БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ С/Х ЖИВОТНЫХ Выполнила Лоретц А. Г.
Стандартный биохимический анализ крови включает определение различных параметров, отражающих состояние белкового, углеводного, липидного и минерального обмена, а также активность некоторых ключевых ферментов сыворотки крови. Оценка результатов биохимического исследования крови, особенно в динамике в процессе развития болезни, имеет большую диагностическую и прогностическую ценность при многих острых и хронических заболеваниях внутренних органов. Изменения биохимических показателей, являясь в большинстве случаев неспецифическими, позволяют судить о характере и степени нарушения процессов метаболизма как в целом организме, так и в отдельных органах.
Сопоставление этой информации с клинической картиной заболевания и результатами других лабораторных и инструментальных методов исследования дает возможность оценить функциональное состояние печени, почек, поджелудочной железы, эндокринных органов, системы гемостаза, а нередко позволяет составить представление о характере патологического процесса и его активности (воспаление, некрозы, аутоиммунные процессы и т. п. ), своевременно распознать ряд осложнений.
ВЗЯТИЕ МАТЕРИАЛА Обязательно натощак. Шерсть или перо на месте взятия крови выстригают, очищают место укола ватным тампоном, смоченным спиртом эфиром. Укол делают на глубину до 2 мм. Первую каплю крови стирают, т. к. она содержит случайные примеси и лимфу, а последующие берут для исследования. Очень важно, чтобы кровь вытекала из ранки без надавливания на ткани, иначе она смешивается с лимфой и изменяет свой клеточный и биохимический состав. Истечение крови можно ускорить, если предварительно прогревать место укола в теплой воде или источни ком сухого тепла (фен, электролампа).
Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать про тивоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Предварительно иглы стерилизуют кипячением в 1% ном растворе бикарбоната натрия, а место прокола смазывают раствором йода. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом в 20 30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.
МЕСТО ВЗЯТИЯ КРОВИ КРС: Кровь берут из яремной вены, желательно утром до кормления животных. Волосы на месте взятия крови выстригают, операционное поле протирают 3 % м раствором фенола. У каждого животного кровь берут стерильной иглой.
Лошади: Кровь у лошадей берут из яремной вены. Обычно вену пережимают пальцем, а голову поднимают. При массовых исследованиях для пережатия вены можно пользоваться резиновым жгутом. При работе с табунными лошадьми обязательно строят расколы или станки, так как эти животные могут нанести людям и себе травмы.
Свиньи: Для взятия проб крови у свиней используют разные методы. Фиксируют животных за верхнюю челюсть с помощью веревочной или кожаной петли. Кровь берут из сосудов уха или хвоста путем прокола или надреза сосуда. В практике чаще всего кровь берут из хвоста, причем в некоторых случаях вместо прокола сосуда отрубают кончик хвоста секачом (ножом для вскрытий) или рассекают его вдоль ножницами.
Овец для взятия крови прогоняют через раскол, рядом с которым выкапывают траншею глубиной около 1 м (до пояса человека). Ветеринарный специалист находится в этой траншее, и к нему по очереди подводят овец. Яремная вена у овец легко пережимается пальцем.
Птицы: У мелких птиц (например, воробьиных и мелких куликов) кровь следует брать из яремной вены (правая сторона шеи), используя инсулиновый шприц объемом 0, 3 0, 5 мл и иглу для подкожных инъекций длиной 0, 33 мм. У более крупных птиц (например, уток, лысух, чаек и цапель) кровь можно брать из яремной вены или медиальной метатарзальной (ножной) вены , используя шприц объемом 1 2 мл и иглу для подкожных инъекций. У некоторых крупных птиц кровь можно брать из плечевой вены (на крыле), или из сердца.
Собаки, кошки: Пункцию вены лучше всего производить на передних конечностях в v. Cephalica, посередине между локтевым и запястным суставами.
В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ЗАДАЧ ИССЛЕДОВАНИЯ АНАЛИЗУ ПОДВЕРГАЮТ ЦЕЛЬНУЮ КРОВЬ, ПЛАЗМУ ИЛИ СЫВОРОТКУ. В цельной крови определяют морфологические показатели, а также содержание глюкозы, кетоновых тел, меди, цинка, кобальта, марганца, селена и др. , т. е. веществ, равномерно распределенных между плазмой и эритроцитами. Для исследования веществ, неравномерно распределенных между клетками и жидкой частью крови, следует использовать сыворотку или плазму. В сыворотке, например, исследуют общий белок и его фракции, остаточный азот, мочевину, свободные аминокислоты, липиды, холестерин, билирубин, кальций, неорганический фосфор, магний, йод, связанный с белком (СБЙ), каротин, витамины, ферменты и др. В плазме резервную щелочность, содержание натрия, калия, неорганического фосфора, магния, каротина, витаминов А, С и др.
