ДИПЛОМНАЯ РАБОТА ПО ТЕМЕ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ И ЭКОЛОГО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА

ДИПЛОМНАЯ РАБОТА ПО ТЕМЕ: «ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНАЯ И ЭКОЛОГО-ПАРАЗИТОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ГИДРОБИОНТОВ ОЗЕРА ЖИЖИЦКОЕ ПСКОВСКОЙ ОБЛАСТИ» магистрант: Р. А. Крюковский научный руководитель: академик РАЕН, доктор ветеринарных наук, профессор И. Р. Смирнова

ВВЕДЕНИЕ

Цель работы – изучение Ветеринарно-санитарная оценка и экологопаразитологическая оценка гидробионтов озера Жижицкое Куньинского района Псковской области. - изучить органолептические, физико-химические, санитарнобактериологические, морфологические показатели рыбы и дать комплексную ветеринарно-санитарную оценку рыбного сырья озера Жижицкое Псковской области, Куньинского района. задачи: - провести мониторинг окружающей природной среды Куньинского района; - провести ветеринарно-санитарный осмотр свежевыловленной рыбы; озера Жижицкое Псковской области, Куньинского района; - изучить инвазированность рыбы, - изучить органолептические, физико-химические и микробиологические показатели рыбы и при гельминтозах.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Исследования проводили в лабораториях «Ветеринарно-санитарная экспертиза» , «Ветеринарная медицина» Института ветеринарной экспертизы, санитарии и экологии «Московский университет пищевых производств» , ФГБУ ЦНМВЛ и непосредственно на месте вылова рыбы. анализ Органолептическую оценку проводили согласно ГОСТ 7631 -85 «Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Правила приемки, органолептические методы оценки качества, методы отбора проб для лабораторных испытаний» . Определение массовой доли белка, жира, воды и минеральных веществ проводили согласно ГОСТ 31795 – 2012 «Рыба, морепродукты и продукция из них» межгосударственного стандарта М. , 2013. Гельминтологическое исследование рыб проводили по методикам, разработанным В. А. Догелем, Э. М. Ляйманом, А. П. Марковичем. Исследования осуществляли в установленном порядке.

Материал и методы исследования Органолептическую оценку качества рыбы проводили по основным показателям: (состояние кожно-чешуйчатого покрова, глаз, брюшка, мышечной ткани, жабр и жаберных крышек) и дополнительным (упитанность; цвет анального кольца; запах и цвет мяса у позвоночника; четкость контуров и окраску внутренних органов; положение жаберных крышек относительно тела рыбы, их цвет, а так же цвет, прозрачность и консистенцию слизи в жабрах; наличие гельминтов во внутренних органах и мышечной ткани) Определение биологической безопасности озера Жижицкое Псковской области проводили методом мониторинга паразито-фауны моллюсков -135 экземпляров

Распределение по видам рыб, выловленных в озере Жижицкое А Б А – семейство карповых: 1 - плотва, 2 – карась, 3 – красноперки; 4 – подлещики, 5 – линь; Б – семейство окуневых: 1 – судак обыкновенный; 2 – окунь; 3 - щука

Ветеринарно-санитарная оценка рыбы

Осмотр плавников рыбы Спинной плавник щуки

Осмотр жабр рыбы См кино осм жабр

Осмотр глаз рыбы Выпуклые глаза щуки Глубоко-посаженные (слегка запавшие) глаза линя

Визуальная оценка камеры глаз рыб

Осмотр брюшка и анального кольца

Оценка мышечной ткани рыб

См кино осм внут органов

Осмотр внутренних органов щуки

Исследование кишечника рыбы Вскрытый кишечник судака без патологических изменений

Подлещики с патологическими черными пятнами

См кино постдиплочстоматоз М

Визуальная оценка хрусталика глаз рыб : слева - судак (прозрачный), справа – карась (мутный)

Хрусталик глаза. Возбудители располагаются по периферии хрусталика. Глаз рыбы. Помутнение хрусталика См кино диплостоматоз М

Рыба, пораженная плероцеркоидами ремнецов Ligula intestinalis из сем. Ligulidae СМ КИНО Лигула М Плероцеркоиды ремнецов Ligula intestinalis из сем. Ligulidae

Цисты на серозной оболочке судака

Цисты Strigeidae Церкарии семейства Strigeidae из цисты на верхушки сердца судака

Половозрелые цестоды Triaenophorus nodulosus Головной конец цестоды Triaenophorus nodulosus Сколекс цестоды Triaenophorus nodulosus

Ульцирозные очаги на слизистой кишечника щуки

Результаты гельминтологического обследования рыбы Виды рыб Кол-во выловленной рыбы, экз. Кол-во инвазированной рыбы Экз. Виды гельминтов % Плотва 48 22 45, 8 Диплостоматиды Подлещик 35 5 14, 3 Постодиплостоматиды Карась 10 4 40, 0 Диплостоматиды Красноперка 37 27 73, 0 Постодиплостоматиды Подлещики 35 5 14, 3 Лигулы Линь 10 - - Судак 54 5 12, 96 Окунь 40 - - Щука 30 1 3, 3 Итого рыбы 264 69 26, 1 Тетракотилиды Триенофоруз

Исследование гидробионтов озера Жижицкое Церкарии трематод семейства Echinoctomatidae

Метацеркарии трематод семейства Echinoctomatidae в моллюсках Lymnaea stagnalis

Метацеркарии трематод Diplostomum sp.

