Энтеробактерии СПб. ГУ 2013 Энтеробактерии Электронограмма E.

Энтеробактерии СПб. ГУ 2013

Энтеробактерии Электронограмма E. coli

Литература • • • Учебники, монографии и учебно-методические пособия: 1. В. М. Бондаренко, Т. В. Мацулевич. Дисбактериоз кишечника как клинико-лабораторный синдром. М. : ГЭОТАР-Медиа. 2007. 300 стр. 2. А. И. Коротяев, С. А. Бабичев. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология. СПб. : Спец. Лит. 2000. 600 стр. 3. А. С. Лабинская, Л. П. , Блинкова, А. С. Ещина. Частная медицинская микробиология. М. : Медицина. 2005. 600 стр. 4. А. В. Пиневич. Микробиология. Биология прокариотов. В 2 -х том. СПб. : СПб. ГУ. 2007. 350, 330 стр. 5. О. К. Поздеев. Медицинская Микробиология. М. : ГЭОТАР-Медиа. 2005. 765 стр. 6. О. В. Рыбальченко, В. М. Бондаренко, В. П. Добрица. Атлас ультраструктуры микробиоты кишечника человека. СПб. : ИИЦ ВМА. 2008. 112 стр. с ил. 7. Современная микробиология. Прокариоты. Под ред. Й. Ленгелера, Г. Древса, Г. Шлегеля. М. : Мир. 2005. в 2 -х том. 655, 495 стр. 8. Покровский Медицинская микробиология 9. О. К. Поздеев, Р. В. Федоров, Энтеробактерии, М. : ГЭОТАР-Медиа, 2007, 720 стр. 10. О. В. Рыбальченко. Энтеробактерии-возбудители инфекционных заболеваний человека. – СПб. : Изд-во С. -Петерб. ун-та, 2003, 118 с.

Энтеробактерии 1. Нормальная микрофлора кишечника (enteron) человека 2. Патогенные - возбудители ОКИ 3. Условно-патогенные - гнойновоспалительные процессы различной локализации 4. Сапрофиты растений и животных

Наибольшую значимость имеют энтеробактерии в качестве возбудителей: • острых кишечных инфекций • Гнойно-воспалительных инфекций • внутрибольничных инфекций (ВБИ)

Таксономия энтеробактерий: 30 родов • 1. Escherichia типовой род • 2. Shigella • 3. Salmonella • 4. Citrobacter • 5. Klebsiella • 6. Enterobacter • 7. Edwardsiella • 8. Erwinia • 9. Serratia • 10. Hafnia • 11. Proteus • 12. Providencia • 13. Morganella • 14. Yersinia

Патогенные энтеробактерии • 1. • 2. • 3. • 4. • 5. Escherichia – отдельные штаммы Shigella Salmonella Yersinia Klebsiella – часть видов

Энтеробактерии Распространение • П О В С Е М Е С Т Н О: • свободноживущие • в ассоциации с человеком, животными, растениями • в почве • в воде • на овощах • на фруктах • на зерне • на цветах • на деревьях

Энтеробактерии – этиологический фактор заболеваний человека • Тиф • Паратифы А и В • Бактериальная дизентерия • Псевдотуберкулез, • кишечные токсикоинфекции (гастроэнтериты, энтероколиты) • чума

Энтеробактерии названия заболеваний • Escherichia -эшерихиозы • Shigella -шигеллезы • Salmonella -сальмонеллезы • Yersinia -иерсиниозы • Основной путь заражения – пищевой (алиментарный)

Энтеробактерии Возбудители ВБИ • 1. Escherichia • 2. Klebsiella • 3. Enterobacter • 4. Serratia • 5. Proteus

Энтеробактерии - возбудители оппортунистических инфекций • Менингит, сепсис, энцефалит, пиелонефрит, цистит, холецистит, пневмония, конъюнктивит, офтальмит, ожоговые и раневые осложнения у хирургических больных

Таксономия сем. Enterobacteriaceae • Семейство→Род →Вид →Подвид → • Серогруппа →серовар

Общая характеристика сем. Enterobacteriaceae • • • Морфологические свойства Окраска по Граму– Не образуют спор и цист Средние размеры: ширина 0, 5 мкм, длина 1, 5 – 2 мкм (варьирует) Микрокапсула Истинная капсула – только у Klebsiella

