БЫСТРЫЕ БЕСПРИБОРНЫЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ И ВИРУСНЫХ

БЫСТРЫЕ БЕСПРИБОРНЫЕ ТЕСТЫ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ И ВИРУСНЫХ ГЕПАТИТОВ к. х. н. Дробченко С. Н. , проф. Кальво А. , проф. Сэмюэльс Ф. ЗАО «Биоград» , СПб. , Orgenics LTD, Израиль, Orgenics PBS, Франция © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 1

Сокращение времени получения результата анализа способствует привлечению населения к добровольному тестированию на ВИЧ. Получение результатов тестирования в тот же день дает возможность интегрирования посетителей в систему медицинской психологической помощи, проведения немедленного послетестового консультирования, в случае необходимости, своевременного назначения антиретровирусной терапии. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 2

Классификация серологических тестов (ВОЗ) Классический иммуноферментный анализ ELISA, требующий более двух часов для постановки анализа, Быстрые Простые Тесты (БПТ – RST - Rapid Simple Test), требующие менее двух часов для получения результата. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 3

4 основные группы Быстрых Простых Тестов (ВОЗ) агглютинационные точечное иммуноферментное связывание с использованием твердой основы (иммунодот Иммуно. Комб) мембранные иммунохроматографические © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 4

Характеристики различных методов серодиагностики (данные ВОЗ) Тип теста (a) Кол-во тестов Время анализа (час: мин) t C° хранения Уровень сложности (b) 96 192 96 2: 05 1: 35 2 -8 2 -8 4 4 4 2 -8 3 3 Дополнительное оборудование Чувствительность (%) Специфич ность (%) Сероконверсия (с) Цена 1 анализа (d) 100. 0 98. 5 100. 0 99. 7 1. 1 0. 6 3. 2 0. 60 0. 45 0. 43 Автом. пипетки Нет 100. 0 98. 8 1. 0 2. 4 0. 88 2. 0 2 2 Автоматические пипетки 100. 0 99. 7 99. 4 1. 0 4. 9 1. 2 0. 9 2 Нет 99. 6 99. 7 3. 0 1. 2 Нет 98. 9 100. 0 99. 4 6. 2 2. 1 1. 4 2 ИФА ELISA Тест a Тест b Тест c спец. лаборато-рия, Инкубатор Вошер Ридер Автом. пипетки Агглютационный тест (Agglution test) Тест d Тест e 100 20 2: 05 0: 03 Иммуно. Комб (Immunodot/Immunocomb test) Тест f Тест g 36 48 0: 37 0: 27 2 -8 Мембранный тест (Flow through membrane test) Тест h 10 0: 05 4 -8 Хромотографический тест (Chromatographic membrane test) Тест i Тест j 30 40 0: 03 0: 11 2 -25 2 -8 1 1 a. Тесты a-j оценены и отобраны ВОЗ b. Уровень 1: небольшой или отсутствующий опыт лабораторной диагностики Уровень 2: требует предварительной подготовки реагентов Уровень 3: особые навыки в приготовлении разведённых серий и интерпретации картины агглютинации Уровень 4: обученный персонал и сложное лабораторное оборудование c Разница в сутках при выявлении позитивного результата в сравнении с референс-тестом d Оптовая специальная цена для ВОЗ, исключая фрахт и прочие издержки © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 5

Агглютационные, мембранные и иммунохроматографические тесты, обеспечивающие короткое время получения результата, менее чувствительны и специфичны, чем Быстрый Простой Тест Иммуно. Комб, основанный на иммуноферментном твердофазном анализе. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 6

При исследовании сероконверсионных панелей было показано, что только тесты Иммуно. Комб определяют сероконверсионное состояние на тех же или более ранних сроках, чем референс – ELISA – тесты. В то время, как БПТ, основанные на других технологиях, отстают от референс-тестов на 2 и более дней. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 7

