Фагоцитоз. Опсонины. Опсонофагоцитарный индекс.
Механизмы микробицидности фагоцитов • Кислород зависимые механизмы: «Респираторный взрыв» – усиление потребления кислорода и глюкозы с одновременным выбросом нестабильных продуктов восстановления кислорода: пероксида водорода Н 2 О 2, супероксиданионов О 2, гидроксильных радикалов ОН–. Система миелопераксидаз. • Кислород независимые – через лизоцим, лактоферрин, гидролазы. • Цикл оксида азота (NO–) – промежуточный продукт превращения L-аргинина, токсичен в отношении микробов. Это основной микробицидный фактор при макрофагальном фагоцитозе. • Антиоксидная защита тканей (каталаза, витамин С, Е, ненасыщенные жирные кислоты).
Виды фагоцитоза • Завершенный фагоцитоз, • незавершенный (гонококки, ВИЧ, вирус натуральной оспы). • Механизмы выживания фагоцитированных микроорганизмов: препятствие слияния лизосом с фагосомами (токсоплазмы, микобактерии туберкулеза); устойчивость к действию лизосомных ферментов (гонококки, стафилококки, стрептококки группы А и др. ); покидают фагосому, избегая действия микробицидных факторов (риккетсии и др. ).
Функции фагоцитов: • защитная; • представляющая; • секреторная (ИЛ-1, простагландины, лейкотриены, циклические нуклеотиды, кислородные радикалы, компоненты комплемента, лизоцим, интерферон). Фагоциты участвуют как в неспецифических механизмах, так и в специфических.
Опсонизация
Методы изучения фагоцитарной активности клеток • Фагоцитарные показатели оценивают по числу бактерий, поглощенных или переваренных одним фагоцитом в единицу времени. • Опсоно-фагоцитарный индекс – отношение фагоцитарных показателей, полученных с сывороткой, содержащей опсонины, и контролем.
Постановка реакции • Для реакции необходимы: 1. Антиген - взвесь живых или убитых микроорганизмов. 2. Антитело (опсонины) - исследуемая сыворотка. 3. Фагоциты - обычно нейтрофилы исследуемой крови. • Постановка реакции. С помощью микропипетки в небольшие пробирки наливают 0, 05 мл 2% раствора натрия цитрата; 0, 1 мл исследуемой крови и 0, 05 мл взвеси микроорганизмов, густота которой соответствует в 1 мл 10 ед. мутности по оптическому стандарту ГИСК. Содержимое пробирок перемешивают. Пробирки ставят в термостат на 30 мин, после чего вновь перемешивают их содержимое и готовят тонкие мазки (как мазки крови). Окрашивают по Романовскому - Гимзе.
Опсоно-фагоцитарный индекс Показатель опсонофагоцитарной реакции (ПОФР) вычисляют по формуле: ПОФР = 3 а + 2 б + 1 с + 0, где а - число нейтрофилов, содержащих свыше 41 бактерии; б - число нейтрофилов, содержащих от 21 до 40 бактерий; с - число нейтрофилов, содержащих от 1 до 20 бактерий; 0 - число нейтрофилов, не содержащих бактерии
• Максимальный показатель опсонофагоцитарной реакции при такой системе учета составляет 75. • Результат реакции оценивают по следующей схеме: при ПОФР от 1 до 24 - слабоположительный; при ПОФР от 25 до 49 - ясновыраженный; при ПОФР от 50 до 75 - резкоположительный. • У здоровых людей ПОФР составляет 0 -1, редко 4 -5. Ясновыраженный и резкоположительный результаты реакции говорят о высоком опсонизирующем действии сыворотки обследуемого лица с выраженной активностью фагоцитов крови.
Скачать презентацию Фагоцитоз Опсонины Опсонофагоцитарный индекс Механизмы микробицидности фагоцитов
Фагоцитоз и опсоно-фагоцитарный индекс.ppt