Цитология и гистология. Введение План лекции:
1._vvedenie.ppt
- Размер: 9.8 Мб
- Автор:
- Количество слайдов: 30
Описание презентации Цитология и гистология. Введение План лекции: по слайдам
Цитология и гистология. Введение
План лекции: • Предмет, задачи и методы цитологии • История создания и применения микроскопа в биологии • Типовые задачи клеточной биологии
Цитология = cytos ( сосуд) + logos ( наука)
История создания и применения микроскопа в биологии
Изобретение телескопа и микроскопа – 1608 г.
Создание микроскопа Галилео Галилеем – 1609 г. Картина Д. Тинторетто, 1605 -1607 гг.
Первооткрыватель клетки Роберт Гук (1635 -1703) История микроскопа Rita Greer,
Анатомия растений Неемия Грю (1641 -1712)
Основоположник биологической микроскопии Антон ван Лёвенгук (1632 -1723) и его микроскопиум. История микроскопа Johannes Vercolje ,
Старинные микроскопы 1680 г. Около 1760 г. 1850 г.
Клеточная теория – 1839 г. Теодор Шванн (1810 – 1882) • Как растения, так и животные состоят из сходных элементов – клеток, что свидетельствует о единстве всей живой природы. • Сходство клеток растений и животных вытекает из общего для них способа образования • Известное в ботанике представление о клетке как автономной элементарной единице растительного организма надо распространить и на животных. • Организм представляет собой совокупность образующих его клеток и поэтому «основа питания и роста лежит не в организме как целом, а в отдельных элементарных его частях – клетках» .
Развитие клеточной теории — 1859 и 1862 гг. Рудольф Вирхов (1821 -1902) Эрнст Брюкке (1819 -1892)
Исследования оплодотворения, митоза и мейоза (1875 -1890 гг. ) Эдуард Страсбургер Оскар Гертвиг Вальтер Флемминг (1844 -1912) (1849 -1922) (1843 -1905)
• исследование общей структурно-функциональной организации клетки; • изучение специализации клеток в зависимости от выполняемых ими функций (т. е. особенностей клеток различных тканей) • сравнительный анализ клеток (т. е. особенностей клеток одной ткани у различных организмов). Жан Батист Карнуа (1836 -1899) Клеточная биология – 1884 г.
Дифракционная теория микроскопа Эрнст Карл Аббе (1840 -1905) Предел Аббе = 250 нм
Создание электронного микроскопа М. Кноль и Э. Руска (1932)
Конфокальный микроскоп LSM 5 Pascal
Результаты применения микроскопии в биологии
Типовые задачи клеточной биологии
Прижизненная микроскопия клеток Catharanthus roseus Подсчет числа живых клеток
Флуоресцентная микроскопия Один или два флуорохрома Распределение препарата Фотолон в клетках He. La : А – возбуждение зеленым светом, В — окраска АО при возбуждении синим светом, С — совместная обработка Фотолоном+АО, возбуждение ультрафиолетом
Окраска митохондрий родамином 123 и клеточных ядер бромидом этидия. Культура клеток HEK — 293 Индикация некроза и апоптоза. Культура клеток К 562 Флуоресцентная микроскопия Два флуорохрома одновременно, конкурентный и неконкурентный варианты
Флуоресцентная микроскопия Три флуорохрома последовательно Иммуноцитохимия репарации двойных разрывов ДНК в клетках TK 6. ДНК окрашена DAPI в синий цвет , антитела к γ — H 2 AX мечены TRITC и флуоресцируют красным , антитела к Rad 51 мечены FITC и флуоресцируют зеленым. Справа – компьютерная обработка для определения колокализации факторов
Метод комет А – интактные клеточные ядра, В – фрагментация ДНК под декйствием γ -лучей в дозе 5 Гр, С – фрагментация ДНК при апоптозе. Визуализация ДНК бромидом этидия.
Схема локализации специфических ДНК проб AML/ETO t(8; 21)(q 21; q 22) (Kreatech. Diagnostics) Использованы локус-специфические ДНК-пробы. Метились гены Run. X 1(AML 1) и Run. X 1 T 1(ETO, MTG 8), а так же границы ядра клетки. Съёмка проводилась по трём каналам: синий (DAPI) – границы ядра, зелёный (Oregon Green 488) — Run. X 1(AML 1) и красный (Alexa Fluor) — Run. X 1 T 1(ETO, MTG 8). Метод FISH
Проточная цитометрия — принцип
Проточная цитометрия — прибор
Распределение клеток по митотическому циклу
СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!