Концепция Иммуно. Комб учитывает особенность появления первых антител, которые отличаются от антител, полученных позднее, во время задержанного иммунного ответа (различные изотипы синтезированных антител, различную аффинность и авидность, направленность на различные эпитопы или различные антигены). Тесты сконструированы на основе высокоочищенных видоспецифических антигенов. Это позволяет избежать перекрестных реакций при обнаружении антител к соответствующему возбудителю и выявить раннюю стадию заболевания. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 8

Схема стратегий тестирования, предложенных ВОЗ и UNAIDS Стратегия 2 Стратегия 1 Т 1+ Положит. результат Стратегия 3 Т 1 Т 1+ Т 1 - Т 1+ Отрицат. результат Т 1 - Т 1+Т 2+ Т 1+Т 2 Повторить Т 1 и Т 2 Т 1+Т 2 - Положит. результат1 Повторить Т 1 и Т 2 Т 1+Т 2+ Отрицат. результат Т 2 Отрицат. результа т Т 2 Т 1 - Т 1+Т 2+ Т 1+Т 2 - Отрицат. результат Т 1 -Т 2 Отрицат. результа Т 1+Т 2 - т Положит. результат1 Неопред. результат2 Т 1+Т 2+Т 3+ Т 1 -Т 2 - Т 3 Т 1+Т 2+Т 3 - Т 1, Т 2 и Т 3 – три различных быстрых простых теста. 1 Для впервые диагностируемых пациентов, результат Положит. должен быть подтвержден на втором образце результат1 2 Анализ должен быть повторен на образце взятом через 14 дней © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 3 При отсутствии любого риска заражения ВИЧ. Т 1+Т 2 -Т 3+ Неопред. результат2 Т 1+Т 2 -Т 3 - Группа высокого риска Группа низкого риска 9 Неопред. Отрицат. 2 результат3 результат

Рекомендации ВОЗ и UNAIDS по выбору стратегии тестирования в зависимости от цели тестирования и от распространенности ВИЧ инфекции Цель тестирования Распространенность ВИЧ инфекции Стратегия тестирования Безопасность переливания крови и пересадки органов любая 1 Скрининг >10% 1 10% 2 При наличии симптомов ВИЧ >30% 1 30% 2 При отсутствии симптомов ВИЧ >10% 2 10% 3 Постановка диагноза © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 10

Характеристики БПТ. (WHO. HIV assays: operational characteristics: report 15, Annex 2, simple/rapid assays, 2004). Наименование теста. Производитель Чувствительность (%) Специфичность (%) Рекомендованы как Serodia-HIV-1/2 (Fujirebio) 100 Подходящий CAPILLUS HIV-1/HIV-2 (Trinity Biotech plc) 100 98, 8 Наиболее подходящий Immunocomb II Bi. Spot HIV 1&2 (PBS Orgenics) 100 99, 7 Наиболее подходящий SPAN COMBAIDS VISUAL (Span Diagnostics Ltd. ) 100 88 Подходящий HIV TRI-DOT (J. Mitra & Co. Ltd. ) 99, 6 99, 7 Наиболее подходящий Accu. Spot HIV-1 and 2 (Specialty Bio. Systems Inc. ) 100 86, 3 Подходящий BIONOR HIV-1&2 (Bionor A/S) 100 98, 8 Подходящий SEROCARD HIV (Trinity Biotech plc) 100 97, 9 Подходящий HIV 1 & 2 Double. Check (Orgenics) 100 99, 4 Наиболее подходящий Easi. Dot HIV/Easi. Spot HIV 1(Nubenco Diagnostics) 95, 3 71, 3 Instant. CHEKTM-HIV 1+2 (EY Laboratories Inc) 99, 4 97, 6 Подходящий GENIE II HIV-1/HIV-2 (Bio-Rad) 100 99, 7 Наиболее подходящий Efoora HIV Rapid 14(Efoora Inc. ) 96, 2 98, 9 Подходящий Ora. Quick HIV-1/2 Rapid HIV-1/2 (Ora. Sure Technologies Inc. ) 98, 1 100 Наиболее подходящий SD Bioline HIV 1/2 (Standard Diagnostics) 100 99, 3 Наиболее подходящий Hema Strip(R) HIV 1/2 (Chembio Diagnostics Inc. ) 98, 1 100 Наиболее подходящий HIV 1/2 STAT-PAK (Chembio Diagnostics Inc. ) 97, 6 100 Наиболее подходящий HIV (1+2) Antibody (Colloidal Gold) (KHB Shanghai Kehua Bioengineering Co. Ltd. ) 100 Наиболее подходящий © ЗАО GENEDIA(R) HIV 1/2 Rapid (Green Cross Life Science Corp) «Биоград» , 2007 г. 100 99, 7 11 Наиболее подходящий Double. Check. Gold. TM HIV 1&2 (Orgenics Ltd. ) 96, 9 Наиболее подходящий 100