Для получения пробы цельной крови или плазмы ее стабилизируют, т. е. в пробирку вносят противосвертывающее вещество антикоагулянт. Антикоагулянты лучше применять в виде растворов. Использование того или другого антикоагулянта определяется направлением исследования и сроками хранения. Так кровь, стабилизированная лимоннокислым или щавелевокислым натрием можно хранить не более суток. При изучении клеточного состава крови гепарин используют только для немедленных исследований, в противном случае он вызывает постепенное "старение" клеток и их распад. Повышенные дозы антикоагулянтов могут вызывать гемолиз эритроцитов или разведение пробы.
Для получения сыворотки пробирки с кровью рекомендуется в процессе взятия крови помещать в термостат с температурой до 38°С. При массовых обследованиях животных таким импровизированным термостатом может быть достаточная емкость с водой указанной температуры. После завершения работ по взятию крови, свернувшиеся пробы обводят тонкой спицей из нержавеющей стали для лучшего отделения сыворотки и ставят в термостат при 37 38°С на 1 2 часа для окончательного отделения сыворотки. Сыворотку сливают и центрифугируют 20 минут при 2000 3000 об/мин. Для получения плазмы кровь с антикоагулянтом центрифугируют 20 30 минут при 2000 3000 об/мин. Плазма крови отличается от сыворотки наличием фибриногена.
ДОСТАВКА Пробирки должны быть подписаны. Доставить кровь следует в кротчайшие сроки по возможности в сумке холодильнике. НЕ ТРЯСТИ! НЕЛЬЗЯ доставлять кровь в шприце.
ФАКТОРЫ, ВЛИЯЮЩИЕ НА РЕЗУЛЬТАТЫ: при долгом сдавливании сосуда повышаются при исследовании концентрации белков, липидов, билирубина, кальция, калия, активности ферментов, плазму нельзя использовать для определения калия, натрия, кальция, фосфора и т. д. , следует учитывать, что концентрация некоторых показателей в сыворотке и плазме различна -Концентрация в сыворотке больше чем в плазме: альбумин, ЩФ, глюкоза, мочевая кислота, натрий, ОБ, ТГ, амилаза -Концентрация в сыворотке равна плазме: АЛТ, билирубин, кальций, КФК, мочевина -Концентрация в сыворотке меньше чем в плазме: АСТ, калий, ЛДГ, фосфор
А ТАК ЖЕ. . гемолизированная сыворотка и плазма не пригодна для определения ЛДГ, Железа, АСТ, АЛТ, калия, магния, креатинина, билирубина и др. при комнатной температуре через 10 минут отмечается тенденция к снижению концентрации глюкозы, высокие концентрации билирубина, липемия и мутность проб завышают значения холестерина, билирубин всех фракций снижается на 30 50%, если сыворотка или плазма подвергаются воздействию прямого дневного света 1 2 часа, физические нагрузки, голодание, ожирение, прием пищи, травмы, операции, внутримышечные инъекции вызывают повышение ряд ферментов (АСТ, АЛТ, ЛДГ, КФК),
ОПРЕДЕЛЯЕМЫЕ КОМПОНЕНТЫ КРОВИ: 1. ФЕРМЕНТЫ Ферменты – основные биологические катализаторы, т. е. вещества природного происхождения, ускоряющие химические реакции. Также, ферменты принимают участие в регуляции многих метаболических процессов, обеспечивая тем самым соответствие обмена веществ изменённым условиям. Почти все ферменты являются белками. В зависимости от реакционной и субстратной специфичности, различают шесть основных классов ферментов (оксиредуктазы, трансферазы, гидролазы, лиазы, изомеразы и лигазы).
Каталитическое действие фермента, т. е. его активность, определяют в стандартных условиях по увеличению скорости каталитической реакции по сравнению с некаталитической. Скорость реакции обычно указывают как изменение концентрации субстрата или продукта за единицу времени (ммоль/л в секунду). Другой единицей активности является Международная единица (Ед. ) – количество фермента, превращающего 1 мкмоль субстрата в 1 минуту. Для клиники основное значение имеют следующие ферменты:
АСПАРТАТАМИНОТРАСФЕРАЗА (АСТ, АСАТ) Внутриклеточный фермент, участвующий в обмене аминокислот. В больших концентрациях содержится в печени, сердце, скелетной мускулатуре, мозге, эритроцитах. Высвобождается при повреждении ткани. Референтные интервалы: для собак – 8, 9 49 Ед. для кошек – 9, 2 – 40 Ед. для лошадей – 116 – 287 Ед. для КРС – 45 – 110 Ед. для свиней – 15 – 55 Ед. для овец – 49 – 123 Ед. для коз – 66 – 230 Ед. для кроликов – 14 – 113 Ед. Повышено: Некроз клеток печени любой этиологии, острые и хронические гепатиты, некроз сердечной мышцы, некроз или травма скелетных мышц, жировая дистрофия печени, поражение тканей мозга, почек; применение антикоагулянтов, витамина С Понижено: Диагностического значения не имеет (редко при недостатке пиридоксина (Витамина В 6).
АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗА (АЛТ, АЛАТ) Внутриклеточный фермент, участвующий в обмене аминокислот. В больших концентрациях содержится в печени, почках, В мышцах – в сердце и скелетной мускулатуре. Высвобождается при повреждении ткани, особенно при поражении печени. Референтне интервалы: для собак – 8, 2 – 57 Ед. для кошек – 8, 3 – 53 Ед. для лошадей 2, 7 – 21 Ед. для крс – 6, 9 – 35 Ед. для свиней – 22 – 47 Ед. для овец – 15 – 44 Ед. для коз – 15 – 52 Ед. для кроликов – 48 – 80 Ед. Повышено: Некроз клеток, острые и хронические гепатиты, холангит, жировая дистрофия п 47 ечени, опухоли печени, применение антикоагулянтов Понижено: Диагностического значения не имеет
КРЕАТИНФОСФОКИНАЗА (КФК, КК) КФК состоит из трёх изоферментов, состоящих из двух субъединиц, М и В. Скелетная мускулатура представлена изоферментом ММ (КФК ММ), мозг – изоферментом ВВ (КФК ВВ), миокард содержит около 40% изофермента МВ (КФК МВ). Референтные интервалы: для собак – 14 120 Ед; для кошек – 17 150 Ед. для лошадей – 34 166 Ед. для крс – 14 107 Ед. для свиньей – 66 489 Ед. для овец – 7. 7 101 Ед. для коз – 16 48 Ед. для кроликов – 218 2, 705 Ед. Повышено: Инфаркт миокарда (2 24 ч; высокоспецифична КФК МВ). Травмы, операции, миокардит, мышечные дистрофии, полимиозит, судороги, инфекции, эмболии, тяжелая физическая нагрузка, повреждение тканей мозга, кровоизлияние в мозг, наркоз, отравление (в т. ч. снотворными), кома, синдром Рейе. Незначительное увеличение при застойной сердечной недостаточности, тахикардии, артритах. Понижено: Диагностического значения не имеет.
ГАММА-ГЛУТАМИЛТРАНСФЕРАЗА (ГГТ) ГГТ присутствует в печени, почках, поджелудочной железе. Тест крайне чувствителен в отношении заболеваний печени. Установление высокого значения ГГТ используется для подтверждения печеночного происхождения активности сывороточной щелочной фосфатазы. Референтные интервалы: для собак – 10 Ед. ; для кошек – 1, 8 – 12 Ед. для лошадей – 2, 7 – 22 Ед. для крс – 4, 9 – 26 Ед. для свиней – 31 – 52 Ед. для овец – 20 – 44 Ед. для коз – 20 – 50 Ед. для кроликов – 0 – 14 Ед. Повышено: Гепатит, холестаз, опухоли и цирроз печени, поджелудочной железы, постинфарктный период; Понижено: Диагностического значения не имеет.
ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА (ЛДГ) ЛДГ – фермент, катализирующий внутреннюю конверсию лактата и пирувата в присутствии НАД/НАДН. Широко распространен в клетках и жидких средах организма. Повышается при разрушении тканей (искусственно завышается при гемолизе эритроцитов при неправильном взятии и хранении крови). Представлен пятью изоферментами (ЛДГ 1 – ЛДГ 5) Референтные интервалы: для взрослых собак – 24 219 Ед. для взрослых кошек 35 225 Ед. для крс 309 938 Ед. для лошадей 102 341 Ед. для свиней 160 425 Ед. для овец 83 476 Ед. для коз 79 265 Ед. для кроликов 34 129 Ед. у молодняка в период роста активность ЛДГ увеличивается в 2 – 3 раза. Повышено: Повреждение ткани миокарда (2 – 7 сутки после развития инфаркта миокарда), лейкозы, некротические процессы, опухоли, гепатиты, панкреатиты, нефриты, мышечные дистрофии, повреждения скелетной мускулатуры, гемолитическая анемия, недостаточность кровообращения, лептоспироз, инфекционный перитонит кошек. Понижено: Диагностического значения не имеет
АМИЛАЗА (ДИАСТАЗА) Гидролизирует сложные углеводы. Альфа амилаза сыворотки происходит первично из поджелудочной железы (панкреатическая) и слюнных желез, активность фермента возрастает при воспалении или обструкции. Некоторую амилазную активность имеют и другие органы – тонкий и толстый кишечник, скелетная мускулатура, яичники. У лошадей амилаза представлена, в основном, бета – фракцией. Референтные интервалы: для собак 270 1, 462 Ед. для кошек 371 1, 193 Ед. для крс 41 98 Ед. для лошадей 47 188 Ед. для свиней 44 88 Ед. для овец 140 270 Ед. для кроликов 167 315 Ед. Повышено: Панкреатит, паротит, почечная недостаточность (острая и хроническая), отравления, сахарный диабет, острый гепатит, первичный биллиарный цирроз печени, заворот желудка и кишечника, перитонит, нарушение электролитного обмена. Понижено: Некроз поджелудочной железы, тиреотоксикоз, отравление мышьяком, барбитуратами, тетрахлорметаном; применение антикоагулянтов.
