Цитогенетический метод изучения генетики человека Преподаватель Карасева Н

Цитогенетический метод изучения генетики человека Преподаватель: Карасева Н. В. Подготовил: Шарипов Азат (МС-102) РУДН, 2013

Этот метод позволяет: • Проанализировать хромосомный набор клеток человека • Установить структурные особенности отдельных хромосом • Выявить нарушения числа и строения хромосом у исследуемого индивида

Наиболее удобны для изучения лимофоциты или клетки красного костного мозга Этапы исследования: • • 1)Культивирование клеток на питательной среде с добавлением ФГА(фитогематоглютинина), стимулирующего митотическое деление клеток в течение 72 часов • 2)Добавление в среду колхицина, разрушающего нити веретена деления, с целью остановки митоза на стадии метафазы • 3)Перенос клеток на предметное стекло и обработка гипотоническим раствором Na. Cl для разрушения мембранных структрур клетки. • 4)Фиксация хромосом на предметном стекле • 5)Окрашивание хромосом

Методы окрашивания хромосом: • 1)Сплошная окраска красителем Романовского-Гимзы. Хромосомы окрашиваются равномерно по всей длине в темный цвет. Позволяет выявлтяь численные аномалии хромосом, но мало информативна при идентификации хромосом и изучении структурных перестроек. • 2)Дифференнциальная окраска приводит к появлению поперечной исчерченности хромосом. Так как для каждой пары хромосом характерен собственный специфческий характер чередования темных и светлых полос, метод позволяет выявлять как численные, так и структурные аномалии кариотипа, а также идентифицировать каждую хромосому.

Метод основан на микроскопическ ом исследовании хромосом с использованием различных способов окрашивания

• Дифференциально окрашенные хромосомы

Цитогенетический метод с полным кариотипированием обязательно применяется при: • 1) при обследовании детей с врожденными пороками развития • 2)при обследовании женщин, у которых наблюдались выкидыши и мертворождения • 3)при проведении дородовой диагностики наследственных заболеваний(если матери более 35 лет, если предполагается наследование в семье структурных нарушений отдельных хромосом(делеций, транслокаций и др. )

В норме у человека 23 пары хромосом(46, ХХ или 46 ХY), но есть патологии, связанные с изменением их числа и структуры. Определить их число и структуру можно с помощью цитогенетического метода. • • Синдром Дауна(47, Х Y(либо. Х), 21+) Синдром Эдвардса(47 Х Y(либо. Х), 18+) Синдром Патау(47 Х Y(либо. Х), 13+) Синдром полных моносомий по одной из 22 аутосомных хромосом Синдром Шерешевского-Тернера (45, Х 0) Трисомия (47, ХХХ) Синдом Клайнфелтера(47, ХХY) Синдром кошачьего крика (46, ХХ(либо Y), 5 p-

Когда нарушения касаются изменения числа хромосом, то проводятся более простые цитогенетические исследования, связанные с обнаружением тельца полового хроматина в интерфазных ядрах соматических клеток человека(Х-хроматина, тельца Барра)

Ядро фибробласта женщины, окрашенное флуоресцентным красителем. Стрелкой указано тельце Барра

В норме половой хроматин обнаруживается в ядрах большинства клеток(50 -70%) у лиц женского пола, тогда как у индивидом мужского пола он встречается крайне редко(0 -5% всех клеток).