разделенных петлями более гидрофильных аминокислотных последовательностей, которые направлены как внутрь клетки, так и наружу. Стрелка показывает место, где вероятно связывается сахар.

Экологические аспекты потребления микроводорослями ОВ Экологические аспекты чрезвычайно разнообразны и во многих случаях обуславливают определенный тип жизненной стратегии водорослевой популяции: 1. Ингибировани фотосинтетических процессов отсутствием света, либо низкими значениями освещенности: – ОВ потребляется микроводорослями в качестве основного или единственного источника энергии для жизнедеятельности. 2. Лимитирование развития популяций водорослей недостатком минеральных форм биогенных элементов: – ОВ может использоваться клетками в качестве источника азота или фосфора в количествах, необходимых для нормального функционирования. 3. Метаболизм в основном обеспечивается фотосинтетической активностью: – ОВ потребляется дополнительно для удовлетворения энергетических и пластических потребностей

Растворенное органическое вещество • РОВ включает в себя частицы меньше 1 мкм (Provasoli, 1963) или меньше 0, 5 мкм, т. е. все то, что проходит сквозь нитроцеллюлозные или стеклянные ультрафильтры с диаметром пор 0, 45 0, 5 мкм (Хайлов, 1971). • РОВ как в пресных, так и в морских водах представляет собой сложную смесь различных органических соединений, в которую входят: – – – – – углеводы, органические безазотные кислоты, липиды, углеводороды, витамины, гормоны, поверхностно активные вещества различной природы, гумусовые вещества и металлоорганические комплексы, азотсодержащие вещества белки, амины, пептиды, аминокислоты.

Происхождение РОВ в природных водах имеет двоякое происхождение: – аллохтонные вещества попадающие в водоем со стоком с суши, с осадками, – автохтонные вещества образующиеся в самом водоеме. Автохтонный источник РОВ является основным в открытых водах и состоит из следующих поступлений: 1. Прижизненные внеклеточные выделения неповрежденных клеток микроводорослей 2. Выделения клеток микроводорослей, поврежденных зоопланктоном в процессе питания. 3. Экскреции зоопланктона. 4. Разложение мертвого материала.

Концентрация РОВ Средняя концентрация РОВ в природной воде 0, 2 50 мг/л. – Большая часть его нелабильна и состоит, главным образом, из гуминовых кислот. Лабильная фракция РОВ (ЛРОВ) имеет малое время "оборота" (регенерации или полного исчезновения), быстро перерабатывается микрогетеротрофами и составляет 3 5% от суммарного РОВ.

ЛРОВ • Концентрации органических веществ фракции ЛРОВ в природе очень трудно определить вследствие их малых величин и высоких скоростей оборота: • vt = Sпр/Tt • Sпр концентрация субстрата в природной среде, • Tt – время оборота субстрата, т. е. время, требуемое природной популяции для полного выведения субстрата. 1/Tt = rt - коэффициент оборота. • rt показатель трофности водоема. – В эвтрофных водоемах rt имеет высокие значения (выше 1/ч), – В резкоолиготрофных (подобно открытому океану) – низкие (до 10 5/ч). – Соответственно Тt в эвтрофных водоемах короче, чем в олиготрофных.

Механизм потребления ОВ водорослями • К настоящему времени общепризнанным считается существование двух основных механизмов потребления ЛРОВ микроводорослями: – активный транспорт – пассивная диффузия • Потребление ВОВ: – фагоцитоз

Активный транспорт против градиента концентраций • • идет с участием АТФ и НАДФ Н, продуцируемых при фотосинтезе, • является основным механизмом потребления РОВ при низких концентрациях субстрата. Vmax 1/2 Vmax • • Кинетика поглощения органических соединений водорослями носит гиперболический характер и аналогична таковой поглощения биогенов. т. е. зависимость описывается уравнением Михаелиса Ментен : • v = Vmax * S/(K+S), S концентрация субстрата в среде; Vmax максимальная удельная скорость потребления субстрата из среды; K константа, численно равная концентрации субстрата, при которой v достигает половины максимального значения, так называемая константа полунасыщения.

Пассивная диффузия • • Является основным механизмом потребления ЛРОВ микроводорослями природных фитопланктонных сообществ при концентрациях субстрата, превышающих 250 мкг С/л. При высоких концентрациях субстрата не происходит ограничения скорости потребления и насыщения субстратом. С ростом концентрации субстрата скорость потребления постоянно растет. • • • Зависимость скорости потребления субстрата от его концентрации в среде может быть описана уравнением: vd = Kd * S, где S концентрация субстрата в среде, Kd константа диффузии.