ФОСФАТАЗА ЩЕЛОЧНАЯ (ЩФ) Щелочная фосфатаза содержится в печени, костях, кишечнике и плаценте. Для дифференциации активности ЩФ (печень или кости) используется определение ГГТ (увеличено при заболеваниях печени, и без изменений при заболеваниях костей). Референтные интервалы: для взрослых собак – 10. 6 101 Ед. для взрослых кошек 12 65 Ед. для крс 18 153 Ед. для лошадей 70 227 Ед. для свиней 41 176 Ед. для овец 27 156 Ед. для коз 61 283 Ед. для кроликов 4 16 Ед. у молодняка в период роста активность щелочной фосфатазы увеличивается в несколько раз и не является информативным показателем. Повышено: Заживление переломов, остеомаляция, опухоли костей, холангит, синдром Кушинга, обтурация желчных протоков, опухоли желчного пузыря; абсцесс, цирроз, рак печени, гепатит, бактериальные инфекции ЖКТ, жирный корм, беременность. Понижено: Гипотиреоз, анемия, гиповитаминоз С, применение кортикостероидов.
ФОСФАТАЗА КИСЛАЯ (КФ) У самцов 50% содержащейся в сыворотке КФ поступает из предстательной железы, а остальная часть – из печени и разрушающихся тромбоцитов и эритроцитов. У самок КФ вырабатывается печенью, эритроцитами и тромбоцитами. Референтные интервалы: собаки 1 6 Е/л кошки – 1 6 Е/л Повышено: Карцинома предстательной железы (в начальной стадии рака простаты активность КФ может быть в пределах нормы). При метастазах карциномы предстательной железы в костную ткань нарастает и ЩФ. Массаж предстательной железы, катетеризация, цистоскопия, ректальные исследования приводят к повышению КФ, поэтому кровь для анализа рекомендуется брать не ранее, чем через 48 часов после указанных процедур. Понижено: Диагностического значения не имеет.
ЛИПАЗА Липаза – фермент, катализирующий расщепление глицеридов высших жирных кислот. В организме вырабатывается рядом органов и тканей, что позволяет различать липазу желудочного происхождения, поджелудочной железы, липазу легких, кишечного сока, лейкоцитов и др. Сывороточная липаза представляет собой сумму органных липаз, а повышение ее активности является следствием патологического процесса в каком либо органе. Колебания активности сывороточной липазы у здорового животного незначительны. Референтные интервалы: собаки 30 250 Е/л кошки – 30 400 Е/л Повышено: Острый панкреатит (может быть увеличение в 200 раз по сравнению с нормой) – активность липазы в крови быстро увеличивается в течение нескольких часов после приступа панкреатита, достигая максимума через 12 24 часов, и остается повышенной в течение 10 12 дней, т. е. более продолжительное время, чем активность α амилазы. При злокачественном новообразовании поджелудочной железы в ранней стадии заболевания. Понижено: Рак желудка (при отсутствии метастазов в печень и поджелудочную железу), при злокачественном новообразовании поджелудочной железы в более поздний период заболевания (по мере разрешения ткани железы).
2. СУБСТРАТЫ И ЖИРЫ БИЛИРУБИН ОБЩИЙ Билирубин является продуктом метаболизма гемоглобина, конъюгируется в печени с глюкуроновой кислотой с образованием моно и диглюкуронидов, выделяемых с желчью (прямой билирубин). Уровень билирубина в сыворотке увеличивается при заболеваниях печени, обструкции желчных путей или гемолизе. При гемолизе образуется неконъюгированный (непрямой) билирубин, следовательно, будет наблюдаться высокий общий билирубин при нормальном прямом. Референтные интервалы: для собак – 30. 9 10. 6 мкмоль/л. для кошек 1. 2 7. 9 мкмоль/л. для крс 0. 7 14 мкмоль/л. для лошадей 5. 4 51 мкмоль/л. для свиней 0. 3 8. 2 мкмоль/л. для овец 0. 7 8. 6 мкмоль/л. для коз 1. 7 4. 3 мкмоль/л. для кроликов 0 12 мкмоль/л. Повышено: Повреждение клеток печени различного характера, обтурация желчных протоков, гемолиз Понижено: Заболевания костного мозга, анемия, гипоплазия, фиброз
БИЛИРУБИН ПРЯМОЙ Референтные интервалы: для собак – 0, 0 – 5, 5 мкмоль/л; для кошек – 0, 0 – 5, 5 мкмоль/л. для лошадей – 0, 0 – 10, 0 мкмоль/л. Повышено: обтурация желчных протоков, холестаз, абсцесс печени, лептоспироз, хронический гепатит Понижено: диагностического значения не имеет.