Подвижность энтеробактерий • Жгутики у большинства • • Всегда неподвижны: • Shigella • Klebsiella • Пили практически у всех

• • • Культуральные свойства энтеробактерий О/F –тест (+/+) Каталаза+ Оксидаза – Не галофилы Рост на средах: Среда ЭНДО, Среда Мак. Конки (Плоскирева), Среда Левина, S-S агар, висмут-сульфит агар

Общая схема лабораторной диагностики ОКИ (определение принадлежности к сем. Enterobacteriaceae) 1. Световая микроскопия – соответствующие морфологические признаки 2. Биохимические тесты: • О/F тест (+/+) Все ЭБ ферментируют Д-глюкозу с образованием кислоты и газа или кислоты • ферментация ряда углеводных сред - «пестрый ряд» (сахароза, лактоза, манноза и т. д. ) • Выявление фермента каталазы, у всех ЭБ каталаза +, т. к. у них есть ферменты цитохромной цепи, кроме S. dysenteriae O гр 1 и Xenorhabdus nematophilus • Определение оксидазной активности – должна отсутствовать • Выявление нитратредуктазной активности - почти все ЭБ редуцируют нитраты в нитриты

Идентификация ЭБ • Определение до рода: • Ферментативная активность (ряд субстратов) • Определение до вида и серогруппы: • 1. серотипирование • 2. фаготипирование • 3. колицинотипирование

Характеристика основных родов сем. Enterobacteriaceae • 1. род Escherichia - санитарно- показательные микроорганизмы, свидетельствующими о фекальном загрязнении объектов внешней среды и продуктов

род Escherichia • Среда обитания- кишечник человека и животных→почва, вода →пищевые продукты • Заболевания-после АМ-терапии • У детей тяжелая диаррея • Парентеральные формы заболеваний в урогенитальном и респираторном трактах • Гнойные процессы различной локализации- маститы, флегмоны • Септицемии на фоне локальной инфекции

Таксономия р. Escherichia • E. • Е. • E. coli (типовой вид) blattae - неподвижны hermanii fergusonii vulneris

Морфологические свойства E. сoli • Грамотрицательные палочки • Микрокапсула • Перитрихиальные жгутики (3 -7) • Пили • Не образуют спор и цист

Род Escherichia Морфологические свойства Окраска по Граму

Морфология E. coli Движение за счет жгутиков

Морфология E. coli Пили (фимбрии), электронная фотография

Культуральные свойства E. coli • Факультативные анаэробы • S – формы колоний • R – формы колоний • 37ºС • р. Н среды 7, 2 -7, 4 • Питательные среды: • ЭНДО, Плоскирева, Левина

Культуральные свойства E. coli S-форма колоний на плотной питательной среде

Биохимические свойства E. coli На среде ЭНДО лактозоположительные E. coli образуют колонии темнокрасного цвета с металлическим блеском

Антигенные свойства E. сoli • ~ 150 типов О-АГ - соматических • ~100 типов К-АГ – капсульных • 83 типа Н-АГжгутиковых О 156: К 5: Н 7

Лабораторная диагностика при эшерихиозах • 4 наиболее важных признака • Способность: • 1. к ферментации лактозы (у большинства +) • 2. к продукции индола • 3. к утилизации ацетата Na (шигеллы не могут) • 4. неспособность расщеплять цитрат Na на среде Симмонса

Деление E. coli на группы по патогенности и проявлению клинических симптомов 1. Энтеропатогенные ЭПКП (Enteropathogenic EPEC) – энтериты у маленьких детей до 2 -х лет 2. Энтероинвазивные ЭИКП (Enteroinvasive EIEC) дизентериеподобные заболевания у детей и взрослых 3. Энтеротоксигенные ЭТКП (Enterotoxigenic ETEC) холероподобные заболевания у детей и взрослых 4. Энтерогеморрагические ЭГКП (Enterohemorragic EHEC) энтерогеморрагический колит 5. Энтероагрегирующие ЭАКП (Enteroaggragative EAEC) – у детей и взрослых низкая инфицирующая доза 6. Диффузно-агрегирующие (ДАКП) – новая группа

Чувствительность E. coli к АМП • ампициллин • имипенем • аминогликозиды • цефотенам • цефоперазон препараты резерва: азтреонам, ципрофлоксацин, бисептол.

