Diagnostic d’une hémoglobine instable
Diagnostic d’une hémoglobine instable Patricia Aguilar Martinez CHU de Montpellier, France Congrès Tuniso-français Tunis, 6 -7 Sept 2007 Congrès Tunis sept
Hb instables: historique • 1952 (Cathie): enfant, cyanose + splénomégalie • 1960 (Dacie) : « anémie hémolytique congénitale non sphérocytaire » sphérocytaire • 1962 (Grimes) : « anémie congénitale à corps de Heinz » Heinz • 1966 (Carrel) : Hb Köln (1ère Hb instable identifiée) • 1967 (Dacie) (Sansone): Hb Hammersmith, Hb Genova • 2007 : + d’une centaine de variants connus ( « http/www. globin gene server » ) server Congrès Tunis Sept 2007
Hb instable: définition? • Groupe d’hémoglobines anormales • responsables d’anémie hémolytique • et caractérisées par la présence de corps de Heinz es r ra Congrès Tunis Sept 2007
Tableaux cliniques • Anémie hémolytique chronique (provoquée par stress oxydatif) • Formes cliniques spéciales: – avec cyanose (affinité pour l’oxygène) – mimant une bêta-thalassémie hétérozygote (Hb très instable) – asymptomatiques… (instabilité in vitro) Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 • Num: – Hb: 5, 8 g/dl – GR: 1, 9 106/mm 3 • Jeune fille, 14 ans – VGM: 79. 1 fl • Urgences pédiatriques – TCMH: 29, 9 pg • Pâleur, splénomégalie – Pt: 129 000/mm 3 – GB: 2500/mm 3 • Étude de l’Hb • Réticulocytes: 19, 2% • Recherche de sphérocytose (365 000 mm 3) héréditaire • (Enzymes érythrocytaires) Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Examens biologiques HPLC: • Hb A : 81. 3% • Hb F : 4. 5% • Hb X : 8% • Hb A 2 : 6, 2% (VN <3, 5) Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Examens biologiques Isofocalisation N T P N électrique A F S table A 2 b ins C ’H n d’H Sus picio X Fraction anormale Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Examens biologiques (Avant transfusion) Corps de Heinz positifs (80%) Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Enquête familiale • Père : (splénectomisé? ) – Num: Hb: 13, 1 g/dl, VGM: 97 fl, – Rétic: 232 000/mm 3 hémolyse compensée – HPLC: Hb A 2: 2. 9%, Hb. F <1%, Hb X (petit pic) – Isofocalisation: pas d’anomalie visible Isofocalisation – Corps de Heinz: + • Mère : – bilan normal Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Diagnostic moléculaire • Technique de screening: DGGE • Technique de confirmation: séquençage Congrès Tunis Sept 2007
Cas n° 1 Diagnostic moléculaire Père et fille • Mutation hétérozygote du gène ß-globine: ß-globine c. 127 T>C (bêta 42 Phe>Val) Hb Sendagi (Hb instable connue) Congrès Tunis Sept 2007
Physiopathologie Déstabilisation du tétramère d’hémoglobine : – Infiltration d’eau dans la molécule d’Hb – Anomalie de l’hème: formation hème d’hémichromes – Anomalies de la zone de contact des chaînes de globine – Insertions/délétions d’aa Congrès Tunis Sept 2007
Diagnostic biologique • Numération + réticulocytes • Etude de l’Hb (HPLC, isofocalisation) • Recherche de corps de Heinz • Test de stabilité à la chaleur (1 h à 50°C) à l’isopropanol Congrès Tunis Sept 2007
Recherche de corps de Heinz • Coloration supravitale (bleu de Crésyl brillant) • Incubation prolongée (½h, 1 h, 2 h, 4 h, 24 h) 24 • Examen de toutes lames • Aspect: inclusions accolées à la membrane, balles de golf… Congrès Tunis Sept 2007
Corps de Heinz Congrès Tunis Sept 2007
Diagnostic moléculaire Hb F Hb A Congrès Tunis Sept 2007
Génétique • Transmission dominante 1 seul allèle muté ≠ thalassémies Congrès Tunis Sept 2007
Génétique • Transmission dominante 1 seul allèle muté ≠ thalassémies • Cas particuliers : en associations avec une ß° thalassémie thal intermédiaire Congrès Tunis Sept 2007
Diagnostic différentiel • Anémie hémolytique avec splénomégalie : – Sphérocytose héréditaire • Hémolyse provoquée/médicaments + corps de Heinz – Déficit en G 6 PD Congrès Tunis Sept 2007
Traitement • Anémie hémolytique modérée: – Folates – Surveillance lithiase biliaire – Médicaments • Anémie sévère: – Transfusions • Anémie chronique avec splénomégalie: – Splénectomie Congrès Tunis Sept 2007
Quelques hémoglobines instables • Hb Köln la plus fréquente • Hb Hammersmith, Poitier, Brest, Clermont Ferrand… • Hb Tunis-Bizerte : – Alpha 1 129(H 12) Leu>Pro – Anémie, microcytose (alpha thal) – Famille tunisienne (mère homoz, 2 enfants hétéro) Hb. Var : A database of Human Hemoglobin Variants and Thalassemias Congrès Tunis Sept 2007
Laboratoire d’hématologie Hôpital Saint Eloi Pr JF Schved Dr M Giansily S Cunat H Igual F Becker Congrès Tunis Sept 2007