МОЧЕВИНА Мочевина образуется в печени в результате обезвреживания высокотоксичного аммиака, образуемого в результате бактериального брожения в желудочно кишечном тракте, дезаминирования аминокислот, пуриновых и пиримидиновых оснований, биогенных аминов и проч. Выделяется почками. Референтные интервалы: для собак – 3. 1 9. 2 ммоль/л. для кошек 5. 5 11. 1 ммоль/л. для крс 2. 8 8. 8 ммоль/л. для лошадей 3. 7 8. 8 ммоль/л. для свиней 2. 9 8. 8 ммоль/л. для овец 3. 7 9. 3 ммоль/л. для коз 4. 5 9. 2 ммоль/л. для кроликов 4. 6 10. 4 ммоль/л. Повышено: Нарушение функции почек (почечная недостаточность), богатое белком питание, острая гемолитическая анемия, шок, стресс, рвота, понос, острый инфаркт миокарда Понижено: Низкое поступление белка в организм, тяжелые заболевания печени
КРЕАТИНИН Креатинин представляет собой конечный продукт метаболизма креатина, синтезируемого в почках и печени из трех аминокислот (аргинина, глицина, метионина). Креатинин полностью выделяется из организма почками путём клубочковой фильтрации, не реабсорбируясь в почечных канальцах. Это свойство креатинина используется для исследования уровня клубочковой фильтрации по клиренсу креатинина в моче и сыворотке крови. Референтные интервалы: для собак – 44 138 мкмоль/л. для кошек 49 165 мкмоль/л. для крс 56 162 мкмоль/л. для лошадей 77 175 мкмоль/л. для свиней 70 208 мкмоль/л. для овец 76 174 мкмоль/л. для коз 60 135 мкмоль/л. для кроликов 44 221 мкмоль/л. Повышено: Нарушение функции почек (почечная недостаточность), гипертиреоз, применение фуросемида, витамина С. , глюкозы, индометацина, маннита. Пациенты с диабетическим кетоацидозом могут иметь ложно завышенный уровень креатинина. Понижено: Беременность, возрастные уменьшения мышечной массы
МОЧЕВАЯ КИСЛОТА Мочевая кислота является конечным продуктом пуринового обмена. Она образуется в печени в результате распада нуклеотидов, дезаминирования аминопуринов и последующего окисления оксипуринов. Выводится из организма почками. Референтные интервалы: собаки 9 100 мкмоль/л кошки до 150 мкмоль/л Повышено: Значительно при нарушении выведения мочевой кислоты из организма (заболевания почек, мочекаменная болезнь, ацидоз, токсикоз), подагра – обусловлена увеличением синтеза мочевой кислоты. Незначительно – приеме корма богатого пуринами (мясо, печень, почки), некоторых гематологических заболеваниях (лейкозы, В 12 дефицит. анемия), клеточном цитолизе, сахарном диабете. Понижено: Диагностического значения не имеет.
ОБЩИЙ БЕЛОК Общий белок сыворотки состоит, главным образом, из альбуминов и глобулинов. Уровень глобулинов рассчитывается путём вычитания из общего уровня белка уровня альбумина. Гипопротеинемия указывает на гипоальбуминемию, т. к. альбумин является основным сывороточным белком. Концентрация белка сыворотки / плазмы определяется состоянием питания, функцией печени, почек, гидратацией и различными патологическими процессами. Концентрация белка определяет коллоидное осмотическое (онкотическое) давление. Референтные интервалы: для собак – 40, 0 – 73, 0 г/л; для кошек – 54, 0 – 77, 0 г/л. для крс – 62 – 82 г/л. для лошадей – 47, 0 – 75, 0 г/л; для свиней – 58 – 83 г/л. для овец – 59 – 78 г/л. для коз – 61 – 75 г/л. для кроликов – 54 – 83 г/л. Повышено: Дегидратация, венозный стаз. Опухоли, воспалительные процессы, инфекции, гипериммуноглобулинемия Понижено: Потери белка при гастроэнтеропатиях, нефротический синдром, снижение синтеза белка, хронические гепатиты, гепатозы, нарушение всасывания белка
АЛЬБУМИН Альбумины – наиболее гомогенная фракция простых белков, почти исключительно синтезирующихся в печени. Около 40% альбуминов находятся в плазме, остальные – в межклеточной жидкости. Основные функции альбуминов – поддержание онкотического давления, а также участие в транспорте мелких эндо и экзогенных веществ (свободных жирных кислот, билирубина, стероидных гормонов, магния, кальция, лекарственных веществ, и проч. ). Референтные интервалы: для собак – 22, 0 – 39, 0 г/л; для кошек – 25, 0 – 37, 0 г/л. для крс – 28 – 39 г/л. для лошадей – 27, 0 – 37, 0 г/л. для свиней – 23 – 40 г/л. для овец – 27 – 37 г/л. для коз – 23 – 36 г/л. для кроликов – 24 – 46 г/л. Повышено: Состояние дегидратации; Понижено: Дистрофия алиментарная, острые и хронические гепатиты, цирроз печени, заболевания ЖКТ, нефротический синдром, хронический пиелонефрит, синдром Кушинга, кахексия, тяжелые инфекции, панкреатит, экземы, экссудативные дерматопатии.
