ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА Институт медицинской биотехнологии Федерального государственного учреждения науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» КОМПЛЕКСНЫЙ ЛЕЧЕБНОПРОФИЛАКТИЧЕСКИЙ ПРОТИВОВИРУСНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ АНСАМБЛЯ ДВУСПИРАЛЬНЫХ И ОДНОЦЕПОЧЕЧНЫХ РНК АЛИКИН Ю. С , ЛЕБЕДЕВ Л. Р. , ПОДГОРНЫЙ В. Ф. , ВОЛОСНИКОВА Е. А. , ТЕЛЕГИНА Ю. В. БЕРДСК 2009
Несмотря на впечатляющие успехи современной фармакологии и медицины, грипп и другие ОРВИ по-прежнему сохраняют свою эпидемиологическую значимость. .
В настоящее время все большей популярностью в клинической практике пользуются индукторы интерферона, которые при введении в организм вызывают активацию макрофагов и нейтрофилов, натуральных киллеров, стимулируют образование эндогенных цитокинов, усиливают Т- и В-клеточный иммунный ответ. Показано, что дс. РНК при ее применении отдельно или в комплексе с другими противовирусными препаратами усиливают образование активированными макрофагами свободных радикалов азота и кислорода. Двуспиральные РНК взаимодействуют с рецептором TLR-3, находящимся на поверхности клеток, и вызывают интерфероногенез. Фрагменты дс. РНК и оц. РНК взаимодействуют с рецепторами TLR-7, -8, -9 в цитоплазме клеток. Состав и длина цепи РНК влияют на её биологическую активность
В настоящее время в лечебную и исследовательскую практику медицины и ветеринарии внедрены препараты на основе РНК: Ридостин (Вестин), Полирибонат, Провест и Рифастин Эти средства разработаны в ИМБТ ГНЦ ВБ «Вектор» , производство их организовано в ООО «Диафарм» . Препарат Полирибонат представляет собой высокополимерную одноцепочечную РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Препарат Полирибонат повышает содержание Т-лимфоцитов, стимулирует гемопоэз, проявляет иммуноадъювантные свойства при совместном использовании с антибактериальными и противовирусными вакцинами. Препарат Ридостин (Вестин) представляет собой композицию L- и М-форм дс. РНК (вирусоподобных частиц) из киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae и высокополимерной одноцепочечной РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Препарат применяется в качестве противовирусного средства, иммуномодулятора и стимулятора неспецифической резистентности. Препарат Провест представляет собой композицию L- и М-форм дс. РНК (вирусоподобных частиц) из киллерных дрожжей Saccharomyces cerevisiae и высокополимерной одноцепочечной РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae с поливинилпирролидоном, обладающую пролонгированным действием, и применяется в качестве иммуномодулятора и стимулятора неспецифической резистентности. Препарат Рифастин представляет собой композицию L-, M- и S-форм дс. РНК фага φ6, репродуцирующегося в Pseudomonas phaseolicola, и высокополимерной одноцепочечной РНК дрожжей Saccharomyces cerevisiae.
Практическое применение Ридостина в медицине Вид патологии Способ применения Вирусная инфекционная Грипп и ОРВИ Герпес (простой, опоясывающий) Профилактика и лечение генитальный, Лечение Цитомегаловирусная инфекция Лечение Клещевой энцефалит Профилактика и лечение Бактериальная инфекционная Хламидиоз (урогенитальный, офтальмо) Лечение Неинфекционная Сахарный диабет Иммуномодуляция Рассеянный склероз Иммуномодуляция
Практическое применение Вестина в ветеринарии Животное - Вид патологии Способ применения Молодняк КРС -ассоциированные диареи - микоплазмоз -риновирусная инфекция Лечение совместно с пробиотиками (субалин, ветом, бактерин - SL) Лечение совместно с ФНО- и леватетрасульфином Профилактика и лечение Молодняк лошадей - сальмонеллезный аборт Совместно с вакциной мыт лошадей, Поросята-ассоциированные гастроэнтериты классическая чума свиней и сальмонеллез Профилактика и лечение острых вспышек в ранний постнатальный и послеотъемный период повышение эффективности вакцинации Плотоядные: собаки-чума, парвовирусный энтерит, аденовироз, гепатит, пироплазмоз кошки-панлейкопения, кальцевироз и др. Профилактика и этиотропное лечение, предотвращение вторичных инфекций Профилактика и лечение Лабораторные животные: мыши, крысы, морские свинки, кролики, обезьяны Для профилактики в инфекционном вирусном очаге, для получения безвирусных племенных ядер Птицы: цыплята - бройлеры и яйценоских пород Стимулятор роста, профилактика и лечение вирусных заболеваний в племенных ядрах Рыбы Профилактика инфекций и лечение рабдовирусных
Противовирусные эффекты препарата Ридостин (Вестин).
