Физико-химические свойства аминокислот и белков. Количественные (колориметрические) методы определения концентрации белка
Белки – высокомолекулярные биологические соединения, гетерополимеры α-L-аминокислот © Lenendger, 2004
Классификация аминокислот Gly G Ala A Leu L Pro P Ile I Val V Met M
Полярные, незаряженные боковые радикалы Val Ser V S Gly G Thr T Ala A Cys C Pro P Gln Leu L Asn asparagi. N Q-tamine Ile I Met M
Позитивно заряженные Lys K (before L) Arg Rginine His H
Asp aspar. Dic acid Glu. Etamic acid
Tyr t. Yrosine Phe Fenylalanine Trp t. Wo rings
© Lenendger, 2004
• • Факторы денатурации Повышение температуры Органические растворители Детергенты, мочевина Экстремальные p. H
Цветные реакции на белки и а. к. • Ксантопротеиновая (нитрование концентрированной ароматических а. о. HNO 3 ) • Биуретовая (комплексное соединение пептидных групп с ионами меди) • Диазореакция Паули (гистидин и тирозин реагируют с диазобензолсульфоновой кислотой) • Реакция Эрлиха на серусодержащие аминокислоты • Нингидриновая реакция на свободные аминокислоты
Закон Бугера – Ламберта - Бера A – поглощение I 0 – интенсивность падающего света I – интенсивность прошедшего света С – концентрация поглощающего вещества d – толщина слоя ε - молярный коэффициент поглощения, т. е. поглощение 1 M раствора в кювете с длиной оптического пути 1 см.
Определение концентрации белков • По поглощению белковой молекулы в УФ спектре • С использованием окрашенных комплексов белков: С ионами меди С красителями • Метод Лоури • Метод Брэдфорд (Кумасси G 250) • Биуретовый метод • Метод Флореса (Бромфеноловый синий)
Скачать презентацию Физико-химические свойства аминокислот и белков Количественные колориметрические методы
Занятие1_ФХсвойстваБелков_АК.ppt