ГЛЮКОЗА Уровень глюкозы крови – основной показатель углеводного обмена. Поскольку глюкоза равномерно распределяется между плазмой и форменными элементами, её количество можно определять как в цельной крови, так и в сыворотке и плазме. Референтные интервалы: для собак – 4, 3 – 7, 3 ммоль/л; для кошек – 3, 3 – 6, 3 ммоль/л для крс – 2, 3 – 4, 1 ммоль/л. . для лошадей – 3, 0 – 7, 0 ммоль/л. для свиней – 3, 7 – 6, 4 ммоль/л. для овец – 2, 4 – 4, 5 ммоль/л. для коз 2, 7 – 4, 2 ммоль/л. для кроликов – 4, 1 – 8, 5 ммоль/л. Повышено: сахарный диабет, синдром Кушинга, стресс, шок, инсульт, инфаркт миокарда, физическая нагрузка, хронические заболевания печени и почек, феохромацитома, глюкангиома, панкреатит, применение кортикостероидов, никотиновой кислоты, витамина С, диуретиков. Понижено: Заболевания поджелудочной железы, рак желудка, фибросаркома, поражение паренхимы печени, инсулиновый шок
ХОЛЕСТЕРИН Уровень холестерина определяется метаболизмом жиров, который, в свою очередь зависит от наследственности, диеты, функции печени, почек, щитовидной железы и других эндокринных органов. Общий холестерин состоит из липопротеинов низкой и высокой плотности (ЛПНП и ЛПВП) и, приблизительно, пятой части триглицеридов. Референтные интервалы: для собак – 2, 9 – 6, 5 ммоль/л; для кошек – 1. 6 – 3, 7 ммоль/л. для крс – 1, 6 – 5, 0 ммоль/л. для лошадей – 2, 3 – 3, 6 ммоль/л. для свиней – 2, 1 – 3, 5 ммоль/л. для овец – 1, 1 – 2, 3 ммоль/л. для коз – 1, 7 – 3, 5 ммоль/л. для кроликов – 0, 3 – 2, 1 ммоль/л. Повышено: Гиперлипопротеинемия, заболевания печени, холестаз, хроническая почечная недостаточность, нефротический синдром, опухоли поджелудочной железы, ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, гипертоническая болезнь, сахарный диабет, применение кортикостероидов, сульфаниламидов, тиазидных диуретиков Понижено: Дефицит ЛПВП, гипопротеинемия, опухоли и цирроз печени, гипертиреоз, острая и хроническая почечная недостаточность, печеночная недостаточность (терминальные стадии), ревматоидный артрит, недостаточность питания и всасывания, острые инфекции
ТРИГЛИЦЕРИДЫ Жиры корма гидролизуются в тонком кишечнике, абсорбируются и ресинтезируются клетками слизистой, после чего секретируются в лимфатические сосуды в виде хиломикронов. Триглицериды хиломикронов выводятся из крови тканевой липопротеинлипазой. В печени происходит эндогенная продукция триглицеридов. Эти триглицериды транспортируются в ассоциации с липопротеинами в составе липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП). Референтные интервалы: для собак – 0, 24 – 0, 98 ммоль/л; для кошек – 0, 38 – 1, 10 ммоль/л. для лошадей – 0, 1 – 0, 4 ммоль/л. Повышено: Гиперлипопротеинемия, сахарный диабет, гепатит, цирроз, обтурационная желтуха, острый и хронический панкреатит, нефротический синдром, хроническая почечная недостаточность, острый инфаркт миокарда, ишемическая болезнь сердца, беременность, стресс; прием кортикостероидов, эстрогенов, бета блокаторов, диуретиков, диета с высоким содержанием жира, углеводов; Понижено: Голодание, гипертиреоз, острые инфекции, хронические обструктивные заболевания легких, гипертиреоз; прием аскорбиновой кислоты, гепарина;
ЭЛЕКТРОЛИТЫ Калий (К) Калий является основным внутриклеточным катионом, концентрация которого в сыворотке регулируется его выделением с мочой, и другими механизмами. Концентрация калия в сыворотке определяет нервно мышечную возбудимость. Сниженный или повышенный уровень калия в крови влияет на мышечную сократимость Референтные интервалы: для собак – 4, 3 – 6, 2 ммоль/л; для кошек – 4, 1 – 5, 4 ммоль/л. для крс – 4, 0 – 5, 8 ммоль/л. для лошадей – 2, 2 – 4, 5 ммоль/л. для свиней – 4, 4 – 6, 5 ммоль/л. для овец – 4, 3 – 6, 3 ммоль/л. для коз – 3, 8 – 5, 7 ммоль/л. для кроликов – 3, 6 – 6, 9 ммоль/л. Повышено: Гемолиз, повреждение тканей, голодание, диабетический кетоацидоз, почечная недостаточность с анурией, олигурией, ацидозом, прием калий сберегающих диуретиков (спиронолактон, триамтерен), бета блокаторов, ингибиторов АПФ, высоких доз сульфадиметоксина (Ко тримоксазола). Понижено: Голодание, рвота, понос, почечный канальцевый ацидоз, альдостеронизм, мышечная атрофия, применение фуросемида, стероидов, инсулина, глюкозы.
