CОЗРЕВАНИЕ И АКТИВАЦИЯ В-ЛИМФОЦИТОВ Маркеры В-лимфоцитов СD-19

CОЗРЕВАНИЕ И АКТИВАЦИЯ В-ЛИМФОЦИТОВ

Маркеры В-лимфоцитов СD-19 CD 20 CD 22 CD 72 -78 B-220 CD 40

Рецептор В-лимфоцитов – мультисубъединичный комплекс из 8 полипептидных цепей. Неправильная сборка или дефекты любого из компонентов ведут к апопотозу В-лимфоцитов Этапы дифференцировки В-лимфоцитов АГ-независимая 1. Контролируемая экспрессия генов RAG 1|RAG 2 2. Контролируемая экспрессия гена Td. T 3. Объединение Dh и Jh сегментов 4. Объединение Vh и DJh сегментов 5. Внутриядерный фермент Td. T добавляет нуклеотиды в точках соединения генных сегментов

6. Экспрессия CD 10, CD 19, CD 20, CD 38, CD 40, MHCII 7. Экспрессия Igά и Igβ 8. Про-В-клетки имеют полностью сформированный ген тяжелой цепи Иг и продукт в цитоплазме 9. Экспрессия поверхн. Ig. M c сурогатными легкими цепями 10. В результате 5 -6 митотических делений образуются пре-В-клетки. У них экспрессия Ig. M снижена, он находится в цитоплазме 10. Экспрессия Vκ и затем Vλ 11. Экспрессия Ig. M на поверхности и прекращение синтеза белков RAG 1 и RAG 2 12. На стадии незрелого В-лимфоцита происходит негативная селекция в К/М

13. Экспрессия Ig. M и Ig. D, СD 21 (рецептор к C 3 d комплемента) 14. Миграция из костного мозга (В 1 и В 2)

Роль стромальных элементов в дифференцировке В -лимфоцитов

Негативная Селекция в-лимфоцитов в костном мозге

Экспрессия BCR

Пре-В и пре-Т-лимфоциты содержат суррогатные цепи В антигенраспознающих рецепторах

Антигенспецифическая дифференцировка В-л 1. BCR +АГ, сшивание BCR, образование шапочки, интернализация комплекса LFA+ICAM 2. CD 40 В-л -----CD 40 L Tх – это главный сигнал для активации В-л. Тримеризация CD 40 с помощью белка CRAF-1 – это сигнал для индукции пролиферации и дифференцировки 3. Защита от апоптоза 4. CD 80|86 B-л -----CD 28 Тх активирует Тх, а они путем cинтеза цитокинов активируют В-л 5. BCR и Igά и Igβ цитоплазматическими доменами контактируют с протеинкиназами семейства SRC 6. Протеинкиназы фосфорилируют белки по тирозину, треонину и серину 7. Фосфорилирование активирует фосфолипазу С

B-л не экспрессирует R к ИЛ-1, но ИЛ-4 повышает в нем синтез бета субъединицы, а ИЛ-5 альфа субъединицы рецептора ИЛ-2. После этого В-л способен отвечать на ИЛ-2. Связь ИЛ-2 с рецептором индуцирует синтез. J цепи и синтез пентамерного Ig. M

Она транспортируется в мембрану и расщепляет Фосфатидилинозитол на диаглицерин и инозитол 3 фосфат 7. В результате происходит кратковременная экспрессия генов c-fos и c-jun. Их продукты димеризуются и образуют транскрипционный фактор Ар-1 для гена ИЛ-2 и активация фактора транскрипции NF-k. B 8. Экспрессия генов рецепторов цитокинов (ИЛ-4, 6, 10, 9) 9. Бласттрансформация В-л и вступление в G 1 фазу митоза При отсутствии сигнала от цитокинов – апоптоз 10. Продвижение по клеточному циклу засчет активации циклинов циклинзависимыми киназами (cdc) 11. Дифференцировка наслаивается на деление клеток

Индуктивная фаза В-клеточного ответа происходит в первичных фолликулах куда поступает АГ Взаимодействие с Т-л - в краевой зоне первичного фолликула Затем Т-л поступают в фолликул и начинает образовываться вторичный фолликул В нем различают базальную темную и светлую зону и апикальную светлую

