Этапы основных открытий по проблеме ВИЧ-инфекции 1981 г

Этапы основных открытий по проблеме ВИЧ-инфекции 1981 г. Клинические проявления нового заболевания: n пневмоцистная пневмония n саркома Капоши 1982 г. Основное патогенетическое звено: дефицит Т 4 лимфоцитов 1983 г. Открытие ВИЧ-1 (Люк Монтанье – Франция, Роберт Галло – США) 1984 г. Разработка тест систем для ИФА 1985 г. Выделен ВИЧ-2

Глобальная эпидемия С момента начала эпидемии ВИЧ n заразились почти 65 миллионов человек и 30 миллионов человек умерли от заболеваний, связанных с ВИЧ. Около 2 миллионов человек ежегодно умирают от заболеваний, связанных со СПИДом. n

n n ВИЧ – вирус иммунодефицита человека СПИД – синдром приобретенного иммунодефицита (терминальная стадия ВИЧ-инфекции)

Вирус иммунодефицита человека ВИЧ – относится к семейству ретровирусов (Retroviridae), подсемейство медленных вирусов (Lenivirus) n Шарообразный диаметр 100 -150 нм n Сложноорганизованный вирус (суперкапсид) n Капсид конусообразной формы, напоминает «футляр» , в котором хранятся 2 молекулы РНК, ферменты ревертаза, интеграза, протеаза.

ВИЧ-1 Трансмембранный гликопротеин (gp 41) Шипы оболочечного гликопротеина (gp 120) Белок клетки хозяина Обратная транскриптаза Липидный слой Нуклеокапсид (оболочка) (p 17) РНК, окруженная белком (p 7/p 9) рибонуклеиновый протеин (p 24)

Антигенная структура Типы антигенов ВИЧ-1 ВИЧ-2 Группоспецифич еские (gag) p 24 p 26 Типоспецифическ ие (gp) gp 160: gp 41 gp 120 gp 140: gp 36 gp 105

Рецепторы клеток, необходимые для прикрепления и проникновения ВИЧ n Рецептор CD 4 n Корецепторы CCR 5 и CXCR 4

n Корецептор CCR 5 важен для установления инфекции n Лица, у которых в результате мутации синтезируется дефектный CCR 5, резистентны к ВИЧ-инфекции. n В Европе приблизительно 1% населения резистентны к ВИЧ-инфекции

Клетки мишени ВИЧ n n n n ВИЧ инфицирует клетки, несущие на своей поверхности CD 4 рецептор и корецепторы CCR 5 и CXCR 4 Th (helper) лимфоциты, моноциты, макрофаги, фолликулярные дендритные клетки, клетки островков Лангерганса, клетки микроглии мозга

Клетки мишени ВИЧ n n n n CD-негативные клетки, обладающие хемокиновыми рецепторами (CCR 5 и CXCR 4): астроциты мозга, эпителий шейки матки, почечный эпителий, эпителий кишечника, эндотелиальные клетки капилляров мозга и шейки матки, клетки роговицы глаза

Слияние ВИЧ: Этап 1 - Прикрепление Приближение Рецептор Ко-рецептор

Этап 2: Связывание с ко-рецептором Внедрение и «зацепление» Конформационные изменения Домены gp 41 После внедрения gp 41 «скручивается» и сцепляет мембраны вируса и клетки

Этап 3: Слияние После внедрения gp 41 «скручивается» и сцепляет мембраны вируса и клетки

ВИЧ проникает в Т-клетку

Жизненный цикл ВИЧ Обратная транскрипция (обратная транскриптаза) РНК > ДНК протеаза Выход Сборка Прикрепление Слияние мембран Транслокация ДНК в ядро клетки Раздевание вируса Транскрипция провирусной ДНК (РНКполимераза) Созревание интеграция ДНК Синтез вирусных белков Транспорт м. РНК ВИЧ

