Энтеробактерии Эшерихии шигеллы Общая характеристика семейства энтеробактерий

Энтеробактерии. Эшерихии, шигеллы

Общая характеристика семейства энтеробактерий Согласно систематики Берги включаются в 5 группу, которая объединяет 30 родов. Семейство энтеробактерий объединяет небольшие, грамотрицательные, неспороносные палочки, подвижные или неподвижные, способны образовывать капсулу. Обладают свойством полиморфизма.

Факультативные анаэробы, хемоорганотрофы, обладают дыхательным и бродильным типами метаболизма. Хорошо растут на простых питательных средах, при температуре +37 о. С. Метаболически активны. Быстро ферментируют глюкозу с образованием кислоты или кислоты и газа.

Оксидазоотрицательны, каталазоположительны, восстанавливают нитраты до нитритов.

Наибольшее значение в патологии человека имеют представители родов: Escherichia, Shigella, Salmonella, Yersinia, Proteus, Klebsiella, Citrobacter , Enterobacter, Hafnia, Erwinia и др.

Способны вызывать заболевания желудочнокишечного тракта, оппортунистические инфекции, а также инфекции мочевыводящих, дыхательных путей, раневые, внутрибольничные.

Патогенные эшерихии Впервые выделены в 1885 г. исследователем Т. Эшерихом. Включены в состав рода Escherichia

Патогенные эшерихии Острые кишечные заболевания (эшерихиозы)

Морфология прямые палочки размером от 2 до 6 мкм. В мазках располагаются одиночно или парами, в старых культурах могут выглядеть как коккобактерии. Могут быть как подвижны, так и неподвижны.

Антигенная структура Кишечные палочки различают по структуре поверхностных АГ. Выделяют следующие группы АГ: О- соматический (липополисахаридный), К- поверхностный-(капсульный), Н- жгутиковый. Выделено 170 разновидности по О-АГ, 56 по Н-АГ, по К-АГ выделяют 100 сероваров. Ведущим является тестирование по О-АГ.

О-АГ Термостабилен; Липополисахарид; Более 170 разновидностей (О 1, О 2, …); Факторный состав: – ‘а’ - общий фактор; – ‘в’, ‘с’… - дополнительные (О 111 ав, O 111 ас, О 128 а, О 128 ав, 128 ас)

К - антигены А- Термостабилен (121 о. С, 2 часа). В- Термолабилен (100 о. С, 1 час). L- Термолабилен (100 о. С, 1 час).

Для обозначения всех типов К- антигена используется единая сквозная нумерация. Описано более 100 разновидностей (К 1, К 2…).

Н - антиген Белковый; Термолабильный жгутиковый антиген; Более 50 разновидностей (Н 1, Н 2…); Свежевыделенные штаммы обычно слабо подвижны и обладают малым количеством Н-антигена.

Классификация патогенных кишечных палочек по Аг свойствам и клиническим проявлениям вызываемых ими заболеваний предложена в 1960 г. Новгородской. В последующем классификация была переработана и дополнена.

Число Варианты варианто в Энтеропатогенные 20 О 55; О 111; (ЭПКП) D 119; O 127; O 128 Энтеротоксигенные 70 Об; O 78; (ЭТКП) O 153 Энтероинвазивные 8 O 28; O 112; (ЭИКП) O 124; O 136 Энтерогеморрагически 5 О 157: Н е (ЭГКП) 7; О 26; ОШ; О 145 Энтероадгезивные 1 Е, coli

Культуральные свойства Хорошо растут на простых питательных средах, р. Н 7, 0 -7, 4. На плотных средах образуют плоские, выпуклые колонии, чаще S-формы серо-белого цвета. На среде Эндо- яркие малиновые колонии с характерным металлическим блеском. На среде Левина образуют темносиние колонии с металлическим блеском, на среде Плоскирева- бледно розовые. На Плоскиревакровяном агаре могут бразовывать зоны гемолиза. В МПБ вызывают помутнение среды с образованием осадка.

Резистентность. Диареегенные кишечные палочки высокоустойчивы к физическим и химическим воздействиям. Длительно сохраняют свою жизнеспособность на объектах окружающей среды (в почве сохраняются до 6 мес. , воде- 300 дней), сравнительно быстро гибнут под действием дезинфектантов. Губительно действует 2% раствор активного хлора, 2, 5 % раствор формальдегида.

ЭПКП- патогенез обусловлен адгезией бактерий и повреждением микроворсинок.

ЭПКП

ЭИКП- способны проникать и размножаться в клетках эпителия. Разрушают микроворсинки энтероцитов.

ЭТКП способны образовывать термолабильный и термостабильный энтеротоксин. Неинвазивные, размножаются на поверхности слизистой без повреждения эпителия.