Фагоцитоз • В качестве пищи микроводоросли могут употреблять бактерии, синезеленые водоросли, мелкие динофлагелляты и диатомеи, инфузории. • Особенно это свойственно динофлагеллятам. • Рядом исследований показано, что поглощение пищевых частиц динофлагеллятами происходит в области продольной борозды. В эту область частицы перемещаются с током воды, создаваемым жгутом или псевдоподиальными выростами. • У Protoperidinium conicum была обнаружена «ловчая» сеть, используемая для внеклеточного переваривания микроорганизмов.

Гетеротрофное питание динофлагелляты Symbiodinium sp. A F: поедание бактерий G I: переваривание клеток Synechococcus sp. J: псевдоподия (peduncle) K: развертывание буксировочных нитей L: высасывание клеточного содержимого у H. akashiwo M: высосанный хлоропласт N: несколько хлоропластов жертвы внутри протоплазмы хищника О: Две клетки Symbiodinium sp. высасывают внутриклеточное содержимое H. akashiwo

Типы питания • Для водорослей характерно большое разнообразие типов питания. • Многие исследователи пытались разработать их классификацию по источнику энергии, углерода, азота, потреблению витаминов и т. д. . • На сегодняшний день не существует универсальной классификации типов питания водорослей. Поэтому удобно пользоваться общепринятыми терминами: – авто-, гетеро-, миксо- и фаготрофия, детализируя в зависимости от цели исследования, отношение к источникам энергии, азота, углерода, фосфора и т. д. • Сочетание различных типов питания создает миксотрофию, которая часто господствует в метаболизме фитопланктона.

Гетеротрофная составляющая в продукции фитопланктона • В рамках традиционной модели трофической цепи фитопланктон не может рассматриваться только в качестве сообщества первичных продуцентов. • Количественную оценку доли гетеротрофной составляющей можно получить при сопоставлении интенсивностей фотосинтеза и потребления РОВ, выраженных в одних единицах. • Этого можно добиться, если использовать радиоактивные субстраты, например СО 2 и РОВ, меченые по С 14. • В качестве РОВ удобно использовать гидролизат хлореллы, поскольку он является смесью практически всех необходимых для развития микроводорослей веществ. • Причем добавку меченого гидролизата можно давать в той концентрации, при которой достигается Vmax, поскольку принимается, что скорость фотосинтеза тоже является максимальной, поскольку СО 2 в природе не лимитирует фотосинтез. Однако, это довольно грубое допущение и по видимому дает оценку потенциальной доли гетеротрофной составляющей, а не реально существующей.

Степень гетеротрофности h Можно определить степень гетеротрофности (h) как долю ассимилированного водорослями РОВ в метаболизме фитопланктона: h = H/(P+H) * 100%, где H – скорость потребления гидролизата хлореллы С/л*ч), P – фотосинтетическая активность (мкг С/л*ч). Таким образом, h может меняться от 0 до 100%. (мкг В различных районах Белого моря в августе 1989 г. h менялась от 17 до 100%. h=100% наблюдается при P=0, H=0 – таких значений не наблюдалось.

Дыхание фитопланктона (R) • Дыхание – это окислительный, с участием кислорода распад органических питательных веществ, сопровождающийся образованием химически активных метаболитов и освобождением энергии, которые используются клетками для процессов жизнедеятельности. • Дыхание – поток электронов от органического углерода к О 2 с выделением СО 2. • В клетках водорослей обнаружены все известные для высших растений пути превращения углерода – гликолиз, пентозофосфатный цикл, цикл трикарбоновых кислот и глиоксилатный цикл. Они присутствуют часто вместе. • В ряде случаев установлено, чем определяется выбор пути. – В гетеротрофных условиях при азотном голодании, ингибировании монофторацетатом активность пентозофосфатного пути выше.

