Вирусология. Болезнь Ауески.ppt
- Количество слайдов: 42
Болезнь Ауески Семейство герпесвирусов
Семейство герпесвирусов Herpesviridae Название семейства происходит от греческого herpein через латинское herро – ползать, ползущий. Герпес вирусы обладают сложной структурой, состоят из ДНК белка, липидов и углеводов. Имеют сферическую форму. Молекулярная масса свыше 100 МД. Диаметр вирионов 120 -200 нм. Они состоят из сердцевины, капсида, мембраны и оболочки.
В центре сердцевины находится ДНК и структурный белок. Она окружена икосаэндрическим капсомером, который покрыт мембраной и окружен двухслойной с выступами липидной оболочкой. Нуклеокапсид содержит 162 капсомера: 150 шестиугольных (гексамеры) и 12 пятиугольных (пентамеры) капсомер. В клетках хозяина они формируют характерные внутриядерные включения.
Структура генома представлена ДНК в виде непрерывной линейной двухспиральной молекулы, массой 80 -150 МД. Длина ДНК составляет 120000 - 250000 нуклеотид. ДНКинфекционна. Структурные белки – в структуре вирусов содержится не менее 20 полипептидов. Три главных белков (гликопротеиды) находятся в оболочке вириона.
Болезнь Ауески (псевдобешенство, зудящая чума, бешеная чесотка) Вирус относится к подсемейству Alphaherpesvirinae роду найкиловирусов. Это подсемейство характеризуется коротким циклом репродукции с цитопатическим эффектом в клетках инфицированных культур.
К вирусу восприимчивы все сельскохозяйственные животные, пушные звери, дикие плотоядные и грызуны. Птицы не чувствительны. Наиболее чувствительны свиньи, собаки, кошки. Молодые животные восприимчивее взрослых.
Болезнь впервые описал и дифференцировал ее от бешенства венгерский исследователь Ауески в 1902 году. В России болезнь Ауески впервые установили в 1909 году. Вирионы содержат двухспиральную линейную ДНК. Вирус состоит из одетого нуклеокапсида, окружающего гиом, состоящего из 8 белков. Вирусная оболочка имеет 9 структурных белков, 8 из которых – гликопротеины.
Клинические признаки у свиней прежде всего определяются возрастом животных. У взрослых свиней болезнь, как правило, протекает доброкачественно, проявляясь в течение 1— 3 дней незначительной лихорадкой, угнетением, снижением аппетита, иногда рвотой. Большая часть животных может переболеть в скрытой форме. В некоторых случаях взрослые свиньи болеют тяжело. Кроме описанных признаков, появляются истечения из носа, кашель, шаткая походка, передвижения по кругу, тяжелое дыхание, выделение слюны, параличи конечностей, глотки и гортани; животные погибают в коматозном состоянии.
У свиноматок нарушается лактация, появляются массовые аборты, мертворождения и мумификация плодов. Наиболее злокачественно болезнь протекает у поросят-сосунов и отъемышей. Течение болезни острое. Наблюдается повышение температуры, лихорадка, угнетение, судороги шейных мышц, мышц позвоночника, развивается паралич глотки, гортани. Заболеваемость у поросят может достигать 70 -100%, летальность у двухнедельных поросят — 80 -100 %, у более старших животных — 40 -80%. В отличие от других видов животных у свиней всех возрастов зуд не возникает.
У КРС повышается температура до 42°С, прекращается жвачка, появляется сильный зуд в области ноздрей, губ, щек, глаз. Животные отказываются от корма, беспокоятся, непрерывно лижут зудящие места, пульс и дыхание учащены. Расчесанные до крови места отекают. Наблюдаются сильное слюнотечение, потливость, нервная дрожь. Через 1 -2 суток с момента появления первых симптомов животное погибает. У овец и коз болезнь проявляется такими же клиническим признаками, что и у крупного рогатого скота. Особенно ярко у них выражен зуд, общее возбуждение бывает редко. Животное погибает в течение 1 -3 суток.