Сравнительная характеристика химического состава мяса пресноводных рыб, г на 100 г продукта 80. 00% 70. 00% 60. 00% 50. 00% влага белок 40. 00% жир 30. 00% минеральные вещества 20. 00% 10. 00% плотва окунь судак щука

Сравнительная характеристика химического состава мяса пресноводных рыб, г на 100 г продукта

Влияние гельминтов различных видов на качественные показатели мяса пресноводных рыб Белки, % 19. 5 Вода, % 80 19 79 18. 5 78 18 77 76 17. 5 75 17 Подлещик Щука Судак ак С уд Щ ук ик щ П од ле но а а Красноперка ра с К 4 16. 5 16 рк С П ра сн К Жиры, % 4. 5 Соотношение жир/белок пе уд ак ук а Щ 0. 25 0. 2 0. 15 0. 1 0. 05 0 од оп ле щ ер к ик а 74 1. 6 3. 5 1. 4 3 1. 2 2. 5 1 2 Минеральные вещества, % 0. 8 0. 6 1. 5 0. 4 1 0. 2 0. 5 0 0 К ак С уд а Щ ук ле од Инвазированная рыба П ра с но пе щ рк ик а Красноперка Неинвазированная рыба Подлещик Щука Судак

Влага: увеличение на ~ 4%

Белково-водный коэффициент

Белково-водный коэффициент 26. 50% 25. 50% 24. 50% 23. 50% Инвазированная рыба Неинвазированная рыба 22. 50% 21. 50% 20. 50% красноперка подлещик щука судак

Физико-химические показатели мяса рыбы Показатели исследований Мясо рыбы, инвазированной метацеркариями трематод плероцеркоидами Мясо неинвазированной рыбы (контроль) Величина р. Н Микроскопия мазковотпечатков 6, 93± 0, 29 В мазках отпечатках не выявлено остатков разложившейся ткани 6, 41± 0, 13 В мазках отпечатках из внутренних слоев мышечной ткани обнаружены палочки и кокки до 10 в поле зрения 6, 85± 0, 17 В мазках отпечатках не выявлено остатков разложившейся ткани Реакция на пероксидазу Сине-зеленая окраска водной вытяжки Реакция с 5 % -ным раствором сернокислой меди Определение содержания влаги в мясе рыбы (% в сырой ткани) Бульон слегка мутноват Бульон слегка мутный Бульон почти прозрачный Редуктазная проба Реакция отсутствует Обесцвечивание экстракта через 3 -5 ч Реакция отсутствует Реакция на сероводород Реакция отсутствует Бульон при пробе варкой Прозрачный, на поверхности большие блестки жира, запах специфический рыбный Мутноватый, на поверхности отдельные блестки жира, запах специфический рыбный резкий Прозрачный, на поверхности большие блестки жира, запах специфический рыбный 79, 42± 2, 81 81, 93± 3, 67 78, 70± 1, 95

Бактериоскопия Мазок – отпечаток с поверхностных слоев мышц рыбы. Окраска по Грамму

Микроскопическая картина тканей рыб больной постдиплостомозом

Микроскопия кожи здоровой рыбы

Микроскопическая картина мышечной ткани больной диплостоматозом рыбы

Микроскопическая картина мышечной ткани больной постдиплостоматозом рыбы (нативный препарат) Х 400 Мышечные волокна подлещика с глистной инвазией. Окраска Романовского-Гимза (Х 400)

Микроскопическая картина мышечной ткани неинвазированной рыбы (нативный препарат) Х 400

