БРУЦЕЛЛЕЗ Бруцеллез (Brucellosis) – острая или хроническая бактериальная инфекционно-аллергическая болезнь, общая для человека и животных, которая характеризуется интоксикацией и преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, мочеполовой систем и других органов; затяжным течением, приводящим, как правило, к инвалидизации. Синонимы — мальтийская лихорадка, лихорадка Кипра, лихорадка Гибралтара, волнообразная лихорадка.
Таксономическое положение возбудителя бруцеллеза • Род: Brucella включает 10 видов Виды: Br. melitensis - 3 биовара(овцы и козы) Br. abortus - 7 биоваров(крупный рогатый скот) Br. suis -5 биоваров(свиньи, зайцы, северные олени, грызуны) Br. canis (собаки) и др. • Название эти бактерии получили в честь британского ученого-эпидемиолога Д. Брюса, который, будучи военным врачом на Мальте, впервые выделил и описал бруцеллу в 1887 году.
Морфологические свойства бруцелл q Мелкие грамотрицательные коккобациллы q Характеризуются полиморфизмом и имеют шаровидную, овоидную и палочковидную формы q Неподвижы q Капсулу образуют на средах с сывороткой q Спор не образуют q В последние годы часто выделяют L-формы возбудителя бруцеллеза, обладающие способностью к реверсии (т. е. переходить в типичные, патогенные формы, вызывающие заболевания). Окраска по методу Стампа Окраска по методу Грама
Культуральные свойства q Аэробы q Особенностью В. abortus является потребность ее в повышенном содержании оксида углерода (5— 10%) в атмосфере роста. q Температурный оптимум для роста 36— 37 °С; р. Н 7, 0 -7, 2; q Бруцеллы нуждаются в сложных обогащенных питательных средах, q Стимулирует рост добавление нативной сыворотки крови, крови или 1%-5 % глицерина. q Характеризуются замедленным ростом, особенно в первых генерациях (5 -10, а иногда 20 -30 сут. ). q Колонии бруцелл бесцветны, выпуклые, круглые — S-формы, или шероховатые — R -формы, нежные и прозрачные вначале, с возрастом мутнеют.
q Биохимически малоактивны q Для дифференциации бруцелл используют способность некоторых биоваров вырабатывать сероводород, а также чувствительность к бактериостатическому действию красителей (основного фуксина и тионина).
Устойчивость бруцелл Очень устойчивы в высушенных субстратах (сохраняются годами). При низких температурах (в почве на снегу) бруцеллы сохраняются в течение 4 -5 мес. Длительное время могут сохранятся в пищевых продуктах: - в охлажденном молоке - 45 сут. , - в масле - 67 сут. , - в мороженом мясе - 60 сут. Прямой солнечный свет в зависимости от интенсивности убивает бруцелл в период от нескольких минут до 3 -4 часов, УФЛ - 3 -5 минут. q При воздействии высокой температуры быстро гибнут: при 60°С через 30 мин, при кипячении почти моментально. q Более устойчивы к низким температурам: при 5— 8°С сохраняют жизнеспособность на протяжении 35 дней. q Дезинфицирующие вещества быстро убивают бруцелл. Так, под действием 2% раствора карболовой кислоты, 1% раствора хлорной извести, 0, 1% раствора хлорамина и 0, 2% раствора формалина они погибают в течение нескольких минут. q q q q
Антигены q Основные антигены представлены Sи R-липополисахаридными комплексами(S –ЛПС и R-ЛПС) и минимум 20 белковыми или гликопротеиновыми антигенами. q Липополисахаридный комплекс обладает детерминантами, специфичными и для А- (Br. abortus и Br. suis) и для М ((Br. melitensis) антигенов. q S-ЛПС – основной антиген, использующийся в стандартных диагностических тестах (агглютинация, связывание комплемента) Взаимодействие бруцелл с макрофагом. Ø Штаммы Brucella с гладким SLPS взаимодействуют с липидным «плотом» и после проникновения оказываются в эндосоме, которая направляется к ЭПР и после слияния мембран бруцеллы начинают размножаться. Ø Бруцеллы с R-LPS не используют липиды, быстро попадают в лизосомы и погибают.
Геном q Бруцеллы всех видов имеют гомологию 95% q Большинство из идентифицированных генов «факторов вирулентности» необходимы не для нанесения микроорганизмом «поражения» фагоцитирующей клетке, а для физиологической адаптации к условиям среды в ее репликативной фагосоме. q Например, это гены, кодирующие фермент цитохром-bd-оксидазу, имеющий высокий аффинитет к кислороду и позволяющий бруцеллам выживать в условиях окислительного стресса. q Оперон bvr. RS Brucella кодирует двухкомпонентную регуляторную систему, контролирующую экспрессию генов, содействующих сохранению целостности клеточной оболочки. Измененные свойства мембраны bvr. RS-мутантов В. abortus делают их менее устойчивыми к кислой среде, в которой им приходится находиться в фагосомном компартменте макрофагов хозяина на ранних стадиях инфекции. Обнаружено также, что bvr. RS-мутанты В. abortus неспособны достичь репликативной фагосомы
Факторы патогенности q эндотоксин; q фермент агрессии гиалуронидаза обеспечивает инвазию q низкомолекулярные протеины, ингибирующие фагосомолизосомальное слияние.