Пушные звери, кошки, собаки в начале болезни становятся апатичными, отказываются от корма, затем появляется испуганный взгляд, беспокойство и сильный зуд. Лишь у норок, соболей почти никогда не бывает зуда (преобладает коматозное состояние). Животные издают болезненные звуки, у них резко повышается возбудимость Признаки возбуждения у собак могут напоминать клиническую картину бешенства (грызут предметы, нападают на других животных), но агрессивности к людям нет. Животные погибают в течение 2 -3 суток.
Инкубационный период длится от 1 до 15 дней и более. Его продолжительность зависит от способа заражения, вирулентности возбудителя, резистентности животного.
Хотя вирус и обладает тропностью к нервной ткани, патогенез заболевания имеет свои особенности в зависимости от способа заражения, вида и возраста животных. При проникновении возбудителя через слизистую оболочку ротовой полости и верхних дыхательных путей у свиней в воротах инфекции происходит быстрая репродукция вируса, а у остальных видов животных — лишь незначительное увеличение его концентрации. После короткого периода он проникает в мозг прямым нейролимфогенным путем по обонятельному, тройничному и языкоглоточному нервам. Репродукция вируса вызывает острое воспаление мозга и его оболочек. В таких случаях у животных, особенно у плотоядных и нередко у молодняка свиней, развивается клиническая картина энцефалита.
При проникновении через кожу вирус довольно быстро репродуцируется в месте внедрения и затем гематогенным и лимфогенным путями распространяется по всему организму, но тяжелых поражений мозга при этом не наступает. В организме свиней возбудитель накапливается во всех внутренних органах и вызывает наряду с нервными явлениями симптомы тяжелой септицемии. Последняя обусловливает лихорадку и геморрагический диатез — отеки и кровоизлияния в различных органах. В процессе болезни также нарушается минеральный, белковый и углеводный обмен, изменяется содержание ацетилхолина и гистамина в ЦНС коже, что вызывает развитие зуда (гиперестезия). При вовлечении в патологический процесс дыхательной и пищеварительной систем могут развиваться признаки отека легких, пневмония и диарея.
Устойчивость. Вирус чувствителен к эфиру, хлороформу, инактивируется желчью. Устойчив к широким колебаниям p. H (5 -9), к прогреванию, сохраняя активность при температуре +60 градусов 45 -50 минут, при температуре +80 градусов инактивируется через 3 минуты. Холод консервирует вирус, при температуре -4 он сохраняет активность от 130 до 4 лет. В трупах сохраняется от 1 до 6 месяцев. Горячий 3% раствор гидроокиси натрия, 20% гашеная известь, 1% раствор формальдегида убивают вирус за 5 -20 минут.
Антигенная структура не установлена. Вирус индуцирует образование нейтрализующих, комплементносвязывающих и преципитирующих антигенов, которые можно обнаружить с помощью РА, РСК, РДП.
Культивирование. Вирус пассируется на кроликах, белых мышах, в первичных культурах клеток куриного эмбриона, почек КРС, перевиваемых клетках He. La, L, Hep – вызывая образование некротических фокусов – бляшек. При заражении куриных эмбрионов образуются специфические зоны поражения хорин аллантоиса и гибель через 24 -96 часов. Высоко вирулентные штаммы для свиней и КРС вызывают образование синтиция в культуре клеток.
Источник инфекции – больные животные. Для болезни Ауески характерна горизонтальная передача – от бессимптомного носителя к здоровому животному. Взрослые свиньи, переболевшие легко, являются опасными носителями вируса не только для свиней, но и для других видов животных. В естественных условиях заражение происходит респираторным путем, а также через корм, воду, подстилку, загрязненную выделениями больных животных. Из организма вирус выделяется с секретами носовой и ротовой полостей, у подсосных маток – с молоком. При прямом контакте больного животного со здоровым происходит заражение через поврежденные кожные покровы, слизистой оболочки носовой полости, глаз, половых органов.
