Цитохимические исследования клеток крови И А Новикова

Цитохимические исследования клеток крови И. А. Новикова

Дегенеративные изменения лейкоцитов Токсогенная зернистость нейтрофилов – признак интоксикации, неблагоприятный прогностический признак. Иногда появляется раньше сдвига. Вакуолизация цитоплазмы – признак интоксикации, встречается реже токсогенной зернистости. Тельца Деле – проявление интоксикации. Гиперсегментация ядер нейтрофилов – 5 и более сегментов. Наиболее часто – при дефиците В 12 и фолиевой кислоты. М. б. врожденная. Пельгеровская аномалия – уменьшение сегментации ядер. Наследуемое нарушение. Псевдопельгеровская аномалия – то же, но вследствие миелопролиферативных, воспалительных процессов и т. д. Клетки лейколиза (тени Боткина-Гумпрехта) – при ХЛЛ.

Цитохимические исследования Принцип: выявление различных веществ в клетках, основанное на их реакции с красителями и появлении специфического окрашивания. Оценивают: наличие или присутствие в клетке исследуемого вещества, особенности его расположения (диффузное, гранулярное). Цитохимическая характеристика клеток гемопоэза возможна, начиная с бластных форм.

Цитохимические особенности клеток гранулоцитарного ряда Зрелые гранулоциты: миелопероксидаза ++, липиды ++, гликоген ++ (диффузное окрашивание), щелочная фосфатаза ++. Миелобласты: миелопероксидаза +, неспецифическая эстераза +, гликоген +, щелочная фосфатаза -.

Цитохимические особенности мононуклеарных клеток Моноциты: неспецифическая эстераза ++, пероксидаза + - , гликоген +. Лимфоциты: гликоген + (гранулярное окрашивание), пероксидаза -, липиды -

Выражение результатов цитохимических реакций Полуколичественная оценка результатов (принцип Астальди): все исследуемые клетки делят на 4 группы – 1. Отрицательная реакция – 2. Слабоположительная + 3. Положительная + + 4. Резкоположительная + + + Подсчитывают 100 клеток, дифференцируя по степени интенсивности окраски, результата суммируют и выражают в процентах

Выражение результатов цитохимических реакций Средний цитохимический коэффициент (по Kaplow) Пример: Ø Отрицательная реакция – 2 Ø Слабоположительная + 10 Ø Положительная ++ 25 Ø Резкоположительная +++ 63 Расчет: (2 х0)+(10 х1)+(25 х2)+(63 х3) : 100 = 2, 49 Нормы цитохимических показателей каждая лаборатория разрабатывает отдельно!

Клиническое использование цитохимических показателей 1. Дифференцировать различные формы лейкозов (FAB) v Миелобластный – пероксидаза, гликоген, липиды v Монобластный – неспецифическая эстераза v Лимфобластный – гликоген 2. Дифференцировать хронический миелолейкоз и лейкемоидные реак- ции миелоидного типа – щелочная фосфатаза (ХМЛ ↓↓↓, лейкемоидная реакция - ↑↑↑). 3. Диагностика наследственной гемолитической анемии, обусловленной дефицитом Г-6 -ФД в эритроцитах.