БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ В КЛИНИЧЕСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ООО «Люмтек» , Москва, Научный Парк МГУ Генеральный директор, профессор, доктор наук Угарова Наталья Николаевна E-mail: nugarova@gmail. com
КЛАССИЧЕСКИЙ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД ДЕТЕКЦИИ МИКРОБНЫХ КЛЕТОК Ø длительность анализа: от 24 -120 часов до 5 недель Ø высокая трудоемкость Ø анализ в специализированной лаборатории Ø экологическая опасность
АТФ - УНИВЕРСАЛЬНЫЙ ИНДИКАТОР ПРИСУТСТВИЯ ЖИВЫХ КЛЕТОК Биологический материал Ткани млекопитающих Бактерии Одноклеточные водоросли Содержание АТФ, мкг/г сухой биомассы 500 -5000 1000 -10000 500 -5000
КОРРЕЛЯЦИЯ МЕЖДУ КОНЦЕНТРАЦИЕЙ АТФ И ТИТРОМ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК В ОБРАЗЦЕ
ЛЮЦИФЕРИН-ЛЮЦИФЕРАЗНАЯ СИСТЕМА СВЕТЛЯКОВ АТФ-реагент D-люциферин, Mg. SO 4, люцифераза + ATФ Продукты реакции + Свет ( max = 570 нм)
АТФ-РЕАГЕНТЫ (защищены патентами РФ) Основные достоинства: § Высокая активность § Стабильный во времени сигнал биолюминесценции § Длительный срок хранения
ЛЮМИНОМЕТР «ЛЮМ-1» (совместная разработка МГУ и ООО «Люмтек» ) Ш широкий рабочий интервал измеряемых сигналов Ш вес прибора: 650 г Ш рабочий диапазон температур: от 10 С до 30 С Ш встроенная память Ш наличие интерфейса Ш программное обеспечение Ш автономное питание
КОРРЕЛЯЦИЯ МЕЖДУ КОНЦЕНТРАЦИЕЙ АТФ И ИНТЕНСИВНОСТЬЮ БИОЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ
Корреляция между интенсивностью биолюминесценции и титром бактериальных клеток в анализируемом образце
БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ АТФ-МЕТРИЯ В МЕДИЦИНЕ Ø скрининг микробных загрязнений в биологических жидкостях ( моча, кровь, раны) Ø быстрое определение чувствительности возбудителя к антибиотикам при химиотерапии инфекционных заболеваний Ø оценка чистоты оборудования и материалов в операционных и других помещениях клиник
БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ СКРИНИНГ БАКТЕРИУРИИ (10 -минутный тест) Общее содержание Общий АТФ, Рекомендации микробных пмоль/мл клеток, КОЕ/мл 0 – 103 <60 103 – 104 60 - 150 Свыше 105 Свыше 150 Норма посев не требуется Группа риска посев требуется Патология посев требуется
АНТИБИОТИКОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ КЛИНИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ Коэффициент относительного подавления роста микробных клеток под действием антибиотика U(%) = 100 x [(1 - (Iпроба) /(Iконтр)]
ЭКСПРЕС-КОНТРОЛЬ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЧИСТОТЫ В КЛИНИКЕ Сильно загрязненные поверхности Длительность анализа – 5 мин Мало загрязненные поверхности Длительность анализа – до 7 часов Стерильные поверхности Длительность анализа – 7 часов Более 100 клеток на 100 см 2 Высокий сигнал биолюминесценции Менее 100 клеток на 100 см 2 Измерение сигнала биолюминесценции только после инкубирования Нет сигнала биолюминесценции
ПРЕИМУЩЕСТВА ТЕСТ-СИСТЕМ ЛЮМТЕК Оперативность: длительность анализа от 2 до 30 мин на один образец Ø Мобильность: возможность проводить анализ в полевых условиях Ø Ø Экологическая чистота: безотходные технологии Высокая чувствительность: от 100 КОЕ/мл(г) образца без предварительной инкубации Ø Простота и удобство: анализ проводится лаборантом средней квалификации Ø Правильность: точная количественная оценка жизнеспособных клеток в образце Ø
Скачать презентацию БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ В КЛИНИЧЕСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ ООО Люмтек
0d9a9d80e2bf5d46c4bc453fed192c5d.ppt