Диагноз на болезнь Ауески ставят на основании учета эпизоотологических данных, клинических признаков, результатов патологоанатомического вскрытия и лабораторных исследований. В лабораторию посылают головной мозг, кусочки паренхиматозных органов (легких обязательно), лимфоузлы. От абортированных животных используют плоды. Биопробу ставят на кроликах.
Лабораторная диагностика. Методы: 1. Выделение вируса 2. Прямая и непрямая иммуннофлюоресценция 3. Радиоиммуннологический метод 4. Кожная проба, РН, РСК, EZISA 5. Биопроба, заражение культуры клеток Для биопробы используют двух кроликов, которым вводят внутримышечно или подкожно 1 мл 10% суспензии материала. Инкубационный период от 36 -48 часов до 4 -6 дней.
Различают формы болезни: 1. Энцефалическая – начинается беспокойством, расширением зрачка, появляются судороги шейных и жевательных мышц, скрежет зубами, прогибание позвоночника. Эпилептические припадки по мере развития болезни повторяются все чаще, и доводят животного до полного изнеможения. Первичная репродукция вируса в носоглотке и гортани приводит к развитию ларингофарингита, проявляющегося истечениями из носа, ненормальным визгом или полной афонией. Нередко развиваются полная слепота и прогрессирующий паралич мышц тела.
2. Зудневая – общее беспокойство, животное лижет и вырывает шерсть в месте введения вируса, иногда отмечают зуд и на других участках тела. Кролик падает на бок и погибает без парлича. 3. Менингиальная – сильное возбуждение, скрежет зубов, животное падает на бок и погибает при наличии судорог. Биопробу считают положительной, если кролики погибают с типичными клиническими признаками через 2 -10 дней после введения вируса. В культуре клеток вирулентные штаммы образуют типичные симкласты, зернистость в цитоплазме.
Дифференциальная диагностика. При дифференциации от бешенства проводят биопробу и РПД, микроскопию для выявления телец Бабеш-Негри. Для исключения чумы, болезни Тешзена – биопробу на кроликах, гриппа свиней – биопробу и исследуют выделенный вирус в РГА, РТГА. Листериоз, сальмонеллез, отечную болезнь – исключают бактериологическими исследованиями, отравления – данными лабораторного химического анализа и биопробы.
Иммунитет. Переболевшие животные приобретают напряженный иммунитет на многие годы. Сыворотки крови переболевших свиней содержат вируснейтрализующие антитела в титре 1: 32 — 1: 256. Поросята-сосуны под иммунными матками приобретают колостральный иммунитет, как правило, недостаточной напряженности и длительности.
В настоящее время для активной иммунизации сельскохозяйственных животных рекомендована сухая культуральная вирусвакцина ВГНКИ против болезни Ауески свиней, крупного рогатого скота и овец (П. М. Базылев, Э. М. Прохорова). В неблагополучных хозяйствах здоровое свинопоголовье ею вакцинируют с 2 -дневного, а в угрожаемых — с 15 — 20 -дневного возраста, двукратно с интервалом в 20 — 25 дней, иммунитет наступает на 5 — 7 -й день после первой прививки и сохраняется на 1, 5 года. Для вакцинации свиней используется также эффективная вирус-вакцина из штамма БУК 628, которая обеспечивает быстрое оздоровление и надежную санацию стада от вирусоносительства (Г. X. Камалов, И. В. Селиванов).
Пушных зверей, овец и свиней прививают инактивированной культуральной вакциной против болезни Ауески. Она совершенно безвредна, иммунитет наступает не позднее 8 — 10 -го дня с момента прививки и сохраняется у пушных зверей не менее 6 месяцев, у свиней и овец — 10 месяцев. Пассивную иммунизацию животных против болезни Ауески проводят специфическим гамма-глобулином, обеспечивающим иммунитет длительностью 3 -4 недель. Этот биопрепарат в основном используют в неблагополучных звероводческих хозяйствах.
