Дендритные вакцины ДНК-вакцины Дендритные вакцины Дендритные клетки

Дендритные вакцины. ДНК-вакцины

Дендритные вакцины Дендритные клетки Морфологические особенности • • Многочисленные длинные (>10 мкм), подвижные цитоплазматические отростки Небольшое количество внутриклеточных органелл Крупные митохондрии Сильно развитый аппарат Гольджи Ядро неправильной формы, с многочисленными вдавлениями Наличие эндосом и лизосом Для клеток Лангерганса характерно присутствие в цитоплазме гранул Бирбека

Дендритные клетки

Дендритные клетки

Дендритные клетки

Дендритные клетки

Происхождение ДК

Классификация и характеристика ДК Тип ДК КЛ ИДК ТДК ФДК предшественники CD 34+CLA+ CDla+l 4+ CD 34+CLACDla+l 4+ CD 38 dim (CD 11 c-) Атохтонные клетки Специфические маркеры CDla+, CD 83+, CD 86+, BG+, катгерин E+, Lag+ CDla+, CD 83+, CD 86+, CD 9+, CD 68+, Fact. Xllla+ CD 8 a+-, CD 2+, CD 25+, CD 4+, CD 80+, CD 86+, DEC-205+ CD 8 a+-, CD 2+, BP-1+, CD 25+, CD 4+, DEC-205+ Локализация Эпидермис кожи и слизистые мембраны Интерстиций внутренних органов Паракортикальная Т-зависимая область лимфоидных органов. Мозговой слой тимуса и вторичные лимфоидные ткани В-зависимая область лимфоидных органов функции Представляют АГ Тклеткам. Поддерживают баланс между Тх1/Тх2 Стимулируют покоящиеся В-клетки к продукции АТ. Переключают изотипы иммуноглобулинов в В-клетках Индуцируют центральную и периферическую толерантность к ауто-АГ Поддерживают жизнеспособность, рост и дифференцировку активированных В-клеток

Особенности ДК, позволяющие им захватывать и представлять АГ более эффективно по сравнению с другими АПК • • Незрелые ДК могут не только фагоцитировать экзогенные АГ, но и образовывать визикулы для микро- и макро-пиноцитоза растворимых форм АГ ДК экспрессируют рецепторы, опосредующие адсорбцию экзогенных АГ ДК способны экспрессировать на плазмолемме комплексы АГ-МНСll, содержащие крупные пептидные фрагменты (до 26 аминокислот) ДК способны продуцировать большие количества молекул МНСll ДК обладают несколькими дополнительными механизмами, позволяющими им представлять экзогенные АГ в комплексе с молекулами МНСl Зрелые ДК, созревая приобретают многочисленные цитоплазматические отростки, значительно увеличивающие поверхность клетки Зрелые ДК направленно мигрируют в лимфоидные органы ДК экспрессируют более широкий набор молекул адгезии и костимуляции

Функции зрелых ДК • Индукция Т-клеточного иммунного ответа • Поддержание баланса между подклассами Т-хелперов • Активация покоящихся В-клеток • Индукция центральной и периферической толерантности Т-лимфоцитов к ауто-АГ

Иммунотерапия онкологических заболеваний– принцип действия v С помощью специальных методов из крови больного выделяются клетки-предшественники, из которых впоследствии выращивают дендритные клетки. В присутствие определенных веществ их высаживают на лабораторные чашки, чтобы клетки не утратили способности к дальнейшему развитию. v Во время фазы созревания в культуру клеток добавляют структуры опухолевых клеток, полученные путем генной инженерии, либо «обломки» опухоли самого пациента. v Незрелая клетка-предшественник способна захватывать эти структуры. v Захваченный «обломок» претерпевает определенные структурные изменения, чтобы позднее характерный признак этой опухоли мог быть лучше распознан другими иммунными клетками.

Иммунотерапия онкологических заболеваний– принцип действия v В результате этих процессов клетка- предшественник превращается в дендритную клетку, которая на своей поверхности несет признак опухоли с особой сигнальной последовательностью. Именно эту последовательность и распознает иммунная клетка как чужеродную. v Теперь созревшие дендритные клетки вводятся под кожу, откуда они активно перемещаются в лимфоузлы, активируют различные типы клеток – исполнителей (цитотоксические Т-лимфоциты), которые при контакте с опухолевой клеткой уничтожают ее. v Активные клетки-исполнители «ознакомлены» с чужеродным признаком, с током крови они распространяются по всему организму и «ищут» в разных тканях носителей именно этого признака. v При встрече со своей целью (в данном случае с опухолевой клеткой), клетка-исполнитель повреждает ее и вырабатывает вещества, оповещающие другие иммунные клетки.

ДНК-вакцины

Принцип ДНК-иммунизации • Ген, кодирующий белок (или несколько антигенов), специфичный для данного патогена, клонируют в плазмиду с соответствующим промотором, и плазмидная ДНК вводится в организм реципиента • Введенная ДНК акцептируется клетками организма, попадает в ядро и находится там как кольцевая нереплицирующаяся эписома, а закодированные в генах белки экспрессируются • Чужеродные белки, производящиеся клетками организмахозяина, процессируются протеосомами и представляются клетками иммунной системы, вызывают специфический имммунный ответ • Синтезируемые чужеродные белки могут также высвобождаться во внеклеточное пространство. Такие АГ, предполагают, вызывают развитие гуморального иммунного ответа

Принцип ДНК-иммунизации

Принцип ДНК-иммунизации

Механизм иммунного ответа при ДНК-иммунизации? • Роль антигенпрезентирующих клеток выполняют миоциты • Небольшое число «профессиональных» АПК напрямую трансфецируется плазмидной ДНК. Эти клетки затем попадают в региональные лимфотические ткани, где они могут активировать CD 4+-Т-клети, В-клетки и CD 8+-Т -клетки • Антиген, образующийся в трансфецированных миоцитах, попадает в профессиональные АПК, когда они инфильтруют мышечную ткань как участники воспалительного ответа на процедуру иммунизации. В случае подкожной иммунизации трансфецированные кератиноциты экспрессируют антиген и передают его дендритным клеткам, находящимся в коже

Факторы, влияющие на иммунный ответ при генетической иммунизации • Cp. G-мотивы и иммуностимулирующие последовательности ДНК • Способ иммунизации • Место иммунизации • Локализация белкового антигена, кодируемого плазмидой • Режим иммунизации

Преимущества генетической иммунизации: • Можно не опасаться реверсии вакцины к вирулентной патогенной форме и распространения инфекционной вакцины в популяции • Их можно относительно легко и быстро приготовить в больших количествах • Они не требуют никаких специальных условий транспортировки или хранения • Значительно дешевле по сравнению с обычными вакцинами