НАТРИЙ (NA) Натрий – преобладающий внеклеточный катион. Уровень натрия, в первую очередь, определяется волемическим статусом организма. Референтные интервалы: для собак – 138 – 164 ммоль/л; для кошек – 143 – 165 ммоль/л. для крс – 135 – 148 ммоль/л. для лошадей – 130 – 143 ммоль/л. для свиней – 139 – 153 ммоль/л. для овец – 142 – 160 ммоль/л. для коз – 137 – 152 ммоль/л. для кроликов – 131 – 155 ммоль/л. Повышено: дегидратация, полиурия, сахарный и несахарный диабет, хронический гломерулонефрит, гипопаратиреоз, хроническая почечная недостаточность, опухоли костей, остеолиз, остеодистрофия, гипервитаминоз Д, прием фуросемида, тетрациклина, стероидных гормонов. Понижено: Дефицит витамина Д, остеомаляция, мальадсорбция, гиперинсулинизм, прием анальгетиков, противосудорожных, инсулина. Ложная гипонатриемия может иметь место при тяжелой липемии или гиперпротеинемии, если анализ делается с разведением пробы.
КАЛЬЦИЙ ОБЩИЙ (СА) Кальций сыворотки является суммой ионов кальция, в т. ч. связанного с белками (в основном, с альбумином). Уровень ионов кальция регулируется паратиреоидным гормоном и витамином Д. Референтные интервалы: для собак – 2, 3 – 3, 3 ммоль/л; для кошек – 2, 0 – 2, 7 ммоль/л. для крс – 2, 1 – 2, 8 ммоль/л. для лошадей – 2, 6 – 4, 0 ммоль/л. для свиней – 2, 3 – 2, 9 ммоль/л. для овец – 2, 3 – 2, 9 ммоль/л. для коз – 2, 3 – 2, 9 ммоль/л. для кроликов – 1, 4 – 3, 1 ммоль/л. Повышено: Гиперпаратиреоз, опухоли костей, лимфома, лейкоз, саркоидоз, передозировка витамина Д Понижено: Гипопаратиреоз, гиповитаминоз Д, хроническая почечная недостаточность, цирроз печени, панкреатит, остеомаляция, применение противосудорожных препаратов.
ФОСФОР (Р) Концентрация неорганических фосфатов в плазме крови определяется функцией паращитовидных желез, активностью витамина Д, процессом всасывания в ЖКТ, функцией почек, костным метаболизмом и питанием. Оценивать показатель необходимо в комплексе с кальцием и щелочной фосфатазой. Референтные интервалы: для собак – 1, 13 – 3, 0 ммоль/л; для кошек – 1, 1 – 2, 3 ммоль/л. для крс – 1, 4 – 2, 5 ммоль/л. для лошадей – 0, 7 – 1, 9 ммоль/л. для свиней – 1, 8 – 3, 0 ммоль/л. для овец – 1, 3 – 2, 4 ммоль/л. для коз – 1, 2 – 3, 1 ммоль/л. для кроликов – 1, 3 – 2, 2 ммоль/л. Повышено: Почечная недостаточность, массивные гемотрансфузии, гипопаратиреоидизм, Гипервитаминоз Д, опухоли костей, лимфома, лейкоз, кетоз при сахарном диабете, заживающие переломы костей, применение диуретиков, анаболических стероидов. Понижено: Гиперпаратиреоз, гиповитаминоз Д (рахит, остеомаляция), заболевания ЖКТ, нарушение питания, сильная диарея, рвота, струйное внутривенное введение глюкозы, инсулинотерапия, применение противосудорожных препаратов.
МАГНИЙ (MG) Магний, в первую очередь, является внутриклеточным катионом (60% содержится в костях); он является необходимым кофактором многочисленных ферментных систем, особенно АТФаз. Магний влияет на нервно мышечный ответ и возбудимость. Концентрация магния во внеклеточной жидкости определяется его всасыванием из кишечника, выделением почками, и обменом с костями и внутриклеточной жидкостью. Референтные интервалы: для собак – 0, 8 – 1, 4 ммоль/л; для кошек – 0, 9 – 1, 6 ммоль/л. для крс – 0, 7 – 1, 2 ммоль/л. для лошадей – 0, 6 – 1, 5 ммоль/л. для свиней – 0, 9 – 1, 4 ммоль/л. для овец – 0, 8 – 1, 1 ммоль/л. для коз – 0, 9 – 1, 2 ммоль/л. Повышено: Дегидратация, почечная недостаточность, травма тканей, гипокортицизм; прием ацетилсалицилата (длительное), триамтерена, солей магния, прогестерона. Понижено: Недостаток магния, тетания, острый панкреатит, беременность, понос, рвота, применение диуретиков, солей кальция, цитратов (при гемотрансфузии).