Результат взаимодействия вируса с клетками n В результате взаимодействия с ВИЧ гибнут: • Th-лимфоциты • Клетки нейроглии мозга (астроциты) n n В-лимфоциты подвержены неспецифической поликлональной активации Моноциты, макрофаги, клетки островков Лангерганса, фолликулярные дендритные клетки в результате взаимодействия с ВИЧ не разрушаютcя, являясь резервуаром вируса

Стадии инфекционного процесса n n n Общая продолжительность — в среднем 10 лет. Инкубационный период 3 нед-1, 5 мес Продромальный период — до 1 мес (37°С, восп. лимф. узлов) Латентный период. (увеличение лимф. узлов) Стадия вторичных проявлений — 1 -2 года — начало угнетения клеточного иммунитета. Терминальная стадия — СПИД 1 -2 года

Терминальная стадия — СПИД n Генерализованная лимфаденопатия n Похудание n Перемежающаяся лихорадка n Утомляемость n Хроническая диарея n Лейкопения, Анемия n Деменция n Генерализация оппортунистических инфекций и опухолей.

ТЕЧЕНИЕ ВИЧ-инфекции Первичная инфекция Сероконверсия Промежуточная стадия СПИД 1, 000 Количество CD 4 -клеток 4 -8 недель 5 -10 лет 500 1 год Количество CD 4 - клеток Количество копий РНК ВИЧ в плазме крови

Ассоциации между появлением оппортунистическими инфекциями и уровнем CD 4 лимфоцитов Число CD 4 лимфоцитов кл/ml Герпетические инфекции (Herpes zoster) Туберкулез Кандидоз полости рта Пневмоцистная пневмония Кандидоз пищевода Герпетические инфекции (Herpes simplex) Токсоплазмоз, криптококкоз, кокцидиоидозный микоз МАК-комплекс, ЦМВ инфекция Время

Структура ВИЧ-инфицированных с установленным диагнозом СПИД по индикаторным заболеваниям в России Материалы ФНМЦ по профилактике и борьбе со СПИДом, 2007

Диагностика n n n ИФА Иммунный блоттинг ОТ-ПЦР Кол-во CD 4 и соотношение CD 4/CD 8 Вирусологический метод

Лабораторные маркеры в течение ВИЧ-инфекции lg сероконверсия латентный период 1000 клеток/мм куб. СПИД РНК копий/мл РНК анти Р 24 P 24 антиген анти gp 41 CD 4 9 8 7 6 5 4 3 2 1 10 50 150 дни __________________________ годы

Диагностика n n ИФА - определение суммарного спектра антител и р24 антигена Иммунный блоттинг - определение антител к отдельным антигенам вируса и наличие р24 антигена ВИЧ.

Полоски-стрипы из блота. Чтение результатов n В положительном контроле и исследуемом образце присутствуют полосы: • • • gp 160 (поверхностные структуры Gp 120 p 55 (белок-предшественник) p 51, p 65 (обратная транскриптаза) envgp 41 (трансмембранный белок) • polp 31 (интеграза) • P 24 • gagp 17,

Диагностика ВИЧ ПЦР n n n Обладает меньшей точностью (ок. 95 %), чем ИФА, однако может быть использован уже спустя 10 дней после возможной передачи вируса. В связи с изменчивостью вируса при первичной постановке диагноза не используется По результатам ПЦР диагноз не ставится.

Диагностика ВИЧ ПЦР n n n Применяется в случаях, когда желателен ранний предварительный результат (до истечения 3 месяцев) или иммунный ответ не может служить показателем: у новорожденных, у пациентов, проходивших иммунносупрессорную терапию Для оценки эффективности лечения Определения формирования резистентности к препаратам противовирусной терапии

Вирусологический метод n n n ВИЧ культивируется в культуре клеток Тлимфоцитов с добавление ИЛ-2, вызывая ЦПЭ в виде симпластообразования Рост фиксируют через 1 -2 нед (активность обратной транскриптазы или р24) Гемагглютинирующими свойствами не обладает