Патогенность бруцелл q S-(ЛПС) обладает иммуномодулирующей активностью, которая потенциально помогает бактерии в обеспечении длительного существования в макрофагах хозяина. В частности, эта молекула не разрушается фагоцитами, а переносится к их клеточной поверхности, где она образует макродомены с молекулами МНС класса II. Образование комплекса «МНС класса II—ЛПС» приводит к снижению способности инфицированного хозяина активировать специфичные к антигенам Brucella CD 4+ Т-клетки q Бруцеллы ведут эндосимбиотический образ жизни в макрофагах и, соответственно, в свободноживущих почвенных амебах, что неизбежно сказывается на клинике вызываемой ими болезни. q Бруцеллы – факультативные внутриклеточные паразиты
Патогенез q Проникнув в организм через кожу и слизистые, бруцеллы по лимфатическим путям попадают в регионарные ЛУ q Поступление возбудителя по лимфатическим путям в регионарные лимфатические узлы — первая фаза патогенеза (фаза лимфогенного заноса и лимфорецепторных раздражений) соответствует инкубационному периоду. Бруцеллы могут длительно сохраняться в лимфатических узлах, обусловливая иммунологическую перестройку организма без каких-либо клинических проявлений (первичная латенция). q При значительном накоплении возбудителя бруцеллы могут поступать в кровь и распространяться по всему организму — фаза гематогенного заноса, первичной генерализации. q Клинически это соответствует острому периоду болезни, характеризующемуся лихорадкой, ознобами, потами, микрополиаденитом и другими симптомами. q Исходом острого бруцеллеза может быть полное рассасывание воспалительных образований, формирование стойких, необратимых рубцовых изменений в пораженных органах и тканях, переход в хроническую форму.
Патогенез q Из крови возбудитель захватывается клетками системы мононуклеарных фагоцитов различных органов (печень, селезенка, костный мозг и др. ) с формированием в них метастатических очагов инфекции (гранулем)— фаза полиочаговых локализаций. q С началом генерализации инфекции и формированием метастатических очагов происходит иммуноаллергическая перестройка организма, определяющая особенности патогенеза и патоморфологической картины заболевания. q Бруцеллы длительно сохраняются в метастатических очагах, из них происходит повторная многократная генерализация возбудителя с развитием реактивно-аллергических изменений — фаза экзоочаговых обсеменении и реактивно-аллергических изменений. q Хроническое течение болезни, сопровождающееся многократной и повторной генерализацией возбудителя из метастатических очагов, придает заболеванию характер хрониосепсиса. q Следующая фаза — фаза резидуального метаморфоза — соответствует исходам бруцеллеза, завершающегося либо полным рассасыванием воспалительных образований, либо формированием стойких необратимых рубцовых изменений в пораженных органах и тканях.
Хроническое воспаление q Хроническое воспаление развивается в результате персистирования патогена в организме. q Постоянный антигенный стимул является основным индуктором воспаления. q Биологическая целесообразность воспаления как защитно-приспособительной реакции организма во многом теряется, так как не способна эффективно элиминировать патогенный раздражитель. q Ключевая роль в развитии хронического воспаления принадлежит иммунным механизмам. q Среди клеток в развитии хронического воспаления центральную роль играют Т-лимфоциты и макрофаги. q Индуктором клеточной инфильтрации ткани выступают патоген и его продукты, а также цитокины (хемокины), продуцируемые активированными сенсибилизированными Т-лимфоцитами и макрофагами. q Под влиянием цитокинов (макрофагального белка воспаления, RANTES, ИЛ-8, М-КСФ, ГМ-КСФ) происходит приток свежих интактных моноцитов из крови и костного мозга, а при участии фактора торможения миграции макрофагов (ФТММ), фибринонектина, фактора В комплемента и других – фиксация, закрепление и распластывание их в зоне воспаления. q Активированные Т-лимфоциты выступают в роли костимуляторов провоспалительных цитокинов (ИЛ-1, ФНОα), продуцируемых макрофагами. q В свою очередь, ИЛ-1 активирует Т-лимфоциты и вызывает повышенную продукцию ими ИНФγ, который является мощным активатором моноцитов-макрофагов. q Активированные продуктами патогена, цитокинами, вырабатываемыми активированными Т-клетками, в частности, ИНФγ и ИЛ-6, макрофаги в инфильтрате усиленно вырабатывают и продуцируют в межклеточное пространство медиаторы воспаленния: эйкозаноиды (ПГЕ 2, ЛТА 4, ЛТВ 4, ТХВ 2, ЛТС 4, ФАТ), ИЛ-1, ФНОα, активные формы кислорода, оксид азота, различные гидролитические ферменты. q Воздействие перечисленных факторов на окружающие ткани приводит к вторичному повреждению клеток и межклеточных структур, что является новым стимулом к воспалению. Т q Таким образом, в результате постоянного притока свежих моноцитов-макрофагов в зону воспаления, их активации и высвобождении ими медиаторов, воспаление принимает хроническое течение.