ЭГКП –Выделяют мощный шигаподобный токсин

Формы инфекционного процесса, обусловленного ЭГКП § Носительство § Неосложненная диарея § Геморрагический колит § Гемолитико-уремический синдром § Тромботическая тромбоцитопеническая пурпура

ЭАГП – аггрегация и адгезия на поверхности слизистой кишечника, – продукция цитотоксина Основные серовары 03: Н 2; О 15: Н 18; О 44: Н 18; 086: NM; О 77: Н 18; О 111: Н 21; О 127: Н 2;

Бактерии, продуцирующие Шигаподобные токсины § S. dysenteriae 1 [Stx] § E. coli (более 60 сероваров из более (более чем 32 серогрупп) [Stx 1 или/и Stx 2] серогрупп) § Citrobacter freundii [Stx 2] § Aeromonas hydrophila, A. caviae hydrophila, [Stx 1] § Enterobacter cloacae [ген stx 2]

Патогенез Источник заражения – человек, больной или носитель. Пути заражения фекально-оральный, бытовой (через медоборудование, аутоинфекция). Большое значение имеет быстрое распространение патогенных плазмид среди родственных микроорганизмов.

В случае нарушения проницаемости нормальных анатомических барьеров E. coli может распространяться и поражать подлежащие ткани.

Иммунитет Местный и гуморальный. Группоспецифический, типоспецифический, слабый, возможны повторные заболевания.

Лабораторная диагностика осуществляется бактериологическим методом.

Выделение E. coli O 157: H 7 - Посев на дифференциальную среду с сорбитом

Серотипирование Агглютинация на стекле Реакция латекс-агглютинации

Выявление токсинов еакция латекс-агглютинации – E. coli LT – VT 1 и VT 2 Иммуно-ферментный метод – E. coli ST

Методы дифференциации кишечных палочек Выявление факторов вирулентности: § адгезии к клеткам, например НЕр-2; § продукции токсинов в изолированной петле к-ка кролика, на культуре клеток, иммунологическими методами; § выявление инвазивности на культуре клеток и пр. § Детекция генов вирулентности с помощью генных зондов, ПЦР и др. § Определение антигенных маркеров путем серотипирования

Ферментация углеводов на среде Клиглера кишечной палочкой

Специфическое лечение заболеваний биопрепаратами: бифидумбактерин, лактобактерин, коли-протейный бактериофаги др. Перед их приемом необходимо снижать кислотность желудочного сока ( минерально-гидрокарбонатная вода)

Возбудители дизентерии объединены в род Shigella, семейства Enterobactereaceaе. По данным ВОЗ от дизентерии в мире умирает около 1 млн. человек в год.

Возбудители дизентерии выделены в чистой культуре в 1891 г. А. В. Григорьевым, их изучение провели исследователи Шига (1898), Флекснер (1900) и Зонне (1915) и др.

морфология микробы сходны между собой имеют свойства характерные для всех представителей семейства: это, грамотрицательные палочки. Их морфологическая особенность не подвижны

Антигенная структура представлена О-антиген - соматический, термостабильный, групповой и термостабильный, К-антиген - типовой, термолабильный.

международная классификация шигелл (1982 г. ) Снована на АГ структуре возбудителей: выделяют 4 подгруппы А, В, С, Д Подгруппа А – Sh. dysenteriae: 1 -12 Sh. dysenteriae: сероваров 1 - шигелла Григорьева-Шига Важным дифференцировочным тестом среди шигелл подгруппы А является отношение к манниту.

Подгруппа В- Sh. flexneri: 1 -8 сероваров Sh. flexneri: Внутри группы выделяют субтипы, которые обозначают индексами (а, в) Подгруппа С- Sh. boydii : 1 -18 Sh. сероваров Подгруппа D- Sh. sonnae : сероваров Sh. нет. Выделяют биовары

биохимические свойства хемоорганотрофы с дыхательным и ферментативным метаболизмом. Оксидазо-отрицательны, каталазоположительны. Углеводы каталазоположительны. разлагают с образованием кислоты. Ферментативная активность ниже чем у кишечных палочек.

Культуральные свойства растут на простых питательных средах. Факультативные анаэробы. Температурный оптимум роста 37 градусов. На плотных средах образуют гладкие и шероховатые колонии, полупрозрачные. Могут образовывать R-формы колоний с шероховатой поверхностью. Дифференциально-диагностическим является рост на средах Эндо, Плоскирева, среде Мак-Конки. Плоскирева, Мак-Конки. Шигеллы на этих средах образуют бесцветные колонии.

Среда Плоскирева Элективно-дифференциальная среда – элективные факторы: соли желчных кислот бриллиантовый зеленый йод – дифференцирующий фактор лактоза Особенность - подавление S. dysenteriae 1

Среда с антибиотиками (по А. Б. Черномордик) Элективно-дифференциальная среда – основа - среда Плоскирева, ЭНДО или Плоскирева, ЭМС – элективные факторы тетрациклин или левомицетин или тетрациклин+левомицетин Особенности - антибиотик и его концентрация выбираются в соответствии с характеристикой штаммов, циркулирующих на данной территории

На жидких средах S- формы колоний дают равномерное помутнение, Rформы- дают придонный осадок, при этом среда остается прозрачной.