Нуклеозидные/нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (НИОТ) § абакавир (ABC) § диданозин (dd. I) § ламивудин (3 TC) § ставудин (d 4 T) § § § тенофовир (TDF) зальцитабин (dd. C) зидовудин (ZDV, AZT) Механизм действия § Активизируются через фосфорилирование с участием клеточных ферментов § Конкурентно ингибируют синтез вирусной ДНК § Обратная транскриптаза (ОТ) внедряет НИОТ в цепочку вирусной ДНК, замыкая дальнейший синтез ДНК

Ненуклеозидные/нуклеотидные ингибиторы обратной транскриптазы (ННИОТ) n n Невирапин (NVP) Ифавиренц (EFV) Механизм действия: n неконкурентное ингибирование обратной транскриптазы ВИЧ

Ингибиторы протеазы n n n n Индинавир (IDV) Саквинавир (SQV) Ритонавир (RTV) Нельфинавир (NFV) Ампренавир (APV) Лопинавир/ритонавир (LPV/RTV) Атазанавир (ATV) Механизм действия: § связываются с активным участком протеазы

Ингибиторы фузии (ингибиторы слияния) n Энфувиртид (T-20) Механизм действия: § Предотвращает проникновение ВИЧ внутрь клетки

Estimated number of Life-years added due to antiretroviral therapy, by region, 1996– 2008 8 7. 2 million 7 (millions) 6 5 4 3 2. 3 million 2 1. 4 million 1 590 000 73 000 40 000 49 000 7500 0 Western Europe and North America Sub. Saharan Africa Latin America Asia Caribbean Eastern Europe and Central Asia Figure VII Oceania Middle East and North Africa

Критерии эффективности АРВ терапии n n n Снижение вирусной нагрузки (менее 400 копий/мл) Увеличение количества CD 4+лимфоцитов более чем на 50 клеток/мкл через 1 год от начала АРВ терапии Отсутствие новых серьезных вторичных заболеваний спустя 3 месяца после начала АРВ терапии.

Резервуар и источник инфекции- инфицированный человек Наибольшую эпидемиологическую опасность представляют: • Кровь • Сперма • Вагинальная жидкость В них вирус находится в наибольшей концентрации n n Для заражения необходимо попадание в организм 0, 1 мл крови, содержащей инфицированную дозу

Резистентность вируса n ВИЧ сохраняется: • При комнатной температуре – 4 суток • В высохшей крови –до 2 недель • Замороженной сперме –месяц • Донорской крови - годы

Рассчитанный риск заражения ВИЧ-инфекцией при разных типах однократного контакта Форма контакта Риск на 10 000 контактов Риск, % 9250 92, 5 1500— 3000 15— 30 Использование общих игл и шприцев для введения наркотиков 80 0, 80 Анальный половой контакт: пассивный партнер 50 0, 50 Чрескожный укол иглой 30 0, 30 Контакт со слизистой оболочкой 10 0, 10 Вагинальный половой контакт: женщины 1 -15 0, 01 -0, 15 Вагинальный половой контакт: мужчины 5 0, 05 Оральный половой контакт: пассивный партнер 1 0, 01 Переливание крови Передача ВИЧ от матери ребенку

Что делать при заражении n Сократить время контакта n Сразу вымыть поврежденное место с мылом. n n В отсутствие проточной воды обработать поврежденное место дезинфицирующим гелем Нельзя использовать сильнодействующие средства: спирт, отбеливающие жидкости и йод n Нельзя сдавливать или тереть поврежденное место. n Нельзя отсасывать кровь из ранки, оставшейся от укола. n Нельзя накладывать повязку.

Резистентность вируса n n n 70% этанол убивает вирус в течение нескольких секунд в течение 5 -10 минут инактивируется при комнатной температуре под влиянием: 10% хлорной извести, 50% этанола, 0, 5%лизола, 0, 3% перекиси водорода, УФ излучения, ионизирующей радиации Лиофилизированные кровяные продукты необходимо прогревать при 68 С в течение 72 часов