Анализ эпизоотической ситуации показывает, что болезнь Ауески широко распространена в мире. По данным МЭБ (Handi. Status II , 2007) , за период с 2000 по 2004 гг. заболевание было зарегистрировано в 51 стране. Наибольшее количество стран, где зафиксированы вспышки БА было в Европе, а из африканских стран только Руанда заявляла о вспышках заболевания. Необходимо отметить, что список неблагополучных стран включал и такие развитые государства как США, Германия, Франция, Нидерланды, Япония и т. д. Количество стран неблагополучных по болезни Ауески в 2000 -2004 гг. (по данным МЭБ)
Международный опыт (Великобритания, Дания) показывает, что искоренение заболевания на территории страны возможно, применении методов борьбы включающих выявление инфицированных животных (в том числе латентно инфицированных) и их выбраковка, а также реализация комплекса санитарноэпидемиологических и др. мер. В то же время, применение таких методов борьбы в странах и областях с высоким процентом инфицированных животных требует значительного финансирования и не гарантирует устойчивого благополучия. Альтернативным способом решения проблемы является выявление и выбраковка инфицированных животных без прекращения вакцинации. Иммунизация свиней против БА проводится в таких государствах как США, Аргентина, Бразилия, Франция, Ирландия, Испания, Нидерланды, Португалия, многих восточноевропейских странах и др. (данные на 2004 г. ).
Средством выбора для иммунизации свиней в развитых странах мира являются маркированные по гликопротеину g вакцины. Их применение позволяет впоследствии, с помощью дискриминирующих тестов, дифференцировать вакцинальный и инфекционный иммунитет и объективно контролировать выбраковку животных. Так, в Европе в неблагополучных по БА стадах свиней все репродуктивное поголовье животных подвергают двух - трехкратной (каждые 4 месяца, в течении трех лет) вакцинации. Параллельно с помощью ИФА проводят серологический скрининг. Сероположительных по специфическому гликопротеину животных выводят из воспроизводственного стада.
Маркированные вакцины против болезни Ауески различных производителей Производитель, страна Живые вакцины (штамм, делеция гена) Инактивированные (штамм, делеция гена) HIPRA, Испания « Bartha K 61 » g. E , g. I (-) Schering-Plough , США «S-PRV-155 Iowa» g. I, или g. X, (-) Merial , Франция - « Bartha K 61 » g. E , g. I (-) Boehringer Ingelheim , США « Bartha K 61 » g. E , g. I (-) - Fort Dodge , США « Bartha K 61 » g. E , g. I (-) - Intervet, Нидерланды « Begonia » g. E , g. I , (-) « Phylaxia » g. I (-) VETERINA , Хорватия « Bartha K 61 » g. E , g. I (-) « 53 p 2» g. I (-) Ceva , Франция « MNC+/10 a » g. E , g. I (-) -
Из данных таблицы следует, что наиболее распространенный штамм, применяемый для изготовления вакцин - Bartha K 61. У него, как и у ряда других штаммов (Begonia, BUKTK 900, Norden, NIA-4) отсутствуют гены, кодирующие экспрессию гликопротеина g. E, что существенно снижает вирулентность вируса. В штаммах Bartha K 61, Begonia , Phylaxia , 53 p 2 делетирован ген g. I. Также у Bartha K 61 инактивирован ген UL 21 и имеется мутация в последовательности гликопротеина g С, а штаммы Begonia и S PRV -155 Iowa не имеют фермента тимидинкиназы. Штамм MNC +/10 a получен из исходного штамма Bartha K 61.