Для дальнейшего рассмотрения данного феномена были получены обогащенные формы L- и М-дс. РНК киллерных дрожжей. В ходе исследований было выявлено, что выделенные формы РНК оказывают различные биологические эффекты. Все препараты дc. РНК вызывают индукцию интерферона в исследованных условиях. Уровень интерферона в крови мышей, которым вводили препарат суммарной дc. РНК и его формы, был значительно выше, чем показатель группы положительного контроля (поли (И): поли (Ц)). L-дс. РНК оказалась в 4, 1 раза более активной в отношении интерферонообразования, а М-дс. РНК в 1, 9 раза, чем исходный препарат. L-дс. РНК оказалась в 2 раза более активной в отношении индукции интерферонообразования, чем М-дс. РНК. Дополнительное исследование показало, что уровень интерферона в сыворотке крови мышей зависит от молекулярной массы препаратов дc. РНК и уменьшается с её снижением. Препарат М-дс. РНК отличался также более выраженной фагоцитозстимулирующей активностью, по сравнению с суммарным препаратом и Lдс. РНК. Эффект индивидуальных форм дс. РНК на пролиферативную активность лимфоцитов носил более пролонгированный характер по сравнению с суммарным препаратом дс. РНК. Несмотря на различающиеся свойства этих двух форм, их сочетанный эффект в препарате Ридостин (Вестин) является выраженным, а сам препарат обладает широким противовирусным спектром.
сыворотках мышей через 5 ч после введения препаратов дц. РНК.
Фагоцитарная активность мышиных Макрофагов после инкубации в среде, содержащей L- и М- формы дц. РНК в различных концентрациях (объект – опсонизированные эритроциты овцы).
Состав и время обработки композиций на основе дц. РНК сывороточными РНК-зами № 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Состав исследуемого препарата дц. РНК вп. РНК, РПГ ПВП мкг (м. м 40 (м. м 20 к. Д), мг 10 10 5 5 5 200 200 5 5 5 - 5 5 5 Время полного гидролиза дц. РНК, мин. 4 -8 >200 120 60 >200 120 >200 60 >200
Совокупность полученных данных свидетельствуют, что эффективность лекарственных средств может быть значительно повышена за счет включения в их состав РНК и ее фрагментов. В работе предлагается направление исследований и разработки средств иммунопрофилактики и лечения вирусных инфекций на основе комплекса двуспиральных и одноцепочечными РНК (дс. РНК и оц. РНК). В связи с этим была проработана схема создания конструкции на основе РНК разной природы, состава и свойств. Примером такого композиционного препарата может быть Рибомикс, представляющий собой ансамбль одноцепочечных и двуспиральных рибонуклеиновых кислот, полученных из эукариотических (киллерный штамм Saccharomyces cerevisiae) и прокариотических микробиологических источников (фаг φ6, паразитирующий на Pseudomonas phaseolicola). Комплекс включает три формы геномной дс. РНК фага Φ 6 (6, 3, 4, 0 и 2, 9 т. п. н. ) и две формы дс. РНК вирусоподобных частиц киллерных штаммов S. cerevisiae (4, 8 и 1, 8 т. п. н. ). Оц. РНК представлены высокополимерными РНК S. cerevisiae, преимущественно рибосомальными. Была исследована интерферониндуцирующая активность препарата Рибомикс в сравнении с оц. РНК, Вестином (Ридостином), L- и M-формами дс. РНК из Saccharomyces cerevisiae. Препарат Рибомикс обладал более выраженной способностью к индукции интерферона в ранние сроки после введения по сравнению с другими препаратами.
Определение интерферониндуцирующей активности препаратов РНК в сыворотках мышей: оц. РНК, - 2, 5 мг/кг; Ридостин, -2, 5 мг/кг (дс. РНК- 0, 5 мг/кг, оц. РНК -2, 0 мг/кг); L-форма дс. РНК, -0, 5 мг/кг; М-форма дс. РНК, -0, 5 мг/кг; Рибомикс, (дс. РНК, - 0, 3 мг/кг); Контроль - изотонический раствор. Контроль оц. РНК Ридостин L-форма М-форма Рибомикс,
Таким образом, показана возможность увеличения биологической и противоинфекционной активности препаратов на основе дс. РНК и оц. РНК, перспективных для лечения инфекций, в том числе гриппа, путем подбора и комбинации разных форм и видов РНК. Предварительные данные показали, что препарат Рибомикс, представляющий собой смесь разных форм дц. РНК, является эффективным индуктором интерферона и отличается длительным эффектом индукции интерферонов.
Спасибо за внимание!
Скачать презентацию ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ
671fbfc50b4ca4c7a0accc7c91206a55.ppt