Клинические формы В соответствии с Международной статистической классификацией болезней и проблем, связанных со здоровьем (Десятый пересмотр. – Женева, 2003 г. МКБ-10) различают следующие формы бруцеллеза (A 23): • A 23. 0 Бруцеллез, вызванный Brucella melitensis • A 23. 1 Бруцеллез, вызванный Brucella abortus • A 23. 2 Бруцеллез, вызванный Brucella suis • A 23. 3 Бруцеллез, вызванный Brucella canis • A 23. 8 Другие формы бруцеллеза • A 23. 9 Бруцеллез неуточненный
q Инкубационный период – 1 -3 недели. q Начало заболевания острое
Клиника q Классификация по Рудневу q Состояние • Компенсированный процесс. • Скрытый (латентный) бруцеллез. • Субкомпенсированный. • Острый бруцеллез — до 3 месяцев. • Декомпенсированный. • Подострый бруцеллез — до 6 месяцев. • Латентный: первичный и вторичный. • Хронический бруцеллез — свыше 6 месяцев. • Резидуальный (свыше 2 -3 лет) q Первичный латентный бруцеллез — когда у людей отмечается положительная реакция на бруцеллез без клинических проявлений болезни и отсутствуют бруцеллы в анализе. q Вторичный латентный бруцеллез встречается у людей с положительной реакцией на бруцеллез, перенесших данное заболевание.
Иммунитет q После перенесенного заболевания формируется непрочный и непродолжительный (6 -9 месяцев) иммунитет q Иммунитет клеточный с развитием ГЗТ q Образующиеся специфические антитела выраженным защитным действием не обладают
Эпидемиология q Зооноз q Основные источники – овцы, козы, крупный рогатый скот, свиньи; но отмечались случаи заражения от оленей, собак, кошек q Особое значение имеет неблагополучие по бруцеллезу овцеводческих хозяйств q Пути передачи – контактный, алиментарный и реже аэрогенный q Контактный путь имеет значение для животноводов. Ветеринаров. Доярок, пастухов) q Из пищевых продуктов наибольшую опасность представляют сырое молоко и молочные продукты(сыры, брынза, сметана) q Заболевание носит выраженный профессиональный характер
Лабораторная диагностика • Клинический материал: кровь, сыворотка крови, спинномозговая жидкость, синовиальная жидкость (при артритах), моча, желчь, гной (при абсцессах), пунктаты костного мозга и лимфатических узлов • • • Экспресс метод - РИФ Бактериологический метод Биологический метод (параллельно с бактериологическим): заражение морских свинок или беспородных белых мышей Серологические методы (реакции агглютинации Хеддельсона, Райта, Кумбса, ИФА, РНГА) ПЦР Кожно-аллергическая проба Бюрне • • •
Лабораторная диагностика q Биологический метод ставится параллельно с бактериологическим q Идентификация бруцелл осуществляется по отношению культуры к СО 2, способности к продукции сероводорода, отношению к основным красителям и в реакции агглютинации на стекле с монорецепторными и R-сыворотками q Серологические методы: ü Выявление специфических антител: Реакция Хеддлсона, РПГА, ИФА, непрямой ИФ, реакция Кумбса Реакция Хеддлсона – реакция агглютинации на стекле (в качестве антигена для постановки реакции Хеддлсона и Райта применяют единый бруцеллезный диагностикум) Реакция Райта – развернутая реакция агглютинации (диагностический титр 1: 100)
Лабораторная диагностика q Серологические методы: ü Выявление антигенов возбудителя: РИФ, ИФА, РНАт q Кожно-аллергическая проба Бюрне с бруцеллином: Внутрикожная аллергическая проба основана на способности организма, сенсибилизированного бруцеллезным антигеном, специфически отвечать местной реакцией (отек, болезненность) на внутрикожное введение бруцеллезного аллергена. Реакция специфична, но выявляется у больных позднее, чем антитела, и сохраняется очень долго, иногда годами, после исчезновения клинических симптомов. Необходимо иметь в виду, что аллергическая реакция может быть положительной в случаях бессимптомной инфекции, а также у привитых живой бруцеллезной вакциной и у лиц, длительно контактировавших со специфическим антигеном.
Специфическая профилактика q Для иммунизации людей против бруцеллеза используется сухая живая вакцина, приготовленная из вакцинного штамма коровьего вида (В. abortus 19 -BA). q Иммунитет сохраняет наивысшую напряженность в течение 5 - 6 месяцев. q Ревакцинация проводится через 10 - 12 месяцев после вакцинации лицам с отрицательными серологическими и аллергическими реакциями на бруцеллез.
Лечение q Наиболее эффективны препараты тетрациклинового ряда, особенно доксициклин q Применяются рифампицин, хлорамфеникол, аминогликозиды q Лечение проводится длительно, несколькими курсами
Скачать презентацию БРУЦЕЛЛЕЗ Бруцеллез Brucellosis острая или хроническая бактериальная
бруцеллез.ppt