ВЫВОДЫ 1. Установлено, что озеро Жижицкое на 2013 год имеет максимальную глубину - 7, 8 м, среднюю - 3, 1 м, но 2014 год максимальная 6, 6 м, средняя 2, 7 м. В водоеме незначительное течение воды. Хорошо развит зоопланктон и зообентос - промежуточные хозяева паразитов. Видовой состав представлен семействами карповых (54, 74 %) и представителями семейства окуневых (45, 25 %) от общего числа выловленной рыбы 2. При внешнем осмотре свежей пресноводной рыбы установлено, что у рыб семейства карповых отмечены нарушения кожного покрова в 32 случаях, изменения в глазной области в 26 и изменения формы брюшка в 5 случаев. При гельминтологическом исследовании выявлены возбудители постодиплостоматоза, диплостомоза и лигулеза. 3. У рыб семейства окуневых у 5 судаков на серозной поверхности верхушки сердца выявлены многочисленные цисты содержащие метацеркарии трематод рода Тetracotyle (T. variegata). У щуки (семейства щуковых) выявлена половозрелая форма цестоды Triaenophorus nodulosus. 4. При экологопаразитологических исследований малакофауны установлена, что наиболее инвазированным видом в малакофауне озера Жижицкое являются Lymnaea stagnalis, гельминтофауна которых представлена представителями семейства Echinoctomatidae и Diplostomum sp. Интенсивность инвазии моллюсков вида Lymnaea stagnalis от 28, 34% до 94, 07 % личинками трематод семейства Echinoctomatidae. В моллюсках семейства Planorbidae от 3, 14 % до 6, 29 % трематод семейства Diplostomatidae, что позволяет утверждать, что озеро Жижицкое является неблагополучным по паразитарным болезням водоплавающей и рыбоядной птицы, которая является основным хозяином выявленных трематод. 5. Физико-химические показатели характеризуют мясо исследованных рыб как свежее. Исключение составляет величина р. Н, которая у рыбы, инвазированной плероцеркоидами смещена в кислую сторону и составляет 6, 41± 0, 13 против 6, 851± 0, 17 у неинвазированных рыб, что ускоряет процессы автолиза и создает благоприятную среду для развития микроорганизмов. По этому в мазках отпечатках окрашенных по Граму, из поверхностных слоев неинвазированной рыбы находили 1 -3 кокков и 5 -8 палочек в поле зрения микроскопа. В мазках-отпечатках из поверхностных мышц в поле зрения отмечали от 10 до 20 кокков, и 1 -12 палочек в поле зрения. В мазках из глубоких слоев мышц неинвазированной и рыбы, инвазированной метацеркариями трематод, микроорганизмы обнаружены не были, а инвазированной плероцеркоидами, обнаруживали грамотрицательные палочки, без спор и капсул, расположенные одиночно в количестве до 6 в поле зрения; грамположительные кокки, расположенные попарно, до 10 в поле зрения. 6. Установлено, что химический состав мяса рыб инвазированных трематодами, отличается от химического состава неинвазированных рыб. Количество влаги увеличено у красноперки на 7, 64 %, у подлещиков – на 6, 21 %, у щуки на 1, 6 % и судака на 1, 09 %. Содержание белка снижено на 11, 73, 8, 27, 3, 27 и 2, 58 % соответственно, количество минеральных веществ у красноперки снижено на 22, 4 %, у подлещиков на 17, 07 %, щуки на 12, 69 % и судака на 8, 45 %. Количество жира снижено на 24, 95, 20, 57, 14, 63 и 13, 51 % соответственно. 7. Для рыбы, свободной от гельминтов, белково-водный коэффициент составил: для судака 25, 57 %; для щуки – 22, 62 %; для подлещика – 22, 47 и для красноперки – 24, 52 %. Для инвазированной рыбы составил соответственно: для судака – 23, 64 %; для щуки – 21, 71 %; для подлещика – 22, 08 и для красноперки 22, 80. БВК характеризует количество структурно-связанной влаги в мышечной ткани рыб, чем выше этот показатель, тем выше пластическая прочность фарша, что влияет на технологические показатели рыбной продукции. 8. Установлено, что в мышечные ткани инвазированной рыбы наблюдаются явления дистрофии (лигулез, постдиплостоматоз) и кровоизлияниями (диплостоматоз).

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ • При выявлении рыбы с метацеркариями постдиплостоматид рекомендовать проводить токсикологические исследования. • Ветеринарно-санитарную экспертизу пресноводной рыбы, выловленной из естественного водоема при поражении глистной инвазии проводить по комплексу органолептических, физико-химических и бактериологических исследований. • Результаты исследований гельминтофауны рыб, необходимо учитывать при проведении рыбо-хозяйственных мероприятий на водоемах. Рыбу из данного водоема инвазированную трематодами семейства тетракотилиде (Т. variegata) не рекомендуется перемещать для размножения в другие водоемы с целью разведения. • Учитывая тесную связь рыбоядных птиц, моллюсков с гельминтами рыб, изучая видовой состав, численность и распределение рыбоядных птиц на водоемах, их можно использовать как тест-объекты ихтиопаразитологической ситуации и прогнозировнии развития зоонозов при изменении видового состава и численности птиц. Использовать моллюсков для оценки паразитологического неблагополучия естественных водоемов как биоиндикаторы. • Принимая во внимание динамику зараженности дефинитивных и промежуточных хозяев Ligula, требуется осуществлять регулярный мониторинг – ежегодные посезонные паразитологические исследования. • Контролировать численность и осуществлять контроль за выловом рыбы, в частности, невосприимчивыми к лигулезу: сазаном, судаком, щукой.

Спасибо за внимание