В темной зоне – пролиферация В-л мутационный процесс и класс-переключение. Экспрессия Bcl-2 слабая, поэтому апоптозом устраняются клетки, с н/афф рецепторами Далее выжившие В-л двигаются в светлую зону, где контактируют с АГ на фолликулярных дендритных клетках. Экспрессия Bcl-2 повышается В апикальной зоне В-л контактируют с Т-л и дифференцируются в плазматические клетки Плазматические клетки покидают л. у. И направляются в к/м. Продолжительность их жизни 4 -7 дней

Дифференцировка В-л в зародышевых центрах 1. Сужение спектра экспрессируемых генов 2. Переключение класса BCR 3. Мутационный процесс и созревание аффинитета 4. Утрата многих поверхностных рецепторов и переход на синтез секретируемых АТ 5. Образование В-клеток памяти с CD 45 RO Цитокины класс-переключения – Ил-4 Ig. G 1 и Ig. E ИНФγ- Ig. G 2 a и Ig. G 3 ИЛ-5 - Ig. A ТФР Ig. G 2 b и Ig. A

Зародышевый центр После перв. активации В-клетка направляется в фолликул и претерпевает клональную экспансию – делится 6 -7 раз. Количество поверхностных ИГ резко снижено Для образования ЗЦ требуется ИЛ-2 и 10 и связывание через CD 40 и Fas Делящиеся центробласты образуют темную зону ЗЦ и дают начало популяции центроцитов, формирующих светлую зону В центробластах происходят сом. мутации

Центроциты реэкспрессируют пов. рецепторы и проходят позитивную селекцию на предмет возросшей аффинности к Аг Не прошедщие позитивную селекцию клетки гибнут или вступают на путь центоробластов, подвергаясь вновь сом. мутагенезу В некоторых клетках происх. Редактирование Иг рецепторов для этого в них реэкспрессируется rag 1|rag 2. Центроциты дифференцируются в клетки памяти и плазмоциты В плазматических клетках экспрессируется BLIMP-1, транскр. фактор

Сигнальная трансдукция в В-лимфоцитах

Ответ В-лимфоцитов на тимуснезависимые и тимусзависимые АГ

Т- и В-конъюгация

Образование контакта между В- и Т-лимфоцитами

ДИНАМИКА ГУМОРАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА

Вторичный лимф. фолликул

Что следует из того, что В и Т-лимфоциты распознают разные части АГ? И-л, распознавший АГ, может взаимодействовать с Т-л, распознавшим другой АГ, представленный не В-л, а другой АПК. Значит, Т-В взаимодействие может быть в 2 вариантах 1. Если АГ представляет В-л и его распознает Тх , и с ним взаимодействует В-л, распознавший этот же АГ, это хороший эффективный ответ 2. Если В-л распознавший АГ взаимодействует с с Т-л, распознавшим другой АГ – то это прохладное взаимодействие и оно может ограничиться взаимодействие Ц-R. Это при перв ИО, когда АПК являются исключительно ДК. При втор ИО

Цитотоксический иммунный ответ 1. Презентация АГ Тх со стороны АПК - МНСII + АГ 2. Презентация АГ киллерам за счет комплекса МНСI+ Аг на АПК 3. Активация Т-киллеров 4. Экспрессия R к ИЛ-2 и пролиферация киллеров в паракортикальных зонах селезенки и л. у. 5. Циркуляция по организму и взаимодействие с клетками мишенями 6. Убийство мишени

B 1 лимфоциты Отвечают на Т-независимые АГ Участвуют в процессинге и презентации АГ для Т-л Индуцируют толерантность и гуморальный иммунный ответ

ИО на Т-независимые АГ. Не требует участия Т-х Какие Аг: • Полимерный бактер флагеллин • ЛПС • Декстран • Леван • Фиколл • Поливинилпиролидон • у всех этих Аг есть общие свойства – • Многие из них явл полисахаридами и не могут быть презентированы в МНСII Т- хелперам • Резистентны к деградации • Представляют собой полимерные структуры с повторяющимися эпитопами

Т. е. перекрестно связывают BCR в больших дозах многие из этих АГ являются митогенами, индуцируют неспецифическую активацию АГ ИО на эти АГ стимулируют Ig. M ответ, слабый, памяти нет