Диагностические возможности современных бесприборных тестов Дробченко А Е

Диагностические возможности современных бесприборных тестов Дробченко А. Е. , проф. Кальво А. , проф. Сэмюэльс Ф. ЗАО «Биоград» , Санкт-Петербург, Orgenics LTD, Израиль, Orgenics PBS, Франция http: //www. biograd. ru 1

Быстрые простые бесприборные тесты (БПТ), специально разработанные для использования в небольших лабораториях, сегодня с успехом используются в крупных клиниках и диагностических центрах для своевременного тестирования пациентов. Для предотвращении заноса инфекции в лечебнопрофилактические учреждения, снижения риска заражения и адекватного назначения химиотерапии важным фактором является выявление заболевания на ранних стадиях инфицирования. 2

Типовой состав набора Иммуно. Комб 3

Результаты испытаний тест-систем на сероконверсионной панели HIV 9017, Bioclinical Partners, США © ЗАО «Биоград» , 2010 г.

Тесты Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Би. Спот выявляют антитела к ВИЧ на 11 -15 дней раньше, чем экспресстесты, основанные на принципе иммунохроматографии, и и на 4 -11 дней раньше, чем было достигнуто пороговое значение (1, 00) у ELISA тест-систем. 5

Испытания, проведенные ВОЗ на сероконверсионных панелях показали, что тест Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Би. Спот выявляет антитела к ВИЧ-1 на 8, 5 дней раньше референс-теста Enzygnost Anti-HIV 1/2 Plus. 6

Характеристики тест-систем для экспресс скрининга на антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (World Health Organization. HIV Аssays: Operational Characteristics: Report 8 -15). © ЗАО «Биоград» , 2010 г.

По результатам испытаний ВОЗ, специфичность тестсистем Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Би. Спот превосходит специфичность тест-систем Determine HIV-1/2 в два раза (количество ложноположительных результатов 0, 3% и 0, 6% соответственно). 8

PPV экспресс-тестов при различной распространенности ВИЧ 9

При среднем по России уровне распространенности ВИЧ (0, 30%) прогностическая ценность положительного результата у тест-систем Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Би. Спот составляет 50%, у тест-систем Determine HIV-1/2 - 33%. 10

Минздравсоцразвития рекомендует тесты Иммуно. Комб для обследования доноров крови, органов и тканей человека, скрининговых исследований; для подтверждения результатов скрининговых исследований (приказ № 292 от 30. 07. 2001, № 322 от 21. 10. 2002, № 336 от 07. 09. 2000). 11

Иммуно. Комб HIV 1+2 Комб. Фирм (Иммуно. Блот) gp 120 gp 41 gp 36 Внутренний контроль p 24 p 31 12

Иммуно. Комб HIV 1+2 Tri. Spot (4) - биотинилированный бычий сывороточный альбумин (БСА) (внутренний контроль) (3) - моноклональные антитела к антигену ВИЧ-1 p 24 (2) - рекомбинантный антиген ВИЧ-2 (env gp 36) (1) - рекомбинантный антиген ВИЧ-1 (env gp 41) 13

Отличительным качеством разработанной фирмой Orgenics тест-системы Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Три. Спот Аг -Ат является дифференцированное определение антигена ВИЧ p 24 и антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Это увеличивает чувствительность по антигену ВИЧ p 24 и позволяет определить статус каждого из маркеров, что особенно важно в период «окна» . 14

Тест- система была испытана в медицинских центрах Израиля, Франции, Бельгии, России. Всего было исследовано 3297 образцов сыворотки и плазмы, включая 878 образцов положительных по ВИЧ-1 (включая группу О), 224 образца, положительных по ВИЧ -2 и 2195 отрицательных образцов. Среди отрицательных образцов было 462 образца от пациентов с различными инфекционными (гепатитом A, B, C, HTLV, CMV, HSV, EBV, малярией и вакцинированные против вируса гриппа) и неинфекционными заболеваниями и 190 образцов групп высокого риска. 15

В качестве референс-тестов использовались Bio. Rad Genscreen Plus HIV Ag-Ab, Abbott HIV Ag/Ab Combo и Vironostika HIV Uni-Form II Ag/Ab. Тест-система Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Три. Спот Аг-Ат выявила все положительные образцы, что соответствует чувствительности 100% по всем трем маркерам. Специфичность составила: антитела к ВИЧ-1 - 99. 5%, антитела к ВИЧ-2 - 100%, антиген p 24 — 99. 8%. 16

Чувствительность по антигену ВИЧ p 24 при исследовании образцов с ранних стадий первичной ВИЧ инфекции составила 5 пг/мл, включая группу О. При исследовании образцов с известным количеством антигена ВИЧ p 24, была продемонстрирована способность определения до 1. 5 пг/мл. На сегодняшний день тест-система Иммуно. Комб II ВИЧ 1+2 Три. Спот Аг-Ат демонстрирует самую высокую чувствительность по антигену ВИЧ p 24 по сравнению с производимыми в мире иммуноферментными тестсистемами. 17

При исследовании сероконверсионных панелей Иммуно. Комб Три. Спот определял ВИЧ на 2 -13 дней раньше чем антительные тесты на ВИЧ 3 -го поколения. 18

Диагностика вирусных гепатитов Иммуно. Комб Иммуно. Комб HBs. Ag Anti-HBs. Ag HBc Ig. M HBc Ig. G HCV HAV Ig. M HAV Ab Внутренний контроль Коровый антиген ВГС NS 3 и NS 4 NS 5 19

Технология Иммуно. Комб позволяет диагностировать широкий спектр инфекций: ВИЧ, HTLV, Гепатиты А, В, С, Цитомегалию, Токсоплазмоз, Хламидиоз, Краснуху, Хеликобактериоз, тропические инфекции. 20

Схема постановки анализа 1. Для индивидуального тестирования гребешок можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов. 4. Гребешок перемещается из ряда в ряд ванночки в соответствии с инструкцией (промывки и связывание с конъюгатом). 2. В ряд А ванночки вносятся образцы (сыворотка, плазма или цельная кровь) и контроли. 5. Цветная реакция в ряду F. 3. Гребешок вставляется в ряд А и инкубируется (реакция антиген-антитело). 6. Результат анализа в виде окрашенных точек. Верхняя точка: внутренний контроль. Нижняя точка и (или) средняя точки появляются в случае наличия - инфекции. 21

Тесты Иммуно. Комб сертифицированы СЕ и широко используются более чем в ста странах мира. Как достоверные, высокочувствительные и специфичные тесты Иммуно. Комб отобраны для программ ВОЗ, UNAIDS, Красного Креста, допущены FDA (США) для поставок по специальным программам фонда Клинтона. 22

Минздравсоцразвития рекомендует тесты Иммуно. Комб для обследования доноров крови, органов и тканей человека, скрининговых исследований; для подтверждения результатов скрининговых исследований (приказ № 292 от 30. 07. 2001, № 322 от 21. 10. 2002, № 336 от 07. 09. 2000). 23

ЗАО «Биоград» 17 лет в России! Адрес: 197101, г. Санкт-Петербург, Петровский пр. , д. 14, 19 -Н тел. /факс: (812) 325 21 71, 325 21 70 (многоканальные) http: //www. biograd. ru biograd@biograd. ru 24

Спасибо за внимание. 25