Цветные_реакции_белковi.ppt
- Количество слайдов: 20
Цветные реакции белков Качественные реакции на остатки аминокислот
Указатель реакций l a) b) l l l Биуретовая Уравнение реакции Проведение опыта Нингидриновая Ксантопротеиновая Уравнение реакции Проведение опыта Миллона Гопкинса-Коле Диазореакция Паули
Функция качественных реакций l l Для аминокислот, постоянно встречающихся в составе белков, разработано множество цветных (в том числе именных) реакций. Многие из них высокоспецифичны, что позволяет определять ничтожные количества той или иной аминокислоты. Надо помнить, что все качественные реакции – это реакции не собственно на белки, а на определенные аминокислоты, входящие в их состав.
Аминокислоты l l Наиболее распространенные аминокислоты см. таблицу Основной структурной единицей белков служат a -аминокислоты. В состав большинства природных белков входит около 20 aаминокислот. Качественные реакции служат как для определения принадлежности вещества к классу белков, так и для идентификации входящих в его состав аминокислот
Биуретовая реакция l Определяет наличие пептидной связи в растворе исследуемого соединения. пептидная связь
Биуретовая реакция l l Реакция обусловлена образованием биуретового комплекса в результате соединения меди с пептидной группировкой белка. В пептидах и белках пептидная связь обычно находится в амидной форме (или кетоформе), но в щелочной среде она переходит в иминольную (енольную):
Биуретовая реакция l Биуретовая реакция протекает так: +Cu. SO +Na. OH 4
Нингидриновая реакция Качественная реакция на -аминокислоты l Аминокислота с нингидрином образует продукт конденсации типа азометина
Нингидриновая реакция l путем перегруппировки • и гидролиза образуется 2 -аминоиндандион
Нингидриновая реакция l 2 -аминоиндандион реагирует с нингидрином и дает краситель.
Ксантопротеиновая реакция Определяет присутствие в белке ароматических и гетероциклических - аминокислот : l триптофана, l фенилаланина, l тирозина, l гистидина.
Ксантопротеиновая реакция +HNO 3
Реакция Миллона l Это реакция на аминокислоту тирозин
Реакция Миллона l Реактив Миллона (раствор Hg. NO 3 и Hg(NO 2)2 в разбавленной HNO 3, содержащей примесь 3 HNO 2) взаимодействует с тирозином с образованием ртутной соли 2 окрашенной в нитропроизводного тирозина, 2 розовато-красный цвет: +Hg. NO +Hg(NO ) +HNO 3 +HNO 2
Реакция Гопкинса–Коле l Эта реакция определяет аминокислоту триптофан.
Реакция Гопкинса–Коле l Из глиоксиловой кислоты под действием концентрированной серной кислоты сначала получается формальдегид: СО 2
Реакция Гопкинса–Коле l формальдегид затем конденсируется с триптофаном: конденсации окисляется до бис-2 триптофанилкарбинола, который в присутствии минеральных кислот образует соли, окрашенные в сине-фиолетовый цвет: l. Продукт
Реакция Паули (Диазореакция Паули) Эта реакция аминокислоту гистидин.
Реакция Паули (Диазореакция Паули) l при взаимодействии кислого раствора сульфаниловой кислоты с нитритом натрия образуется диазобензолсульфоновая кислота:
Реакция Паули (Диазореакция Паули) l Диазобензолсульфоновая кислота, взаимодействуя с гистидином, дает соединение вишнево-красного цвета:
Цветные_реакции_белковi.ppt