Сравнительная характеристика тестов при определение образцов сероконверсионных и низкотитражных панелей © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 12

Образцы сероконверсионной панели, определяемые каждым из тестов относительно референс-теста Monolisa Ag HBs Plus (0 соответсует первому образцу, определяемому референс-тестом) © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 13

Диагностика вирусных гепатитов Иммуно. Комб HBs. Ag Иммуно. Комб Anti-HBs. Ag Иммуно. Комб HBc Ig. M Внутренний контроль Иммуно. Комб HBc Ig. G Коровый антиген ВГС Иммуно. Комб HCV NS 3 и NS 4 NS 5 Иммуно. Комб HAV Ig. M Иммуно. Комб HAV Ab © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 14

Исследования, проведенные FDA (США), Европейским комитетом по стандартизации, ВОЗ, Минздравсоцразвития показали, что тесты Иммуно. Комб по точности, достоверности, надежности определения не уступают ELISA-технологии, при этом, чувствительность и специфичность их достигают, а в некоторых случаях и превосходят аналогичные показатели классического иммуноферментного анализа. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 15

1. Для индивидуального тестирования гребешок можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов. 4. Гребешок перемещается из ряда в ряд ванночки в соответствии с инструкцией (промывки и связывание с коньюгатом). 2. В ряд А ванночки вносятся образцы (сыворотка, плазма или цельная кровь) и контроли. 5. Цветная реакция в ряду F. 3. Гребешок вставляется в ряд А и инкубируется (реакция антиген-антитело). 6. Результат анализа в виде окрашенных точек. Верхняя точка: внутренний контроль. Нижняя точка и (или) средняя точки появляются в случае наличия - инфекции. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 17

В 2007 году по Государственному контракту в рамках Приоритетного национального проекта в сфере здравоохранения тесты Иммуно. Комб® II ВИЧ 1+2 Би. Спот поставляются в медицинские учреждения России. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 18

Цены IDA на БПТ, допущенные FDA, США. Май 2006 года © ЗАО «Биоград» ,

Технология Иммуно. Комб позволяет диагностировать широкий спектр инфекций: ВИЧ, Гепатиты А, В, С, Цитомегалию, Токсоплазмоз, Хламидиоз, Краснуху, Хеликобактериоз. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 20

«Быстрые простые методы в диагностике заболеваний TORCHкомплекса» © ЗАО «Биоград» , 2007 г.

«Диагностика и лечение заболеваний желудочно-кишечного тракта, ассоциированных с инфекцией Helicobacter pylori» © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 22

Методические рекомендации и руководства для врачей. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 23

Использование диагностикумов Иммуно. Комб в лабораторном обеспечении лечебно-профилактических учреждений стационарного и амбулаторнополиклинического типа, включая первичное звено, выездные кабинеты, полевые условия, позволяет оптимизировать процесс диагностики, осуществлять контроль за эффективностью вакцинации и медикаментозной терапии. © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 24

Регистрационное удостоверение ЗАО «Биоград» © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 25

ЗАО «Биоград» 15 лет в России! Адрес: 197101, г. Санкт-Петербург, ул. Мира, 14. тел. /факс: (812) 233 48 49, 498 04 00, тел. : (812) 498 58 78, 498 58 76. web: e-mail: http: //www. biograd. ru biograd@biograd. ru © ЗАО «Биоград» , 2007 г. 26