Дыхание и рост клетки • Дыхание необходимо для роста клетки. – В процессе дыхания производится не только АТФ и восстановитель, но и углеродный скелет для биосинтеза • • Экспериментальные данные показывают линейную зависимость между специфической скоростью темнового дыхания и специфической скоростью роста. Наклон прямой – отношение углерода дыхания и ассимилированного углерода. R Поддерживающее дыхание μ Поддерживающее дыхание соответствует минимальному окислительному метаболизму, требуемому для сохранения жизнеспособности клетки при нулевом росте: восстановление поврежденных белков, нуклеиновых кислот, растворов. Скорость поддерживающего дыхания варьирует у разных видов и положительно кореллирует с компенсационной точкой. В среднем, на поддерживающее дыхание расходуется около 1% органического углерода клетки в день при 25 о. С.

Оценка дыхания • Предполагая, что дыхание на свету и в темноте одинаково, поглощение кислорода в темноте = R Онач От = R Выделение кислорода на свету = Рn (чистый фотосинтез): Осв Онач = Рn • Следовательно мера валового фотосинтеза: ∑(R + Рn) • Или Рg = R + Рn = (Онач От) + (Осв Онач) = Осв От Однако это положение недостаточно хорошо обосновано, поскольку у этих процессов (дыхание и фотосинтез) много общих промежуточных продуктов. Дыхание связано с фотосинтезом через метаболизм гексоз, а также через восстановитель и энергию, заключенную в химические связи гексоз. Скорость образования гексоз определяется интенсивностью фотосинтетических процессов, скорость их утилизации для биосинтеза и получения энергии определяется интенсивностью дыхания. •

Фотодыхание • Установление фотодыхания в клетках водорослей еще больше осложнило изучение процессов дыхания. • Фотодыхание это светозависимое поглощение кислорода в результате оксигеназной активности Ру. БФК/О с последующей цепью реакций гликолатного метаболитного пути и выделения гликолата. • По видимому фотодыхание действует как механизм обильного выделения, когда при высокой интенсивности света и дефиците биогенных элементов скорость потребления СО 2 превышает скорость его превращения в клеточный материал.

Отношение фотосинтеза к дыханию • P: R очень важный показатель продуктивности. • Как показали эксперименты, уровень дыхания за 24 часовой период в расчете на всю эвфотическую зону колеблется от 6 10% до 45% максимального фотосинтеза. • Многие специалисты считают, что при максимальном фотосинтезе у природных популяций отношение P: R = 10: 1.

Зависимость дыхания от концентрации кислорода • Оптимальная для дыхания концентрация кислорода сильно отличается у разных водорослей и часто является отражением условий места обитания. • Так, многие водоросли (кроме сине зеленых) увеличивают скорость дыхания при насыщении кислородом. Но высокие его концентрации ингибируют дыхание и рост. • Все сине зеленые водоросли поглощают кислород на свету и в темноте с разной скоростью, однако на свету даже его обычные концентрации являются неблагоприятными для их развития, ингибируют дыхание, фотосинтез, азотфиксацию.

Зависимость дыхания от факторов среды • Скорость дыхания также зависит от температуры, интенсивности света, содержания различных субстратов, которые, как уже известно, влияют на общий метаболизм клеток водорослей. • Как правило, свет ингибирует дыхание водорослей. – Эксперименты Eppley & Sloan (1965) с фитопланктонными видами в культуре показали, что дыхание увеличивалось на свету по сравнению с дыханием в темноте только у Dunaliella. • Истощение запасов субстратов (вследствие недостатка биогенных элементов для фотосинтеза) способствует снижению скорости дыхания. – При недостатке питания у культуры Dunaliella уровень фотосинтеза снижался быстрее, чем дыхания, но когда деление клетки прекращалось, оба процесса происходили примерно с одинаковой интенсивностью. • Часто наблюдается заметное увеличение скорости дыхания при добавлении органических субстратов, особенно углеводов, хотя глюкоза иногда подавляет дыхание.

Экскреция фитопланктона (p) • К настоящему времени полагается, что экскреция является нормальным явлением жизнедеятельности фитопланктона, хотя степень ее может быть значительной. • Спектр экзометаболитов очень широк. Это различные классы органических соединений. • Количество выделенного органического углерода по отношению к общей продукции, определенное различными авторами, колеблется в значительных пределах: 0%, 1 10%, 30 40% и даже 70 75%.