Род Shigella

Род Shigella заболевания • Бактериальная дизентерия • Клинические проявления зависят от: • 1. вида шигелл • 2. путей и способа заражения • 3. резистентности макроорганизма

Поражение различных отделов кишечника при дизентерии

Поражения толстой кишки при дизентерии

Таксономия рода Shigella • S. dysenteriae (15 сероваров: А 1…А 15) • S. flexneri (6 сероваров: В 1…В 6) • S. boydii (19 сероваров: С 1…С 19) • S. sonnei (1 серовар)

Род Shigella Морфологические свойства Главный признак – отсутствие жгутиков

Пили у шигелл (слева) жгутики у сальмонелл (справа)

Род Shigella Культуральные свойства • Опт. 37ºС • Диапазон 10 -45 ºС • р. Н 7, 2 • В воде сохраняют жизнеспособность в течение 5 -14 ч

Род Shigella Культуральные свойства • Рост шигелл на МПА: диаметр колоний 1, 5 -3, 0 мм • S – формы колоний – гладкие с ровным краем • R – формы колоний – шероховатые с неровным краем

Диагностика шигелл • 1. Определение подвижности • 2. Неспособность утилизации цитрата натрия на среде Кристенсена (вариант среды Симмонса ) • 3. пробы с поливалентными сыворотками • 4. пробы с поливалентными фагами

Культуральные свойства КП (+) и шигелла (-) на среде Кристенсена

Шигеллезный бактериофаг K II

Антигенные свойства шигелл • 1. О-АГ – соматический • 2. К-АГ – капсульный

Факторы патогенности шигелл • Адгезия • Инвазия • Внутриклеточное размножение • Токсины: 2 типа токсинов • 1. Эндотоксин • 2. Экзотоксин – токсин Шига

Факторы патогенности бактерий р. Shigella Подавление синтеза белка токсином Шига (stx) Токсин состоит из ферментативно активной (А) и пяти связывающих (В) субъединиц, проникает в клетку с помощью глоботриазилцерамидного (Gb 3) рецептора. Субъединица А, действуя подобно N-гликозидазе, отщепляет адениновый остаток от 23 S р. РНК и останавливает синтез белка

Чувствительность представителей рода Shigella к АМП • бисептол • ампициллин • тетрациклин • аминогликозиды (гентамицин, сизомицин, амикацин, тобрамицин) • фторхинолоны (ципробай, цифран) • Устойчивость к левомицетину

Род Salmonella Окраска по Граму

Таксономия рода Salmonella • 1. S. enterica: Включает 5 подвидов: • S. enterica subsp. enterica • S. enterica subsp. salamae • S. еnterica subsp. arizonae а). лактозо-, в). лактозо+ • S. еnterica subsp. hautenae • S. еnterica subsp. indica 2. S. bongori

Род Salmonella Морфология Перитрихиальные жгутики

Род Salmonella Культуральные свойства Salmonella typhi на висмут-сульфит агаре. Колонии, в которых бактерии продуцируют H 2 S, окрашены в черный цвет

Деление сальмонелл на серогруппы (по О-АГ) и на серовары (по О- и Н-АГ) • • По схеме Кауфмана-Уайта делят на 67 серогрупп, включающих 2501 серовар

Чувствительность представителей рода Salmonella к антимикробным препаратам • левомицетин • фторхинолоны • ципрофлоксацин • ампициллин • бисептол

Учебно-методические пособия • 1. А. Г. Марков, О. В. Рыбальченко, Л. А. Слепых, Методические указания по написанию курсовых работ. • 2. Ерофеев Н. П. , Рыбальченко О. В, Орлова О. Г. с соавт. Написание курсовых работ • 2. О. В. Рыбальченко, Энтеробактерии • 3. О. В. Рыбальченко, О. Е. Пунченко, Энтеробактерии • 4. О. Е. Пунченко, О. В. Рыбальченко, Стрептококки • 5. Е. И. Ермоленко, О. В. Рыбальченко, Орлова О. Г. …Лактобактерии…