Резистентность Малоустойчивы к действию физических, химических и биологических факторов. В воде, почве, пищевых продуктах жизнеспособны от 5 до 14 дней. Наиболее чувствительны к воздействию Sh. dysenteriae, а Sh. dysenteriae, наиболее резистентны Sh. sonnae. В высушенных и замороженных фекалиях остаются жизнеспособными в течение нескольких месяцев.

серовар -шигелла Григорьева-Шига, доза заражения равна 10 микробным клеткам, наиболее патогенен из всех известных дизентерийных микробов. Shigella Flexneri - менее патогенный возбудитель. Для инфицирования требуется около 100 микробных клеток, но этот вид более устойчив во внешней среде

Shigella Sonnei - самая устойчивая из всех возбудителей дизентерии, размножается в продуктах питания. Инфицирующая доза 10 млн. клеток.

Токсины шигелл обладают выраженным энтеротропным действием Экзотоксин Shigella Григорьева - Шига является ядом белковой природы, состоит из компонентов А и В. Основными фракциями его являются: цитотоксин, способный повреждать цитотоксин, эпителиальные клетки (необратимое нарушение синтеза белка и гибель клетки) энтеротоксин - усиливает секрецию жидкости эпителием кишки(нарушает всасывание Na+ и Na+ воды , что приводит к накоплению жидкости в подслизистой оболочке толстого кишечника) Экзотоксин Shigella Григорьева – Шига обладает гемолитической и нейротропной активностью.

ПАТОГЕНЕЗ входные ворота - желудочно-кишечный тракт. Инкубационный период в среднем от 1 до 5 дней В патогенезе дизентерии выделяют 2 фазы. микробы проникают в эпителий слизистой преимущественно в дистальном отделе тонкой кишки, здесь выделяют эндотоксин, что и вызывает клиническую картину, которая зависит от массивности инфицирующей дозы клеток.

2 фаза : поражение преимущественно дистального отдела толстой кишки. Благодаря своей энтеротропности шигеллы способны адсорбироваться на поверхности слизистой, проникать в эпителиальные клетки, преимущественно колоноциты, где размножаются, при этом в колоноциты, клетках происходят необратимые деструктивные процессы и развивается очаговые поражения кишечника.

Вырабатываемый токсин оказывает и общее действие: развитие интоксикационного синдрома, крайней степенью выраженности которого является развитие инфекционно-токсического шока. Третий фактор в патогенезе аллергический фактор. Чем выше аллергическая настройка организма, тем выше вероятность развития хронических форм инфекции и осложнений.

Иммунитет После перенесенного заболевания формируется непродолжительный (412 мес. ) видо- , типо и вариантовидоспецифический иммунитет. Многообразие возбудителей также определяет возможность для повторного заболевания, реинфекции, суперинфекции.

АТ к АГ возбудителю дизентерии возникают в 1 -ю неделю заболевания и достигают максимума на 2 -й неделе. Возбудители дизентерии способствуют усугублению состояния иммунодефицитности. (снижается количество циркулирующих Т- и В- лимфоцитов, возможно развитие аутосенсибилизации) Наиболее часто аутосенсибилизации) появляются антитела к клеткам толстой кишки (уже в первые дни болезни) и достигают максимального напряжения на второй неделе.

Клинические варианты Острая дизентерия – колитический – гастроэнтероколитический – гастроэнтеритический Хроническая дизентерия – рецидивирующая – непрерывная Бактериовыделение – субклиническое – реконвалесцентное

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА Бактериологический Серодиагностика Аллергодиагностика

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА Основной метод диагностики бактериологический: исследование фекалий с последующим выделением и идентификацией возбудителя по биохимическим и серологическим свойствам в реакции агглютинации с поли- моновалентными сыворотками и определением чувствительности к бактериофагам.

Для ускоренной диагностики Используют: РИФ , ИФА, иммуноабсорбцию Серологическое исследование рассматривают как дополнительное, когда не удается выделить культуру возбудителя при наличии клинической картины или в тех случаях когда больной принимал антимикробные препараты.

Серологическая диагностика осуществляется в постановке РНГА (диагностический титр 1/200) или развернутой реакции агглютинации с моновалентными диагностикумами. Кровь нужно брать с 5 -го дня максимальные титры на 2 -й неделе болезни. Исследование проводится в динамике.

Аллергологический метод: проба с дизентерином имеет ограниченное применение

Этиотропная терапия проводится нитрофурановыми препаратами(фуразолидон), Возможно применение других антимикробных препаратов (триметоприм). К антибиотикам часто формируется резистентность.

Специфическая терапия проводится поливалентными бактериофагами ( в сухом, жидком виде или свечей )

Благодарим за внимание!