Экзометаболиты • Гликолевая кислота наиболее распространенный продукт выделения результат фотодыхания) – составляет до 9 38% общего количества выделенного углерода (Skeletonema costatum). • Азотистые вещества: белковые вещества, аминокислоты и пептиды – составляют 0, 2 5, 9% (Skeletonema costatum выделяет 10 12 аминокис лот). • Углеводы: различные комплексы полисахаридов. Реже водоросли выделяют моносахара, сахаро спирты. – Chaetoceros affinis, C. curvisetus, C. debilis, C. decipiens, C. socialis выделяют в среду от 4. 5 до 27 мг/л полисахаридов. • Липиды. Экскреция веществ липидной природы имеет определенный интерес в связи с лабильностью этих соединений и важной ролью их как возможных токсинов. – Их содержание в экзометаболитах составляет примерно 2. 88 10. 3%. • • Фенольные соединения. Из них особое значение имеют полифенольные соединения. Им приписывается роль в регуляции ростовых процессов, в метаболических реакциях, связанных с энергетическим баллансом клетки, в протекании свободнорадикальных реакций, а также в изменении качества питьевой воды (Platymonas viridis). Некоторые морские водоросли выделяют летучие соединения типа диметилсульфида, витамины, органические фосфаты.

Экологическая роль экзометаболитов • Экологические аспекты экскреции разнообразны. • Часто экзометаболиты обладают значительной физиологической активностью, участвуют в формировании и динамике природных биоценозов, в пополнении РОВ. • По классификации Тамбиева выделяют следующие категории действия метаболитов: – – – информационного, трофического, токсического, стимулирующего и ингибирующего • Наиболее важной представляется трофическая функция экзометаболитов. Это один из источников поступления в среду л. РОВ, которая доступна для использования другими организмами. • Гликолевая кислота, вероятно, играет важную роль при переносе энергии в водной среде.

Биологически активные метаболиты Биологически активные вещества водорослей изучены слабо. Кроме того, активность отдельных фракций экзометаболитов различна. – Известно, что Phaeocystis pouchetii выделяет в среду акриловую кислоту, которая обладает антибиотическим свойством. Prorocentrum выделяет вещество белковой природы, которое нейтрализует антибиотический эффект. Фильтраты некоторых видов редуцируют рост других. Выделяемые Chlorella и Nitzschia перикиси ненасыщенных жирных кислот ингибируют рост других организмов. Вещества, выделяемые клетками и оказывающие влияние на другие, иногда называются экторинами (ectorines). Некоторые водоросли выделяют токсины.

Биологически активные метаболиты Многим водорослям свойственно аутоингибирование и аутостимуляция. – Harris на культуре показал, что пресноводная планктонная водоросль Platidorina caudata продуцирует ингибирующее вещество, которое обнаруживается в культуре уже через 15 дней, а после 25 дней полностью ингибирует дальнейший рост Platidorina (аутоингибирование). Это вещество не проявляет ингибирующего действия на другие колониальные вольвоксовые водоросли (Volvox, Pleodorina, Eudorina или Pandorina). – Среди диатомовых Denffer сообщает о митотическом ингибиторе, продуцируемом культурой водоросли Nitzschia palea, которая является аутоингибирующей. Такие явления (емкость среды К) имеют место во время цветений фитопланктона с высокой плотностью или в водоемах мелких размеров, например в лужах или в горных водоемах. Отношения между видами в подвижной воде подвержены влиянию турбуленции, аэрации (проветривания) среды.

Механизм выделения • Выделения обычно интерпретируются как активное освобождение излишков фотосинтеза, которые накапливаются когда фиксация углерода превышает его включение в клеточный материал. • Альтернативным механизмом может быть пассивное проникновение через клеточную мембрану.

Механизм выделения • Если действует механизм пассивной диффузии, то нам следует ожидать непрерывное выделение ночью, лучшую корреляцию выделений с биомассой, чем с первичной продукцией, и относительно высоким выделением из мелких клеток. С другой стороны, если выделение является выводом излишков фотосинтезированного углерода, мы должны ожидать прекращение выделений ночью и лучшую корреляцию их с первичной продукцией, чем с биомассой. • Koefoed определил экскрецию как интегральную часть фотосинтеза "подоходным налогом". В противоположность этому, пассивную диффузию как непрерывную потерю биомассы "имущественным налогом". • Секретирование в основном происходит через клеточную стенку, но в случае жгутиковой водоросли Ochromonas danica, в среду выделяются везикулы, включающие кислотную и щелочную фосфатазу, а также аминокислоты, белки, витамины, ДНК, РНК и углеводы.