ХЛОР (CL) Хлор – важнейший неорганический анион внеклеточной жидкости, важен в поддержании нормального кислотно щелочного равновесия и нормальной осмоляльности. При потере хлоридов (в виде HCl или. NH 4 Cl) наступает алкалоз, приёме внутрь или инъекции хлоридов возникает ацидоз. Референтные интервалы: для собак – 96, 0 – 118, 0 ммоль/л; для кошек – 107, 0 – 122, 0 ммоль/л. для крс – 96, 0 – 109, 0 ммоль/л. для лошадей – 94, 0 – 106, 0 ммоль/л. для свиней – 97, 0 – 106, 0 ммоль/л. для овец – 101, 0 – 113, 0 ммоль/л. для коз – 100, 0 – 112, 0 ммоль/л. для кроликов 92, 0 – 112, 0 ммоль/л. Повышено: Гипогидратация, острая почечная недостаточность, несахарный диабет, почечный канальцевый ацидоз, метаболический ацидоз, респираторный алкалоз, гипофункция надпочечников, черепно мозговые травмы, приём кортикостероидов, салицилатов (интоксикации). Понижено: Алкалоз гипохлоремический, после пункций при асците, длительная рвота, понос, респираторный ацидоз, нефриты, прием слабительных, диуретиков, кортикостероидов (длительно).
КИСЛОТНОСТЬ (PH) Референтные интервалы: для собак – 7, 35 – 7, 45 ; для кошек – 7, 35 – 7, 45; для лошадей – 7, 35 – 7, 45. Повышено: Алкалоз (респираторный, нереспираторный) Понижено: Ацидоз (респираторный, метаболический)
ВОЗМОЖНЫЕ ОШИБКИ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ КРОВИ Лабораторный этап обработки проб крови вносит свой вклад в погрешность результатов, которые можно разделить на три вида: случайные систематические грубые.
Случайными называются неопределенные по величине и знаку ошибки, в появлении которых не наблюдается закономерности. Случайные ошибки сопутствуют любому измерению, как бы тщательно оно не проводилось, и проявляются в некотором различии результатов измерения одного и того же элемента, выполненного данным методом. Эти развития обусловлены колебаниями: 1) свойств пробы негомогенность, неравномерность перемешивания; 2) точности измерительного инструмента пипеток, мерной посуды, термо и фотометрических приборов, счетных камер; 3) точности работы персонала лаборатории неточное пипетирование или считывание результатов, ошибка утом ления, неверный подбор класса точности инструментов, психологичес кая ошибка, например, оказание предпочтения каким либо цифрам и т. д. Величина случайной ошибки характеризует воспроизводимость результатов исследований.
К систематическим ошибкам относятся погрешности, происходящие от определенных причин. Одинаковые по знаку, они либо увеличивают, либо уменьшают истинные результаты. После выяснения причины, вызы вающей систематическую ошибку, ее можно устранить или ввести поп равочный коэффициент. Причиной систематических ошибок являются: методические ошибки, обусловленные возможностью метода ана лиза; наиболее серьезная, и трудно устранимая причина искажений результатов; ошибки, зависящие от применяемых приборов и реактивов, оп ределяются точностью приборов, загрязнением реактивов продуктами разрушения тары, взаимодействием с воздушной средой и испарения ми других реактивов и др. ; ошибки оперативные, происходящие от неправильного или не точного выполнения операции, например, изменение времени окраши вания, неправильное выливание растворов из пипеток; ошибки индивидуальные, зависящие от личных способностей оператора, его органов чувств, привычек. Величина систематической ошибки влияет на всю серию определений и характеризует правильность результатов анализа.
Грубыми ошибками называют полученные одиночные значения анализируемого параметра, выходящие за пределы допустимой величины погрешностей. Причиной грубых ошибок может стать неправильная до за препарата, ошибки в расчетах, небрежность или недостаточная тщательность в работе. Необходимо отличать грубые ошибки от пока зателей, характеризующих резкие изменения исследуемых параметров; последние проверяются повторными или параллельными анализами.
Среди способов выявления случайных ошибок в лабораторной практике применяют анализ двух (или нескольких) параллельных проб а также последовательное проведение анализов повторно у одного и того же животного. Расхождение результатов свидетельствует об ошибке. Если все или большинство результатов, полученных в течение дня, отличается от обычных значений возможно присутствие систематической ошибки. В поисках ее причин полезным подспорьем являются записи в лабораторном журнале, анализ которых позволяет выявить значение новой партии реактива, составление нового калибровочного графика или реактива, отключение для профилактики холодильника или термостата, замена ламп в фотометре и т. д. Использование автоматических устройств для анализа ведет к сокращению числа случай ных ошибок, но увеличивает необходимость контроля за систематическими погрешностями.
ВЫВОД Результаты биохимического анализа крови заносятся в специальный бланк, в котором перечисляются исследуемые показатели и их содержание в крови животного. Существуют определенные нормы биохимии крови, то есть определенный уровень концентрации веществ, который должен присутствовать в крови здорового животного. Это статистически установленные показатели здоровых животных. Отклонение от нормы говорит о различных нарушениях в деятельности организма, о сбое в работе определенных органов или систем. Получая результат биохимического анализа крови, ветеринарный врач сравнивает результаты анализа крови с теми цифрами, которые являются общепринятыми и эталонными для анализов крови здоровых животных, то есть с нормой. После сопоставления результатов исследования с симптоматикой заболевания ставится диагноз. Значения нормы биохимических анализов крови могут различаться в зависимости от породы, пола или возраста животного.
Скачать презентацию БИОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ С Х ЖИВОТНЫХ Выполнила Лоретц А
биохимическое исследование крови.pptx