Физиологические эффекты активных форм кислорода. Основные механизмы
fiziol_effekty_aktivnyh_form_o2.ppt
- Размер: 377.5 Кб
- Автор:
- Количество слайдов: 17
Описание презентации Физиологические эффекты активных форм кислорода. Основные механизмы по слайдам
Физиологические эффекты активных форм кислорода.
Основные механизмы образования АФК. ОННООНОО Нее 2 2 222 +4 e + H + 2222 ОНАДФН 222 22 ОННО СОД
32 22 Fe. HOHOFe. ОНРеакция Фентона Cl. OОНCl. OH СИДАЗАМИЕЛОПЕРОК 222 HOCl. Fe. HFe. Cl. O 32 OHONOHOON
NAD(P)H- оксидазы — главные физиологические продуценты АФК в клетках сосудов. NAD(P)H -оксидаза — 4 субъединицы: • цитохром b 558 : gp 91 phox и p 22 phox • 2 цитозольных компонента : р47 phox и p 67 phox. G- белок rac- семейства участвует в сборке активного комплекса. Точно неизвестно, какие субъединицы функционально активны для производства АФК в разных типах клеток.
АФК — внутриклет. «реостат» , модулирующий активность биохимических реакций. ОНОНO КАТАЛАЗАСОД 2222 Уровень АФК строго контролируется:
АФК как сигнальные молекулы в ГМК ANGII 5 -HT TRPGPCR NAD(P)H — оксидаза Н 2 О 2 /O 2 Гипертрофия Пролиферацияp 38 MAPK ERK-1/2 MAPK(ANGII) 5 -HT
PDGF EGF RTK p 21 Ras Raс активация мембран-связанного оксидазного комплекса (? гомолога gp 91 phox) Н 2 О 2 /O 2 Ингибирование белковой тирозин-фосфатазы Пролиферация. NIH 3 T 3 -клетки (immortalized fibroblasts)
NADH-оксидаза. RS/TK Src-киназы Миофибробластическая дифференцировка. Первичные легочные фибробласты. TGF-β 1 Регуляция актинового цитоскелета О 2 Н 2 О
Оксидативная модификация белков как возможный механизм АФК-опосредованной передачи сигналов в клетке. ОМ белков путем окисления Cys -остатков SHP. active O 2 (H 2 O 2 ) SOHP. inactive GSH P. reversible SSGтиотрансфераза
Образование внутримолекулярных дисульфидных мостиков Р SH SH H 2 O 2 S SР Изменение активности путем конформационных изменений в структуре белка
Димеризация белков межмолекулярными дисульфидными мостиками: прямая: PK SH SH+ неактивные мономеры H 2 O 2 PK PKS S SS активный димер обратная: PK RP SH SH неактивный комплекс PKH 2 O 2 + RP S S активная РК
Образование дитирозиновых связей: Р Y Y Y+ H 2 O 2 / пероксидаза Металл-катализируемое окисление Fe- или Cu- содержащий Р MFO (ROS) оксидативная модификация Fe- или Cu- содержащий РY 2 Y 2 РР
Методы изучения АФК Люцигенин — хемилюминесцентный субстрат для определения О 2 в клетке. hпроизвдиоксетан. Luc. HLuc O .
DCFH-DADCFDCFHDADCFH ОКИСЛЭСТЕРАЗЫ . DCFH — 2’, 7’-дихлорфлуоресцин — нефлуоресцирующий DCF — 2’, 7’-дихлорфлуоресцеин — флуоресцирующий
Флуориметрический метод, основанный на способности гем-пероксидаз катализировать Н 2 О 2 -зависимую димеризацию замещенных фенольных элементов. Высокая специфичность и чувствительность к Н 2 О 2. Наиболее часто используется пероксидаза хрена.
Электрон-спиновая резонансная спектроскопия — единственный аналитический метод. Метод спиновых ловушек — нитроны или нитрозосоединения.
РЕЗЮМЕ: • АФК не только вредные побочные продукты клеточного метаболизма, но и важные регуляторы жизнедеятельности клетки. • Уровень АФК строго контролируется • Передача сигналов в клетке с помощью АФК осуществляется путем оксидативной модификаций с клеточными компонентами, такими как киназы, белки или ДНК.