Конечно, все существующие сегодня вакцины обладают рядом недостатков. Так, для живых вакцин имеется зависимость между степенью аттенуации вакцинного штамма и иммуногенностью препарата. Вирусвакцины индуцируют более слабый материнский иммунитет, чем инактивированные препараты. Вакцинный вирус может передаваться посредством прямого контакта другим животным, он также иногда обладает остаточной вирулентностью для отдельных видов животных. Это снижает безопасность живых вакцин. К недостаткам инактивированных вакцин следует отнести часто встречающиеся локальные реакции в месте введения вакцины. Кроме этого, инактивированные вакцины могут приводить к появлению реакции гиперчувствительности. Данные препараты также имеют более высокую стоимость.
Россия стационарно неблагополучна по болезни Ауески. Ситуацию в стране можно охарактеризовать как эндемическую. По данным МЭБ (Handi. Status II , 2007; WAHID Interface , 2007; WAHIS , 2007) на территории РФ в период с 1997 по 1999 гг в среднем в год регистрировали около 15 неблагополучных по БА пунктов, а в период с 2000 по 2006 гг. их среднегодовое число снизилось до 7 Количество неблагополучных пунктов по б. Ауески у свиней в РФ с 1996 по 2006 г
Из рисунка видно, что заболевание регистрировали на территории 18 регионов РФ. Красным цветом на карте выделены регионы где заболевание возникало неоднократно (Саратовская, Волгоградская область, Краснодарский край, Республики Башкортостан и Татарстан). За первое полугодие 2007 года зафиксированы три вспышки БА: в Самарской, Калужской областях и Р. Башкортостан.
Противоэпизотические мероприятия к БА на территории нашей страны регламентируют снятие карантина с неблагополучного по БА свинохозяйства через 30 дней после прекращения заболевания и удаления из хозяйства переболевших животных. После снятия карантина проводят вакцинацию свиней в течение года. Оздоровленным считается хозяйство, где в течении полугода после прекращения вакцинации двукратный серологический контроль показал отрицательные результаты.
При наложении карантина запрещают ввод, вывод и перегруппировку свиней, прекращают случку, взвешивание, татуировку, проводят текущую дезинфекцию, дератизацию и другие мероприятия, способные приостановить дальнейшее распространение болезни. Поголовье животных неблагополучного хозяйства клинически осматривают и выборочно термометрируют. Больных и подозрительных по заболеванию животных изолируют и лечат глобулином, симптоматическими средствами и антибиотиками (предупреждение вторичной инфекции). Клинически здоровых животных немедленно вакцинируют при одновременной санации внешней среды. В местах изоляции животных дезинфекцию проводят ежедневно, а в помещениях со здоровыми животными — еженедельно. Навоз и подстилку обезвреживают биотермически, а навозную жижу — хлорной известью (12 кг/м 3). Мясо вынужденно убитых свиней обезвреживают проваркой. Шкуры снимать не следует; их опаливают или ошпаривают. Трупы сжигают или утилизируют.
В России зарегистрированы и разрешены для применения две маркированные вакцины: § вирусвакцина против БА свиней и овец из штамма «ВК» , маркированного по гликопротеиду g. E, производства ФГУ ВНИИЗЖ, Россия; § вирусвакцина против БА свиней из штамма «Begonia» , производства Intervet, Нидерланды.
Помимо возможности различать привитых свиней на имеющих постинфекционные антитела и поствакцинальные, применение вирусвакцины против БА свиней и овец из штамма «ВК» обуславливает быструю защиту от заболевания (на 5 – 7 день после вакцинации), что позволяет использовать препарат для купирования вспышки заболевания. У двукратно привитых животных продолжительность иммунитета сохраняется в течение 12 месяцев. Вакцина имеет невысокую стоимость, а изучение ее эффективности показало, что применение ее в неблагополучном по БА стаде свиней, регистрируют постепенное снижение количества животных имеющих постинфекционные антитела.
Вирусология. Болезнь Ауески.ppt